中文摘要 | 第6-8页 |
英文摘要 | 第8-9页 |
前言 | 第10-18页 |
参考文献 | 第14-18页 |
第一部分 不同抗原表位抗体质粒的克隆及慢病毒包装 | 第18-21页 |
1. 材料和方法 | 第18-20页 |
1.1 材料与试剂 | 第18页 |
1.2 主要仪器设备 | 第18页 |
1.3 含目的基因慢病毒质粒的克隆、提取及保存 | 第18-19页 |
1.4 293T细胞的培养方法 | 第19页 |
1.5 Lipo3000基因转染法 | 第19页 |
1.6 CD30-CAR慢病毒载体的包装及保存 | 第19页 |
1.7 倒置荧光显微镜下观察CARs的表达 | 第19-20页 |
2. 结果 | 第20-21页 |
第二部分 两组靶向CD30-CART细胞的制备和流式检测 | 第21-26页 |
1. 材料和方法 | 第21-23页 |
1.1 材料与试剂 | 第21页 |
1.2 主要仪器设备 | 第21页 |
1.3 Anti-CD30-CART细胞的制备和培养 | 第21-23页 |
1.4 人原代T细胞免疫表型测定 | 第23页 |
1.5 流式细胞术测定anti-CD30-CAR的表达 | 第23页 |
2. 结果及统计学分析 | 第23-26页 |
2.1 人原代T细胞免疫表型流式细胞计数检测结果 | 第23-24页 |
2.2 流式细胞术检测pWPT-GFP CART细胞阳性表达率 | 第24页 |
2.3 统计学分析各平行试验组感染效率情况 | 第24-26页 |
第三部分 靶向CD30-CART细胞表达优化对cHL细胞系的杀伤影响 | 第26-32页 |
1. 材料和方法 | 第26-28页 |
1.1 材料与试剂 | 第26页 |
1.2 主要仪器设备 | 第26页 |
1.3 细胞系的选择及L428细胞的培养方法 | 第26页 |
1.4 两种CD30-CART细胞对L428细杀伤活性检测 | 第26-28页 |
2. 结果及统计学分析 | 第28-32页 |
2.1 流式细胞术检测不同效靶比效应细胞杀伤效率 | 第28-29页 |
2.2 统计学分析各平行试验组感染效率情况 | 第29-32页 |
第四部分 CD30-CARs对L428细胞NF-κB影响 | 第32-36页 |
1. 材料和方法 | 第32-35页 |
1.1 材料与试剂 | 第32-33页 |
1.2 主要仪器设备 | 第33页 |
1.3 质粒的转染及蛋白的提取 | 第33-34页 |
1.4 Western Blot法测定CARs的表达差异 | 第34-35页 |
2. 结果 | 第35-36页 |
讨论 | 第36-38页 |
参考文献 | 第38-39页 |
结论 | 第39-40页 |
文献综述 | 第40-48页 |
参考文献 | 第44-48页 |
中英文缩略词对照 | 第48-50页 |
攻读硕士学位期间发表文章情况 | 第50-51页 |
致谢 | 第51页 |