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人源Fab抗体库的构建和抗流感病毒抗体的筛选及其特性鉴定

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-7页
引言第10-21页
    1 抗体的制备第10-12页
        1.1 第一代—多克隆抗体第10-11页
        1.2 第二代—单克隆抗体第11页
        1.3 第三代抗体—基因工程抗体第11-12页
    2 噬菌体抗体库技术第12-19页
        2.1 噬菌体抗体库技术的概述第12-13页
        2.2 噬菌体抗体的表达载体第13-14页
        2.3 噬菌体抗体库的构建第14-15页
        2.4 噬菌体抗体的富集和筛选—"生物淘洗"第15-16页
        2.5 噬菌体抗体分子的亲和力成熟第16页
        2.6 抗体的表达第16-17页
        2.7 噬菌体抗体库的应用前景第17-19页
    3 本研究的技术路线第19-21页
第一章 天然人源Fab噬菌体抗体库的构建第21-41页
    1 材料第21-22页
        1.1 载体、宿主菌与辅助噬菌体第21页
        1.2 主要仪器和设备第21页
        1.3 主要试剂盒和试剂第21-22页
    2 方法第22-33页
        2.1 人外周血淋巴细胞的分离第22页
        2.2 人外周血淋巴细胞总RNA的提取第22-23页
        2.3 cDNA第一链的合成第23-24页
        2.4 PCR扩增Fab抗体基因第24-27页
        2.5 PCR产物胶纯化回收第27页
        2.6 轻链抗体基因重组载体的构建和鉴定第27-30页
        2.7 Fab段噬菌体抗体库的建立和鉴定第30-33页
    3 结果与分析第33-38页
        3.1 总RNA的提取第33页
        3.2 PCR扩增抗体基因第33-34页
        3.3 载体和PCR产物的酶切与连接第34-35页
        3.4 轻链插入的鉴定:第35-36页
        3.5 Fab噬菌体抗体库的重组率鉴定第36-38页
        3.6 Fab噬菌体抗体库库容测定第38页
    4 讨论第38-41页
第二章 抗流感病毒抗体的筛选及其特性鉴定第41-62页
    1 材料第41-42页
        1.1 主要仪器和设备第41页
        1.2 主要材料和试剂第41-42页
    2 方法第42-50页
        2.1 Fab噬菌体抗体库的筛选第42-46页
        2.2 阳性克隆Fab段抗体的可溶性表达及其特性检测第46-50页
    3 结果第50-60页
        3.1 抗体库的筛选第50-57页
        3.2 Fab段抗体的特性检测第57-60页
    4 讨论第60-62页
结论第62-63页
参考文献第63-68页
综述:辅助噬菌体在噬菌体展示中的应用及研究进展第68-79页
缩略词表第79-80页
读研期间发表的论文和参与科研课题第80-81页
致谢第81-82页

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