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摇蚊GSTs特性分析及雷公藤杀虫活性应用研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-15页
第一章 文献综述第15-45页
   ·农业面源水环境污染及其危害第15-20页
     ·水污染、农业面源污染及水体富营养化定义第15-16页
     ·农业面源水环境污染的现状第16-19页
     ·农业面源水环境污染的危害第19-20页
   ·生物监测及生物标志物在农药残留污染监测中的应用第20-28页
     ·生物监测及生物标志物的概况第21-23页
     ·环境污染监测的主要生物标志物第23-26页
     ·生物监测及生物标志物在农药残留污染监测中的应用第26-27页
     ·EST 技术及其在环境污染研究的应用第27-28页
   ·摇蚊幼虫在水污染物监测中的应用第28-37页
     ·摇蚊的生活史及生物学习性第29-30页
     ·摇蚊生态毒理学概况第30-34页
     ·摇蚊危害及防治第34-37页
   ·雷公藤生物碱杀虫活性研究概况第37-43页
     ·雷公藤生物碱的主要化学成分第37-41页
     ·雷公藤生物碱的杀虫作用第41-42页
     ·雷公藤总生物碱的提取制备及检测方法第42-43页
   ·问题的提出及设计思路第43-45页
第二章 摇蚊表达序列标签(EST)生物信息学分析第45-55页
   ·材料与方法第45-46页
     ·重要毒理和生理相关基因的分析第45-46页
   ·结果与分析第46-51页
     ·重要毒理相关基因的序列比对分析第46-49页
     ·重要生理相关基因的序列比对分析第49-51页
   ·小结与讨论第51-55页
     ·EST 分析为摇蚊功能基因的筛选和鉴定提供有效信息第51-52页
     ·摇蚊不同的毒理和生理相关基因的序列比对分析结果可揭示其耐污染的生化机制第52-55页
第三章 摇蚊GSTs 系统发育分析及分子特性研究第55-64页
   ·材料与方法第55-56页
     ·GSTs 克隆的测序第55-56页
     ·序列及系统发育分析第56页
   ·结果与分析第56-62页
     ·GSTs 全长核苷酸及氨基酸序列的获得及系统命名第56-59页
     ·GSTs 保守序列及系统发育分析第59-60页
     ·同家族GSTs 氨基酸序列比对分析第60-62页
   ·小结与讨论第62-64页
     ·昆虫GSTs 分类命名体系有待进一步完善第62页
     ·GSTs 保守序列及系统发育分析印证了当前系统命名的准确性第62-63页
     ·摇蚊delta 家族GSTs 和sigma 家族GSTs 行使着不同的功能第63-64页
第四章 摇蚊GSTs 组织与发育期表达研究第64-72页
   ·材料与方法第64-67页
     ·供试昆虫第64页
     ·仪器和试剂第64-65页
     ·基因表达的半定量RT-PCR 测定第65-67页
   ·结果与分析第67-69页
     ·GSTs 引物设计及PCR 条件优化第67-68页
     ·摇蚊各组织GSTs 基因特异性表达模式测定第68页
     ·摇蚊不同发育期GSTs 基因特异性表达模式测定第68-69页
   ·小结与讨论第69-72页
     ·RT-PCR 方法检测摇蚊GSTs 基因表达水平方便经济有效第70页
     ·摇蚊各组织中GSTs 基因表达模式存在差异第70-71页
     ·摇蚊不同发育期阶段GSTs 基因表达模式存在差异第71-72页
第五章 甲草胺对摇蚊GSTs 活性及相关基因表达的影响第72-84页
   ·材料与方法第72-76页
     ·供试昆虫第72-73页
     ·仪器和试剂第73页
     ·试虫处理方法及GSTs 活性测定第73页
     ·基因表达的半定量RT-PCR 测定第73-74页
     ·GSTs 基因表达的实时定量PCR 测定第74-76页
   ·结果与分析第76-81页
