| 第一章 高糖环境下骨形态发生蛋白7对成骨细胞分化的影响 | 第6-32页 |
| 中文摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略语表 | 第8-9页 |
| 前言 | 第9-11页 |
| 材料与方法 | 第11-20页 |
| 1. 材料与仪器 | 第11-12页 |
| 1.1 主要材料 | 第11-12页 |
| 1.2 主要仪器 | 第12页 |
| 2. 主要试剂配制 | 第12-14页 |
| 2.1 MC3T3-E1 Subclone14成骨细胞培养液 | 第12页 |
| 2.2 0.2 mol/L的PB溶液 | 第12-13页 |
| 2.3 0.01 mol/L的PBS缓冲液 | 第13页 |
| 2.4 4%多聚甲醛溶液 | 第13页 |
| 2.5 5 mg/ml的MTT溶液 | 第13页 |
| 2.6 100 nmol/L的罗丹明-鬼笔环肽溶液 | 第13页 |
| 2.7 0.1%的DEPC水 | 第13页 |
| 2.8 0.5%的Triron X-100溶液 | 第13页 |
| 2.9 成骨诱导液 | 第13-14页 |
| 2.10 BMP-7溶液 | 第14页 |
| 3. 实验方法 | 第14-20页 |
| 3.1 | 第14页 |
| 3.1.1 MC3T3细胞培养 | 第14页 |
| 3.1.2 MC3T3细胞冻存 | 第14页 |
| 3.2 MTT法检测细胞增殖 | 第14-15页 |
| 3.3 碱性磷酸酶(ALP)活性测定 | 第15页 |
| 3.4 茜素红染色 | 第15页 |
| 3.5 RT-qPCR检测Runx2、ALP、OCN mRNA的表达情况 | 第15-18页 |
| 3.5.1 细胞裂解和收集 | 第15-16页 |
| 3.5.2 提取细胞总RNA | 第16页 |
| 3.5.3 提取RNA的纯度检测 | 第16页 |
| 3.5.4 反转录 | 第16-17页 |
| 3.5.5 RT-qPCR | 第17-18页 |
| 3.6 罗丹明-鬼笔环肽染色 | 第18-19页 |
| 3.7 统计学方法 | 第19-20页 |
| 结果 | 第20-26页 |
| 4.1 MTT法检测细胞增殖 | 第20-21页 |
| 4.2 碱性磷酸酶ALP活性测定 | 第21-22页 |
| 4.3 RT-qPCR检测Runx2、ALP、OCN mRNA的表达情况 | 第22-23页 |
| 4.4 罗丹明-鬼笔环肽染色 | 第23-25页 |
| 4.5 茜素红染色 | 第25-26页 |
| 讨论 | 第26-29页 |
| 结论 | 第29-30页 |
| 参考文献 | 第30-32页 |
| 第二部分 高糖环境下不同浓度骨形成蛋白7对成骨细胞分化的影响 | 第32-51页 |
| 中文摘要 | 第32-33页 |
| Abstract | 第33-34页 |
| 缩略语表 | 第34-35页 |
| 前言 | 第35-36页 |
| 材料与方法 | 第36-41页 |
| 1. 材料与仪器 | 第36-37页 |
| 1.1 主要材料 | 第36-37页 |
| 1.2 主要仪器 | 第37页 |
| 2. 主要试剂的配制 | 第37-38页 |
| 2.1 含不同浓度BMP-7培养液的配制 | 第37-38页 |
| 3. 实验方法 | 第38-41页 |
| 3.1 MC3T3细胞的常规培养 | 第38页 |
| 3.2 MTT法检测细胞增殖 | 第38页 |
| 3.3 碱性磷酸酶(ALP)活性测定 | 第38页 |
| 3.4 茜素红染色 | 第38-39页 |
| 3.5 T-qPCR检测Runx2、OCN mRNA的表达 | 第39页 |
| 3.6 罗丹明-鬼笔环肽染色 | 第39-40页 |
| 3.7 统计学方法 | 第40-41页 |
| 结果 | 第41-47页 |
| 4.1 MTT法检测细胞增殖 | 第41-42页 |
| 4.2 碱性磷酸酶(ALP)活性测定 | 第42-43页 |
| 4.3 罗丹明-鬼笔环肽染色 | 第43-45页 |
| 4.4 茜素红染色 | 第45-46页 |
| 4.5 R T-qPCR检测Runx2、OCN mRNA的表达 | 第46-47页 |
| 讨论 | 第47-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-51页 |
| 硕士研究生就读期间发表的文章 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52页 |
