| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 引言 | 第14-19页 |
| 第一部分 雷同藤甲素抑制MCF-7ADM细胞耐阿霉素作用 | 第19-27页 |
| 1 前言 | 第19页 |
| 2 实验材料 | 第19-21页 |
| 2.1 细胞株 | 第19页 |
| 2.2 实验试剂 | 第19-20页 |
| 2.3 实验仪器与设备 | 第20页 |
| 2.4 缓冲液及其他溶液配制 | 第20-21页 |
| 3 实验方法 | 第21-22页 |
| 3.1 SRB法检测ADR、Triptolide及联合给药对MCF-7ADM细胞毒 | 第21-22页 |
| 3.1.1 ADR对MCF-7ADM细胞的细胞毒 | 第21页 |
| 3.1.2 Tpl.对MCF-7ADM细胞的细胞毒 | 第21-22页 |
| 3.1.3 Tpl.与ADR联合对MCF-7ADM细胞的细胞毒 | 第22页 |
| 4 实验结果 | 第22-25页 |
| 4.1 Tpl.、ADR及两者联合对MCF-7ADM细胞增殖抑制作用 | 第22-24页 |
| 4.2 Tpl.与ADR联合起到协同作用 | 第24-25页 |
| 5 讨论 | 第25-27页 |
| 第二部分 雷公藤甲素对乳腺癌干细胞干性的影响 | 第27-44页 |
| 1 前言 | 第27-28页 |
| 2 实验材料 | 第28-30页 |
| 2.1 细胞株 | 第28页 |
| 2.2 实验试剂 | 第28-29页 |
| 2.3 实验仪器与设备 | 第29页 |
| 2.4 缓冲液及其他溶液配制 | 第29-30页 |
| 3 实验方法 | 第30-33页 |
| 3.1 流式检测两种乳腺癌细胞株中CD44~+CD24~(-/low)干细胞比例 | 第30页 |
| 3.2 Tpl.对MCF-7ADM及MCF-7细胞中SP细胞比例影响 | 第30-31页 |
| 3.3 Tpl.对MCF-7ADM细胞中CD44~+CD24~(-/low)干细胞比例影响 | 第31页 |
| 3.4 Tpl.对乳腺癌细胞株克隆形成影响 | 第31-32页 |
| 3.4.1 MCF-7微球体形成实验 | 第31-32页 |
| 3.4.2 MCF-7ADM双层软琼脂克隆形成实验 | 第32页 |
| 3.5 Tpl.对MCF-7ADM划痕愈合影响 | 第32-33页 |
| 4 实验结果 | 第33-40页 |
| 4.1 MCF-7ADM细胞中高表达CD44~+CD24~(-/low)干细胞 | 第33页 |
| 4.2 Tpl.可降低乳腺癌细胞中SP细胞比例 | 第33-35页 |
| 4.2.1 Tpl.减少MCF-7ADM细胞中SP细胞比例 | 第33-34页 |
| 4.2.2 Tpl.显著降低MCF-7细胞中SP细胞比例 | 第34-35页 |
| 4.3 Tpl.可明显降低MCF-7ADM细胞中CD44~+CD24~(-/low)干细胞比例 | 第35-36页 |
| 4.4 Tpl.明显抑制乳腺癌细胞克隆形成 | 第36-39页 |
| 4.4.1 Tpl.影响MCF-7细胞微球体生长 | 第36-37页 |
| 4.4.2 Tpl.抑制MCF-7ADM软琼脂克隆形成 | 第37-39页 |
| 4.5 Tpl.抑制MCF-7ADM细胞划痕愈合 | 第39-40页 |
| 5 讨论 | 第40-44页 |
| 第三部分 雷公藤甲素影响乳腺癌干细胞分子机制初步研究 | 第44-64页 |
| 1 前言 | 第44-46页 |
| 2 实验材料 | 第46-49页 |
| 2.1 细胞株 | 第46页 |
| 2.2 实验试剂 | 第46-47页 |
| 2.3 实验仪器与设备 | 第47-48页 |
| 2.4 缓冲液及其他溶液配制 | 第48-49页 |
| 3 实验方法 | 第49-53页 |
| 3.1 流式检测MCF-7及其微球体中CD44~+CD24~(-/low)干细胞比例 | 第49页 |
| 3.2 WB检测B4GalT5在MCF-7、MCF-7ADM、微球体及BCSCs与Non-BCSCs中表达差异 | 第49-50页 |
| 3.3 WB检测Tpl.对MCF-7ADM中B4GalT5、β-catenin表达影响 | 第50-51页 |
| 3.4 RT-PCR检测B4GalT5干扰效果 | 第51-52页 |
| 3.5 WB检测B4GalT5干扰后此蛋白表达情况 | 第52页 |
| 3.6 WB检测B4GalT5干扰后蛋白糖基化修饰及β-catenin表达差异 | 第52页 |
| 3.7 流式检测B4GalT5干扰后SP细胞比例 | 第52-53页 |
| 3.8 流式检测B4GalT5干扰后CD44~+CD24~(-/low)干细胞比例 | 第53页 |
| 3.9 B4GalT5干扰后对MCF-7ADM细胞划痕愈合影响 | 第53页 |
| 4 实验结果 | 第53-59页 |
| 4.1 MCF-7微球体可富集CD44~+CD24~(-/low)干细胞 | 第53-54页 |
| 4.2 MCF-7微球体、MCF-7ADM及BCSCs中B4GalT5表达上调 | 第54-55页 |
| 4.3 Tpl.明显抑制B4GalT5、β-catenin表达 | 第55-56页 |
| 4.4 RT-PCR、WB检测B4GalT5干扰效果 | 第56页 |
| 4.5 B4GalT5干扰后蛋白糖基化修饰减少 | 第56-57页 |
| 4.6 B4GalT5干扰后SP细胞比例降低 | 第57-58页 |
| 4.7 B4GalT5干扰后CD44~+CD24~(-/low)干细胞比例降低 | 第58-59页 |
| 4.8 B4GalT5干扰影响MCF-7ADM细胞划痕愈合 | 第59页 |
| 5 讨论 | 第59-64页 |
| 结论与展望 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
| 个人简历 | 第71-72页 |
| 发表学术论文 | 第72页 |
