摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
引言 | 第10-21页 |
1 抗体的制备 | 第10-12页 |
1.1 第一代—多克隆抗体 | 第10-11页 |
1.2 第二代—单克隆抗体 | 第11页 |
1.3 第三代抗体—基因工程抗体 | 第11-12页 |
2 噬菌体抗体库技术 | 第12-19页 |
2.1 噬菌体抗体库技术的概述 | 第12-13页 |
2.2 噬菌体抗体的表达载体 | 第13-14页 |
2.3 噬菌体抗体库的构建 | 第14-15页 |
2.4 噬菌体抗体的富集和筛选—"生物淘洗" | 第15-16页 |
2.5 噬菌体抗体分子的亲和力成熟 | 第16页 |
2.6 抗体的表达 | 第16-17页 |
2.7 噬菌体抗体库的应用前景 | 第17-19页 |
3 本研究的技术路线 | 第19-21页 |
第一章 天然人源Fab噬菌体抗体库的构建 | 第21-41页 |
1 材料 | 第21-22页 |
1.1 载体、宿主菌与辅助噬菌体 | 第21页 |
1.2 主要仪器和设备 | 第21页 |
1.3 主要试剂盒和试剂 | 第21-22页 |
2 方法 | 第22-33页 |
2.1 人外周血淋巴细胞的分离 | 第22页 |
2.2 人外周血淋巴细胞总RNA的提取 | 第22-23页 |
2.3 cDNA第一链的合成 | 第23-24页 |
2.4 PCR扩增Fab抗体基因 | 第24-27页 |
2.5 PCR产物胶纯化回收 | 第27页 |
2.6 轻链抗体基因重组载体的构建和鉴定 | 第27-30页 |
2.7 Fab段噬菌体抗体库的建立和鉴定 | 第30-33页 |
3 结果与分析 | 第33-38页 |
3.1 总RNA的提取 | 第33页 |
3.2 PCR扩增抗体基因 | 第33-34页 |
3.3 载体和PCR产物的酶切与连接 | 第34-35页 |
3.4 轻链插入的鉴定: | 第35-36页 |
3.5 Fab噬菌体抗体库的重组率鉴定 | 第36-38页 |
3.6 Fab噬菌体抗体库库容测定 | 第38页 |
4 讨论 | 第38-41页 |
第二章 抗流感病毒抗体的筛选及其特性鉴定 | 第41-62页 |
1 材料 | 第41-42页 |
1.1 主要仪器和设备 | 第41页 |
1.2 主要材料和试剂 | 第41-42页 |
2 方法 | 第42-50页 |
2.1 Fab噬菌体抗体库的筛选 | 第42-46页 |
2.2 阳性克隆Fab段抗体的可溶性表达及其特性检测 | 第46-50页 |
3 结果 | 第50-60页 |
3.1 抗体库的筛选 | 第50-57页 |
3.2 Fab段抗体的特性检测 | 第57-60页 |
4 讨论 | 第60-62页 |
结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-68页 |
综述:辅助噬菌体在噬菌体展示中的应用及研究进展 | 第68-79页 |
缩略词表 | 第79-80页 |
读研期间发表的论文和参与科研课题 | 第80-81页 |
致谢 | 第81-82页 |