| 摘要 | 第3-9页 |
| ABSTRACT | 第9-14页 |
| 前言 | 第17-27页 |
| 1. Hsp90 | 第17-19页 |
| 2. 氧化还原状态 | 第19-21页 |
| 3. 泛素-蛋白酶体系统 | 第21-24页 |
| 4. G2/M期阻滞及相关蛋白Cyclin B1 | 第24-25页 |
| 5. Hsp90与氧化还原状态、泛素-蛋白酶体系统的关系 | 第25-26页 |
| 6. 本研究的目的和意义 | 第26-27页 |
| 材料与方法 | 第27-42页 |
| 1. 实验材料 | 第27-31页 |
| 1.1 主要仪器设备 | 第27页 |
| 1.2 主要试剂及配制 | 第27-31页 |
| 2 实验方法 | 第31-41页 |
| 2.1 细胞培养 | 第31页 |
| 2.2 药物处理 | 第31-32页 |
| 2.3 CCK-8法检测细胞活力 | 第32页 |
| 2.4 流式细胞术 | 第32页 |
| 2.5 Western blotting检测细胞内蛋白表达 | 第32-36页 |
| 2.6 荧光定量PCR检测Cyclin B1 mRNA水平 | 第36-37页 |
| 2.7 ROS探针法检测细胞内ROS含量 | 第37-38页 |
| 2.8 细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)测定 | 第38页 |
| 2.9 蛋白酶体活性的测定 | 第38-39页 |
| 2.10 羰基化蛋白检测 | 第39页 |
| 2.11 免疫共沉淀分别检测泛素化蛋白(ubiquitinlate proteins)和Cyclin B1细胞内相互结合情况 | 第39-40页 |
| 2.12 免疫荧光检测ubiquitinlate proteins和cyclinB1细胞共定位 | 第40-41页 |
| 3. 统计学处理 | 第41-42页 |
| 结果 | 第42-56页 |
| 1. 17-DMAG抑制HepG2细胞生长 | 第42页 |
| 2. 抑制Hsp90α对胞内可溶性Hsp90α及HepG2细胞周期的影响 | 第42-44页 |
| 3. 抑制Hsp90α导致HepG2细胞内氧化还原状态改变 | 第44-45页 |
| 4. 抑制Hsp90α导致细胞内蛋白酶体活性下降 | 第45页 |
| 5. 17-DMAG导致细胞内羰基化蛋白增加 | 第45-46页 |
| 6. 17-DMAG导致细胞内cyclinB1表达量增加 | 第46-48页 |
| 7. 17-DMAG导致cyclinB1泛素化水平下降 | 第48-49页 |
| 8. NAC对细胞内蛋白酶体和细胞周期的影响 | 第49-51页 |
| 9. 附表 | 第51-56页 |
| 讨论 | 第56-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 全文总结 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 成果 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
