| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略词表 | 第9-13页 |
| 第1章 前言 | 第13-31页 |
| 1.1 研究目的及意义 | 第13页 |
| 1.2 植物先天免疫系统研究进展 | 第13-21页 |
| 1.2.1 模式识别受体介导的防御反应 | 第15-16页 |
| 1.2.2 植物模式识别受体 | 第16-17页 |
| 1.2.3 PTI信号传导途径 | 第17-18页 |
| 1.2.4 效应子启动的免疫反应 | 第18-21页 |
| 1.3 植物抗病基因研究进展 | 第21-27页 |
| 1.3.1 已经克隆的主要植物抗病基因 | 第21-24页 |
| 1.3.2 植物抗病基因的分类 | 第24-25页 |
| 1.3.3 植物抗性基因的克隆方法 | 第25-27页 |
| 1.4 植物与黄单胞杆菌互作分子机理研究进展 | 第27-31页 |
| 第2章 柑橘抗溃疡病防御相关基因鉴定与表达分析 | 第31-44页 |
| 2.1 材料与方法 | 第31-32页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第31-32页 |
| 2.2 试验方法 | 第32-35页 |
| 2.2.1 活体接种及样本采集 | 第32页 |
| 2.2.2 防御候选基因序列检索及引物合成 | 第32页 |
| 2.2.3 候选基因的生物信息学分析 | 第32-33页 |
| 2.2.4 柑橘总RNA提取 | 第33页 |
| 2.2.5 cDNA合成 | 第33-34页 |
| 2.2.6 引物特异性及扩增效率分析 | 第34页 |
| 2.2.7 基因表达分析 | 第34-35页 |
| 2.3 结果与分析 | 第35-40页 |
| 2.3.1 活体接种叶片的病症发展 | 第35页 |
| 2.3.2 防御相关候选基因引物特异性验证 | 第35-37页 |
| 2.3.3 候选基因引物扩增效率分析 | 第37页 |
| 2.3.4 候选基因蛋白结构分析及功能预测 | 第37-39页 |
| 2.3.5 候选基因及防御标记基因对溃疡病菌侵染的响应 | 第39-40页 |
| 2.4 讨论 | 第40-43页 |
| 2.5 小结 | 第43-44页 |
| 第3章 LYP2和CERK1的克隆与转录本分析 | 第44-63页 |
| 3.1 材料与方法 | 第44-47页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第44页 |
| 3.1.2 核酸提取及cDNA合成 | 第44页 |
| 3.1.3 LYP2,CERK1基因克隆测序 | 第44-46页 |
| 3.1.4 基因序列拼接及生物信息学分析 | 第46页 |
| 3.1.5 转录本的HRM分析 | 第46-47页 |
| 3.2 结果与分析 | 第47-60页 |
| 3.2.1 基因克隆测序 | 第47-48页 |
| 3.2.2 基因DNA及cDNA序列分析 | 第48-49页 |
| 3.2.3 基因SNP位点分析 | 第49-51页 |
| 3.2.4 转录本HRM分析 | 第51-52页 |
| 3.2.5 蛋白结构域预测及分析 | 第52-55页 |
| 3.2.6 蛋白二级和三级结构预测及分析 | 第55-58页 |
| 3.2.7 蛋白家族的系统发育进化树构建 | 第58-60页 |
| 3.3 讨论 | 第60-62页 |
| 3.4 小结 | 第62-63页 |
| 第4章 柑橘LYP2基因启动子的克隆与功能分析 | 第63-80页 |
| 4.1 材料与方法 | 第63-67页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第63页 |
| 4.1.2 载体及菌株 | 第63-64页 |
| 4.1.3 LYP2启动子序列克隆 | 第64页 |
| 4.1.4 LYP2启动子顺式作用元件预测 | 第64-65页 |
| 4.1.5 LYP2基因启动子与报告基因的融合表达载体构建 | 第65-66页 |
| 4.1.6 LYP2基因启动子瞬时表达分析 | 第66-67页 |
| 4.2 结果与分析 | 第67-74页 |
| 4.2.1 LYP2启动子克隆测序 | 第67-69页 |
| 4.2.2 LYP2基因启动子顺式作用元件预测 | 第69-72页 |
| 4.2.3 LYP2基因启动子融合表达载体构建 | 第72-74页 |
| 4.3 LYP2基因启动子的功能验证 | 第74-77页 |
| 4.4 讨论 | 第77-79页 |
| 4.5 小结 | 第79-80页 |
| 第5章 CERK1,LYP2蛋白互作研究 | 第80-89页 |
| 5.1 材料与方法 | 第80-82页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第80页 |
| 5.1.2 载体及菌株 | 第80页 |
| 5.1.3 BiFC载体构建 | 第80-81页 |
| 5.1.4 BiFC技术验证LYP2,CERK1蛋白互作 | 第81-82页 |
| 5.2 结果与分析 | 第82-87页 |
| 5.2.1 BiFC载体构建 | 第82-85页 |
| 5.2.2 LYP2,CERK1蛋白互作分析 | 第85-87页 |
| 5.3 讨论 | 第87-88页 |
| 5.4 小结 | 第88-89页 |
| 第6章 LYP2,CERK1基因的功能验证 | 第89-99页 |
| 6.1 材料与方法 | 第89-90页 |
| 6.1.1 植物材料 | 第89页 |
| 6.1.2 载体及菌株 | 第89页 |
| 6.1.3 植物表达载体构建 | 第89-90页 |
| 6.1.4 LYP2,CERK1表达产物对溃疡病菌生长影响的观测 | 第90页 |
| 6.2 结果与分析 | 第90-97页 |
| 6.2.1 表达载体构建 | 第90-93页 |
| 6.2.2 LYP2,CERK1基因功能验证 | 第93-97页 |
| 6.3 讨论 | 第97-98页 |
| 6.4 小结 | 第98-99页 |
| 主要结论与创新点 | 第99-100页 |
| 1 主要结论 | 第99页 |
| 2 创新点 | 第99页 |
| 3 下一步工作设想 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-120页 |
| 附录 | 第120-128页 |
| 致谢 | 第128-129页 |
| 个人简历 | 第129页 |
