| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 1 绪论 | 第10-20页 |
| 1.1 引言 | 第10页 |
| 1.2 国内外研究现状 | 第10-17页 |
| 1.2.1 斑蝥素的应用 | 第10-11页 |
| 1.2.2 斑蝥素的性质及在斑蝥体内的分布 | 第11-12页 |
| 1.2.3 斑蝥素的储存部位及生物合成研究进展 | 第12-14页 |
| 1.2.4 斑蝥素的提取及测定 | 第14-15页 |
| 1.2.5 二羟基萘甲酸聚异戊烯基转移酶及 MenA 基因 | 第15-16页 |
| 1.2.6 昆虫 RNA 干扰技术 | 第16-17页 |
| 1.3 研究目的、内容及技术路线 | 第17-20页 |
| 1.3.1 研究目的 | 第17页 |
| 1.3.2 研究内容 | 第17-18页 |
| 1.3.3 技术路线 | 第18-19页 |
| 1.3.4 创新性分析 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 实验供虫 | 第20页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第20页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.4 主要溶液配制 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-34页 |
| 2.2.1 眼斑芫菁总 RNA 提取 | 第21-22页 |
| 2.2.2 McMenA 全长引物设计 | 第22-23页 |
| 2.2.3 McMenA 全长的获得及基因组克隆 | 第23-27页 |
| 2.2.4 眼斑芫菁 MenA 基因生物信息学分析 | 第27页 |
| 2.2.5 眼斑芫菁 MenA 基因系统进化树构建 | 第27页 |
| 2.2.6 McMenA 表达的定量检测 | 第27-30页 |
| 2.2.7 RNA 干扰 McMenA | 第30-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-48页 |
| 3.1 McMenA 基因的全长克隆及序列分析 | 第34-40页 |
| 3.1.1 5’RACE／3’RACE 扩增 McMenA 基因 | 第34页 |
| 3.1.2 McMenA 基因的 cDNA 的克隆及基因组克隆序列分析 | 第34-35页 |
| 3.1.3 McMenA 蛋白氨基酸序列分析 | 第35-39页 |
| 3.1.4 McMenA 蛋白同源性分析 | 第39-40页 |
| 3.2 眼斑芫菁 MenA 基因的表达量分析 | 第40-43页 |
| 3.2.1 McMenA 及内参基因 RPL22e 和 RPL13a 的标准曲线 | 第40-41页 |
| 3.2.2 眼斑芫菁雌、雄成虫分开饲养的 MenA 时期表达分析 | 第41-42页 |
| 3.2.3 雄虫 McMenA 不同组织中表达分析 | 第42-43页 |
| 3.3 McMenA 基因的 RNA 干扰 | 第43-48页 |
| 3.3.1 McMenA 基因干扰效率 | 第43-44页 |
| 3.3.2 McMenA 基因干扰对斑蝥素合成的影响 | 第44-47页 |
| 3.3.3 McMenA 基因干扰对斑蝥素 ATP 合成的影响 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 5 主要结论和后续工作 | 第50-51页 |
| 5.1 主要研究结论 | 第50页 |
| 5.2 后续工作建议 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 附录 | 第58页 |
| A. 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第58页 |
