摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7页 |
第一章 综述 | 第9-16页 |
第一节 MicroRNA的形成及生物学功能 | 第9-11页 |
第二节 MicroRNA与造血 | 第11-13页 |
第三节 造血中的转录因子-microRNA调控网络 | 第13-16页 |
第二章 实验材料和方法 | 第16-30页 |
第一节 实验材料 | 第16-19页 |
1.细胞株 | 第16页 |
2.细胞培养 | 第16-17页 |
3.质粒和引物序列 | 第17-18页 |
4.抗体 | 第18页 |
5.实验试剂 | 第18-19页 |
6.实验仪器 | 第19页 |
第二节 试验方法 | 第19-30页 |
1.细胞株 | 第19页 |
2.质粒的构建 | 第19-20页 |
3.聚合酶链式反应(PCR)技术 | 第20-21页 |
4.RNA的提取及逆转录 | 第21-22页 |
5.实时定量PCR技术 | 第22-23页 |
6.蛋白质兔疫印迹(Western Blotting, WB)技术 | 第23-27页 |
7.稳定转染细胞系的构建 | 第27-29页 |
8.Luciferase assay 技术 | 第29页 |
9.联苯胺染色 | 第29-30页 |
第三章 实验结果与分析 | 第30-39页 |
第一部分 寻找造血相关的microRNA的上游转录因子 | 第30-33页 |
第一节 建立K562稳定过表达细胞系 | 第30-31页 |
第二节 在稳定过表达细胞系中检测miRNA的表达情况 | 第31-33页 |
第二部分 寻找microRNA在造血中的下游IE基因 | 第33-39页 |
第一节 利用网站预测候选IE基因 | 第33-35页 |
第二节 生物学实验方法鉴定miRNA下游的靶基因 | 第35-39页 |
第四章 总结与讨论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-44页 |
致谢 | 第44页 |