     ·GSTs 活性测定结果第76-77页
     ·摇蚊GSTs 基因表达半定量RT-PCR 测定结果第77-78页
     ·GSTs 基因表达的实时荧光定量PCR 测定第78-81页
   ·小结与讨论第81-84页
     ·甲草胺会给非靶标生物带来潜在不利影响第81-82页
     ·Sigma 家族GSTs 在甲草胺代谢中可能起着主要的作用第82-83页
     ·荧光实时定量PCR 测定摇蚊GSTs 基因相对表达水平效果好第83-84页
第六章 雷公藤总生物碱对摇蚊幼虫的杀灭活性研究第84-92页
   ·材料与方法第85-87页
     ·供试昆虫第85页
     ·仪器和试剂第85-86页
     ·毒杀作用及GSTs 活性测定方法第86页
     ·基因表达的半定量RT-PCR 测定第86-87页
   ·结果与分析第87-89页
     ·雷公藤总生物碱对摇蚊的毒杀作用测定结果第87-88页
     ·雷公藤总生物碱对摇蚊4 龄幼虫GSTs 活性的影响第88页
     ·雷公藤总生物碱对摇蚊4 龄幼虫GSTs 基因表达的半定量RT-PCR 测定结果第88-89页
   ·小结与讨论第89-92页
     ·雷公藤总生物碱具有开发为摇蚊控制剂可能第89-91页
     ·雷公藤总生物碱对摇蚊4 龄幼虫GSTs 活性的抑制和相关基因上调表达存在某种反馈机制第91页
     ·CtGSTu3 和 CtGSTu4 在雷公藤总生物碱降解代谢中可能起着重要的作用第91-92页
第七章 雷公藤总生物碱杀虫活性成分中试提取工艺研究第92-100页
   ·材料与方法第92-97页
     ·材料与试剂第92页
     ·主要仪器设备第92页
     ·雷公藤总生物碱含量测定方法第92-94页
     ·中试提取工艺设计第94-97页
     ·中试提取工艺第97页
   ·结果与分析第97-99页
     ·不同提取次数总生物碱的提取率第97-98页
     ·不同批次获得的提取液质量及其总生物碱含量第98-99页
     ·提取液的浓缩及残渣中乙酸乙酯的回收率第99页
   ·小结与讨论第99-100页
     ·罐组式逆流提取方法适合于雷公藤中杀虫活性成分物质的提取第99页
     ·雷公藤根皮粉残渣中残留的提取溶剂回收工艺需要进一步研究第99-100页
第八章 1.0%雷公藤总生物碱微乳剂的研制第100-109页
   ·材料与方法第100-103页
     ·试材与助剂第100页
     ·供试昆虫第100页
     ·主要仪器设备第100页
     ·试验方法第100-101页
     ·雷公藤总生物碱微乳剂质量检测方法第101-102页
     ·微乳剂配制方法及生产工艺第102-103页
   ·结果与分析第103-107页
     ·雷公藤总生物碱微乳剂的研制第103-105页
     ·1%雷公藤总生物碱微乳剂配方的确定第105页
     ·雷公藤总生物碱微乳剂质量检测结果第105页
     ·雷公藤总生物碱微乳剂质量标准第105-106页
     ·1.0%雷公藤总生物碱微乳剂室内毒力测定结果第106页
     ·1.0%雷公藤总生物碱微乳剂对菜青虫的田间防治效果第106-107页
     ·1.0%雷公藤总生物碱微乳剂配制方法及生产工艺第107页
   ·小结与讨论第107-109页
     ·1.0%雷公藤总生物碱微乳剂制剂值得在农业生产中实验示范第107-108页
     ·实际应用中可将1.0%雷公藤总生物碱微乳剂与化学农药混配使用第108页
     ·采用合适的田间统计方法来评价雷公藤制剂田间防治效果较为合适第108-109页
第九章 总结第109-113页
   ·主要结论第109-110页
   ·本论文的创新点第110页
   ·有待进一步研究的问题第110-111页
   ·前景展望第111-113页
参考文献第113-127页
附录:摇蚊GSTs 基因的全长cDNA 序列及推导的氨基酸序列第127-135页
致谢第135-136页
作者简介第136-137页

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