| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 1.引言 | 第11-17页 |
| 1.1 萘酰亚胺多胺缀合物的研究进展 | 第11-13页 |
| 1.1.1 萘酰亚胺类化合物的发展进程 | 第11-12页 |
| 1.1.2 多胺 | 第12页 |
| 1.1.3 多胺与肿瘤 | 第12页 |
| 1.1.4 多胺缀合物 | 第12-13页 |
| 1.2 自噬 | 第13-17页 |
| 1.2.1 自噬的发生过程 | 第13-14页 |
| 1.2.2 自噬与肿瘤 | 第14页 |
| 1.2.3 ROS | 第14-15页 |
| 1.2.4 ROS与自噬的关系 | 第15页 |
| 1.2.5 ROS诱导自噬发生 | 第15页 |
| 1.2.6 自噬调节ROS水平 | 第15-17页 |
| 2.实验材料，试剂，仪器 | 第17-25页 |
| 2.1 实验材料 | 第17页 |
| 2.1.1 肿瘤细胞株 | 第17页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第17页 |
| 2.2 实验试剂 | 第17-20页 |
| 2.2.1 细胞培养试剂及材料 | 第17-18页 |
| 2.2.2 Western Blotting试剂 | 第18-19页 |
| 2.2.3 荧光染色试剂盒 | 第19页 |
| 2.2.4 其他试剂及材料 | 第19-20页 |
| 2.3 实验所用溶液的配制 | 第20-23页 |
| 2.3.1 细胞培养所用溶液 | 第20-21页 |
| 2.3.2 MTT实验所用试剂及化合物的配制 | 第21页 |
| 2.3.3 荧光染料的配制 | 第21-22页 |
| 2.3.4 Western Blotting实验试剂配制 | 第22-23页 |
| 2.3.5 动物实验试剂的配制 | 第23页 |
| 2.4 重要仪器设备 | 第23-25页 |
| 3.实验方法 | 第25-37页 |
| 3.1 细胞复苏与细胞培养 | 第25-26页 |
| 3.1.1 细胞复苏 | 第25页 |
| 3.1.2 细胞换液 | 第25页 |
| 3.1.3 细胞传代 | 第25-26页 |
| 3.1.4 细胞冻存 | 第26页 |
| 3.2 MTT法检测细胞抗肿瘤活性 | 第26-27页 |
| 3.3 MDC染色法检测肝癌细胞自噬 | 第27页 |
| 3.4 高内涵细胞成像系统检测细胞荧光强度 | 第27页 |
| 3.5 流式细胞仪检测肝癌细胞ROS水平 | 第27页 |
| 3.6 Annexin V和PI双染检测肝癌细胞凋亡 | 第27-28页 |
| 3.7 划痕实验 | 第28页 |
| 3.8 Western Blotting | 第28-31页 |
| 3.8.1 收集细胞 | 第28页 |
| 3.8.2 蛋白定量 | 第28-29页 |
| 3.8.3 Western Blotting具体操作步骤 | 第29-31页 |
| 3.9 探索TZY7对肝癌细胞的抑制作用与ROS的关系 | 第31-32页 |
| 3.9.1 MTT法实验步骤 | 第31页 |
| 3.9.2 MDC荧光染色法 | 第31-32页 |
| 3.9.3 Western Blotting | 第32页 |
| 3.10 动物实验方法 | 第32-34页 |
| 3.10.1 TZY7急性毒性实验 | 第32-33页 |
| 3.10.2 H22细胞的复苏 | 第33页 |
| 3.10.3 荷瘤小鼠模型 | 第33页 |
| 3.10.4 分组 | 第33-34页 |
| 3.10.5 给药 | 第34页 |
| 3.10.6 处死 | 第34页 |
| 3.10.7 拍照 | 第34页 |
| 3.10.8 计算 | 第34页 |
| 3.10.9 组织切片拍照 | 第34页 |
| 3.11 统计学方法 | 第34-37页 |
| 4.实验结果 | 第37-57页 |
| 4.1 TZY7对两种肝癌细胞增殖的影响 | 第37页 |
| 4.2 MDC荧光染色法检测TZY7对两种肝癌细胞自噬的影响 | 第37-39页 |
| 4.3 TZY7对肝癌细胞自噬相关蛋白表达的影响 | 第39-41页 |
| 4.4 TZY7对肝癌细胞凋亡的影响 | 第41-44页 |
| 4.5 TZY7作用肝癌细胞 24 h后对活性氧的影响 | 第44-45页 |
| 4.6 TZY7作用肝癌细胞 48 h后活性氧的变化 | 第45-46页 |
| 4.7 TZY7联用NAC后对Hep G2细胞自噬的影响 | 第46-47页 |
| 4.8 TZY7联用NAC后对SMMC-7721 细胞自噬的影响 | 第47-48页 |
| 4.9 TZY7对肝癌细胞运动能力的影响 | 第48-50页 |
| 4.10 化合物TZY7对肝癌细胞迁移相关蛋白的表达影响 | 第50-51页 |
| 4.11 化合物TZY7对荷H22肝癌细胞的小鼠实体瘤的影响 | 第51-53页 |
| 4.12 化合物TZY7对荷H22肝癌细胞的小鼠肺转移的影响 | 第53-55页 |
| 4.13 化合物TZY7对荷CT-26 结肠癌细胞的小鼠肺转移的影响 | 第55-57页 |
| 5.讨论 | 第57-61页 |
| 6.实验结论 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 附录 | 第69-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
