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水稻籽粒中调控淀粉合成的关键基因FLO6的图位克隆和功能分析

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
缩略语第11-13页
第一章 文献综述第13-39页
    1 水稻胚乳的生长发育第13-14页
    2 淀粉的生物合成第14-24页
        2.1 淀粉的结构第14-17页
        2.2 淀粉合成的分子机制第17-21页
        2.3 淀粉颗粒的起始第21-22页
        2.4 不同组织中淀粉合成的差异第22-23页
        2.5 水稻胚乳中复合淀粉颗粒的形成第23-24页
    3 淀粉合成的相关调控第24-26页
        3.1 淀粉合成基因的表达调控第24-25页
        3.2 淀粉合成相关酶的蛋白互作第25-26页
        3.3 新基因的参与第26页
    4 淀粉生物合成与稻米的品质性状的相关性第26-28页
        4.1 淀粉生物合成与稻米的外观品质第27页
        4.2 淀粉生物合成与稻米的食味品质第27-28页
    5 CBMs相关蛋白研究进展第28-38页
        5.1 CBMs的结构和功能第28-30页
        5.2 CBMs分类和绑定特性第30-31页
        5.3 活性酶中的CBMs第31-32页
        5.4 CBMs可以改变底物的结构第32-34页
        5.5 CBM48研究进展第34-38页
    6 本研究的目的与意义第38-39页
第二章 水稻粉质突变体flo6的表型鉴定、基因的精细定位和功能互补第39-57页
    摘要第39页
    1 材料与方法第39-47页
        1.1 材料种植第39-40页
        1.2 生理生化指标的测定第40页
        1.3 米粉支链淀粉链长分布检测第40-41页
        1.4 灌浆过程干物质积累测定第41页
        1.5 成熟种子断面的扫描电镜观察第41页
        1.6 叶片中淀粉颗粒的透射电镜观察第41页
        1.7 胚乳样品的透射电镜观察第41-42页
        1.8 米粉的尿素膨胀第42页
        1.9 RVA谱分析第42页
        1.10 胚乳半薄切片制备及淀粉颗粒着色第42-43页
        1.11 胚乳淀粉颗粒的提取第43页
        1.12 突变基因的定位第43-45页
        1.13 候选基因预测和测序第45-46页
        1.14 转基因互补载体的构建及农杆菌转化第46页
        1.15 转基因阳性植株的鉴定第46-47页
    2 结果与分析第47-55页
        2.1 水稻flo6突变体的胚乳具有明显的淀粉合成缺陷第47-49页
        2.2 在flo6突变体的胚乳细胞中存在异常的复合淀粉颗粒结构第49-50页
        2.3 flo6突变体胚乳中淀粉的物理化学性质发生改变第50-53页
        2.4 FL06的图位克隆和功能互补验证第53-55页
    3 讨论第55-57页
        3.1 FLO6编码一个新的参与淀粉合成的关键基因第55-56页
        3.2 FLO6参与水稻胚乳中复合淀粉颗粒的形成第56-57页
第三章 FLO6的功能研究第57-79页
    摘要第57页
    1 材料与方法第57-65页
        1.1 RNA提取、RT-PCR Real-time PCR第57-59页
        1.2 氨基酸序列比对以及同源分析第59页
        1.3 水稻原生质体分离及亚细胞定位第59-60页
        1.4 淀粉体外结合第60-61页
        1.5 淀粉活性染色及酶谱分析第61-63页
        1.6 酵母双杂交第63页
        1.7 体外GST pull-down分析第63-64页
        1.8 烟草表皮细胞BiFC分析第64-65页
    2 结果与分析第65-75页
        2.1 FLO6编码了一个在水稻中广泛表达包含CBM48结构域的蛋白第65-66页
        2.2 FLO6蛋白的质体定位对于其功能是必须的第66-69页
        2.3 FLO6蛋白通过其C端的CBM48结构域结合淀粉第69-71页
        2.4 FLO6蛋白通过其N端的结构域与ISA1互作,但是并不影响ISA的活性第71-75页
    3 讨论第75-79页
        3.1 FLO6具有淀粉结合能力第75页
        3.2 FLO6是一个质体定位蛋白第75-76页
        3.3 FLO6和其同源基因是植物界内所特有的一类基因家族第76页
        3.4 FLO6与ISA1互作第76-79页
第四章 全文总结第79-83页
    1 FLO6是一个新的调控淀粉合成的关键基因第79页
    2 FLO6参与水稻胚乳中复合淀粉颗粒的形成第79-80页
    3 FLO6编码一个植物特异的CBM48蛋白第80页
    4 FLO6具有淀粉结合能力第80页
    5 FLO6定位在质体中第80-81页
    6 FLO6与ISA1互作第81页
    7 本研究的创新之处第81-83页
参考文献第83-95页
附录第95-103页
    附录1 水稻原生质体分离转化相关试剂第95-96页
    附录2 蛋白的SDS-PAGE凝胶电泳第96-98页
    附录3第98-99页
    附录4第99-101页
    附录5第101-103页
在读期间发表论文第103-105页
致谢第105页

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