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Hsp90α抑制与HepG2细胞氧化还原状态变化及cyclinB1蓄积相关的G2/M期阻滞关系探讨

摘要第3-9页
ABSTRACT第9-14页
前言第17-27页
    1. Hsp90第17-19页
    2. 氧化还原状态第19-21页
    3. 泛素-蛋白酶体系统第21-24页
    4. G2/M期阻滞及相关蛋白Cyclin B1第24-25页
    5. Hsp90与氧化还原状态、泛素-蛋白酶体系统的关系第25-26页
    6. 本研究的目的和意义第26-27页
材料与方法第27-42页
    1. 实验材料第27-31页
        1.1 主要仪器设备第27页
        1.2 主要试剂及配制第27-31页
    2 实验方法第31-41页
        2.1 细胞培养第31页
        2.2 药物处理第31-32页
        2.3 CCK-8法检测细胞活力第32页
        2.4 流式细胞术第32页
        2.5 Western blotting检测细胞内蛋白表达第32-36页
        2.6 荧光定量PCR检测Cyclin B1 mRNA水平第36-37页
        2.7 ROS探针法检测细胞内ROS含量第37-38页
        2.8 细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)测定第38页
        2.9 蛋白酶体活性的测定第38-39页
        2.10 羰基化蛋白检测第39页
        2.11 免疫共沉淀分别检测泛素化蛋白(ubiquitinlate proteins)和Cyclin B1细胞内相互结合情况第39-40页
        2.12 免疫荧光检测ubiquitinlate proteins和cyclinB1细胞共定位第40-41页
    3. 统计学处理第41-42页
结果第42-56页
    1. 17-DMAG抑制HepG2细胞生长第42页
    2. 抑制Hsp90α对胞内可溶性Hsp90α及HepG2细胞周期的影响第42-44页
    3. 抑制Hsp90α导致HepG2细胞内氧化还原状态改变第44-45页
    4. 抑制Hsp90α导致细胞内蛋白酶体活性下降第45页
    5. 17-DMAG导致细胞内羰基化蛋白增加第45-46页
    6. 17-DMAG导致细胞内cyclinB1表达量增加第46-48页
    7. 17-DMAG导致cyclinB1泛素化水平下降第48-49页
    8. NAC对细胞内蛋白酶体和细胞周期的影响第49-51页
    9. 附表第51-56页
讨论第56-60页
结论第60-61页
全文总结第61-62页
参考文献第62-69页
成果第69-70页
致谢第70-71页

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