| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 符号说明及缩略词 | 第10-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-22页 |
| 1.1 丝状真菌里氏木霉概述 | 第12-13页 |
| 1.2 里氏木霉纤维素酶的组分 | 第13页 |
| 1.3 里氏木霉纤维素酶的作用机制 | 第13-14页 |
| 1.4 里氏木霉纤维素酶基因的转录调控因子 | 第14-16页 |
| 1.5 碳代谢阻遏 | 第16-18页 |
| 1.6 酪蛋白激酶Ⅱ | 第18-19页 |
| 1.7 立题依据和研究内容 | 第19-22页 |
| 第二章 里氏木霉酪蛋白激酶Ⅱ催化亚基基因和cre1的敲除 | 第22-44页 |
| 2.1 材料与方法 | 第22-33页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第22页 |
| 2.1.2 主要试剂和试剂盒 | 第22-24页 |
| 2.1.3 菌种培养和保藏 | 第24页 |
| 2.1.4 实验方法 | 第24-29页 |
| 2.1.5 基因敲除盒的构建 | 第29-31页 |
| 2.1.6 转化子的筛选与分子鉴定 | 第31-33页 |
| 2.2 结果与讨论 | 第33-42页 |
| 2.2.1 原生质体的制备与分析 | 第33-34页 |
| 2.2.2 Δcre1::ptrA敲除株的构建及验证 | 第34-36页 |
| 2.2.3 Δα2::pyr4敲除株的构建及验证 | 第36-39页 |
| 2.2.4 Δα1::pyr4敲除株的构建及验证 | 第39-42页 |
| 2.3 本章小结 | 第42-44页 |
| 第三章 里氏木霉CKⅡ的功能分析及在纤维素酶调控中的作用研究 | 第44-70页 |
| 3.1 材料与方法 | 第44-54页 |
| 3.1.1 菌株 | 第44页 |
| 3.1.2 主要试剂、试剂盒和培养基配方 | 第44-46页 |
| 3.1.3 不同碳源平板表型分析 | 第46页 |
| 3.1.4 生孢量的测定和菌丝形态观察 | 第46页 |
| 3.1.5 生物量的测定 | 第46页 |
| 3.1.6 纤维素酶活力的测定 | 第46-48页 |
| 3.1.7 Lowry法测定胞外总蛋白的含量 | 第48-49页 |
| 3.1.8 高效液相色谱法 | 第49页 |
| 3.1.9 里氏木霉真菌RNA的提取 | 第49-51页 |
| 3.1.10 里氏木霉真菌RNA的提取 | 第51-52页 |
| 3.1.11 荧光定量PCR (qPCR) | 第52-54页 |
| 3.2 结果与讨论 | 第54-67页 |
| 3.2.1 出发株和转化子不同碳源的利用分析 | 第54-55页 |
| 3.2.2 平板菌落面积的测定 | 第55-56页 |
| 3.2.3 出发株和转化子生孢量的测定 | 第56页 |
| 3.2.4 出发株和转化子菌丝结球情况 | 第56-57页 |
| 3.2.5 出发株和转化子菌丝形态分析 | 第57-58页 |
| 3.2.6 出发株和转化子菌丝平均分叉距离和菌丝长度分析 | 第58-60页 |
| 3.2.7 葡萄糖为碳源的深层液体发酵生物量的测定 | 第60-61页 |
| 3.2.8 出发株和转化子葡萄糖消耗的测定 | 第61-64页 |
| 3.2.9 出发株和转化子纤维素酶酶活测定 | 第64页 |
| 3.2.10 出发株和转化子胞外蛋白含量的测定 | 第64-65页 |
| 3.2.11 出发株和转化子转录水平的分析 | 第65-67页 |
| 3.3 本章小结 | 第67-70页 |
| 全文总结 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第77页 |
