| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-19页 |
| 1.1 脊椎动物RNase1基因研究进展 | 第10-11页 |
| 1.2 RNase A结构特征 | 第11-12页 |
| 1.3 RNase1基因功能研究 | 第12-17页 |
| 1.3.1 RNase1基因在哺乳动物中的功能研究 | 第12-14页 |
| 1.3.2 RNase1基因在鱼类中的功能研究 | 第14-15页 |
| 1.3.3 RNase1基因在其他脊椎动物中的研究 | 第15-17页 |
| 1.4 RNase1基因的进化研究 | 第17页 |
| 1.5 RNase1研究趋势 | 第17页 |
| 1.6 本研究的目的意义 | 第17-19页 |
| 第二章 八种鲤科鱼类RNase1基因的克隆与分析 | 第19-35页 |
| 2.1 前言 | 第19页 |
| 2.2 材料与方法 | 第19-23页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.2.2 样品基因组DNA的提取 | 第19-20页 |
| 2.2.3 RNase1基因CDS区的克隆与鉴定 | 第20-22页 |
| 2.2.4 序列拼接及分析 | 第22-23页 |
| 2.2.5 RNase1蛋白质理化性质预测及三维空间模型 | 第23页 |
| 2.2.6 RNase1氨基酸序列比对及进化树的构建 | 第23页 |
| 2.3 结果与分析 | 第23-31页 |
| 2.3.1 八种鲤科鱼类DNA提取结果 | 第23-25页 |
| 2.3.2 3'Genome Walking PCR反应结果 | 第25页 |
| 2.3.3 5'Genome Walking PCR反应结果 | 第25页 |
| 2.3.4 序列拼接分析结果 | 第25-26页 |
| 2.3.5 八种鲤科鱼类氨基酸序列同源性分析 | 第26-27页 |
| 2.3.6 八种鲤科鱼类RNase1蛋白理化性质预测 | 第27-31页 |
| 2.3.7 八种鲤科鱼类RNase1氨基酸序列进化树绘制 | 第31页 |
| 2.4 讨论 | 第31-35页 |
| 第三章 八种鲤科鱼类RNase1基因表达分析 | 第35-45页 |
| 3.1 前言 | 第35页 |
| 3.2 材料与方法 | 第35-38页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第35页 |
| 3.2.2 总RNA的提取 | 第35-37页 |
| 3.2.3 总RNA的反转录 | 第37页 |
| 3.2.4 实时荧光定量PCR | 第37-38页 |
| 3.3 结果与分析 | 第38-43页 |
| 3.3.1 八种鲤科鱼类组织RNA提取结果 | 第38-40页 |
| 3.3.2 八种鲤科鱼类RNase1基因在不同组织中的表达差异 | 第40-43页 |
| 3.4 讨论 | 第43-45页 |
| 第四章 四种鲤科鱼类RNase1蛋白表达分析 | 第45-51页 |
| 4.1 前言 | 第45页 |
| 4.2 材料与方法 | 第45-48页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第45页 |
| 4.2.2 兔抗RNase1多克隆抗体的制备与效价测定 | 第45-46页 |
| 4.2.3 组织总蛋白提取 | 第46-47页 |
| 4.2.4 Western blot实验 | 第47-48页 |
| 4.3 结果与分析 | 第48-50页 |
| 4.3.1 抗体的制备与效价检测 | 第48-49页 |
| 4.3.2 RNase1组织表达 | 第49-50页 |
| 4.4 讨论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-59页 |
| 附录一 主要药品及试剂 | 第59-60页 |
| 附录二 仪器设备 | 第60-61页 |
| 附录三 RNase1基因克隆引物 | 第61-63页 |
| 附录四 荧光定量PCR引物 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
