致谢 | 第6-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
目录 | 第12-15页 |
图目录 | 第15-16页 |
表目录 | 第16-17页 |
缩略词 | 第17-18页 |
第一章 文献综述 | 第18-31页 |
1.1 高温对水稻花器官伤害和糖代谢的影响 | 第19-22页 |
1.1.1 高温对水稻花器官发育与结实率影响的生态生理特点 | 第19-21页 |
1.1.2 高温对水稻花器发育中糖代谢相关酶和基因的影响 | 第21-22页 |
1.2 高温胁迫对稻米淀粉组分与籽粒淀粉合成代谢的影响 | 第22-26页 |
1.2.1 淀粉组成、理化特性与稻米品质的关系 | 第22-23页 |
1.2.2 高温胁迫对稻米直链淀粉含量和淀粉链长结构的影响 | 第23页 |
1.2.3 植物库器官淀粉生物合成代谢途径的关键酶基因 | 第23-25页 |
1.2.4 高温对水稻胚乳中淀粉合成关键酶及其主要同工型基因表达影响 | 第25-26页 |
1.3 高温对稻米蛋白含量、组分及其贮藏蛋白合成的影响 | 第26-30页 |
1.3.1 水稻贮藏蛋白组成及其合成积累过程 | 第26-28页 |
1.3.2 水稻贮藏蛋白合成与相关基因表达间关系 | 第28-29页 |
1.3.3 高温对稻米贮藏蛋白含量与籽粒氮代谢的影响 | 第29-30页 |
1.4 本研究目的与内容 | 第30-31页 |
第二章 高温对水稻花器伤害和花粉育性影响的糖代谢机制 | 第31-50页 |
引言 | 第31-32页 |
2.1 材料和方法 | 第32-38页 |
2.1.1 试验材料与控温处理 | 第32-34页 |
2.1.2 花药半薄切片多糖染色 | 第34-35页 |
2.1.2.1 半薄切片制备 | 第34页 |
2.1.2.2 半薄切片染色 | 第34-35页 |
2.1.3 花药糖含量测定 | 第35-36页 |
2.1.4 总RNA的提取、纯化与反转录 | 第36页 |
2.1.4.1 总RNA的提取和纯化 | 第36页 |
2.1.4.2 总RNA的反转录 | 第36页 |
2.1.5 半定量和荧光实时定量分析 | 第36-38页 |
2.2 结果与分析 | 第38-46页 |
2.2.1 减数分裂期和小孢子期高温对水稻结实率和花粉育性的影响 | 第38-40页 |
2.2.2 减数分裂期和小孢子期高温对花药中糖含量的影响 | 第40-42页 |
2.2.3 减数分裂期高温对花药中糖代谢和淀粉合成相关基因表达谱的影响 | 第42-44页 |
2.2.4 减数分裂期持续高温对花药糖代谢和淀粉合成主要基因表达的影响 | 第44-46页 |
2.3 讨论 | 第46-50页 |
第三章 高温胁迫对水稻胚乳淀粉合成相关酶基因表达的影响 | 第50-77页 |
引言 | 第50-52页 |
3.1 材料与方法 | 第52-58页 |
3.1.1 试验材料与温度处理设计 | 第52-54页 |
3.1.2 RNA提取和cDNA反转录 | 第54页 |
3.1.3 DNA提取和突变位点测序 | 第54-55页 |
3.1.4 Wx基因剪切效率和淀粉颗粒结合蛋白的SDS-PAGE分析 | 第55-56页 |
3.1.5 实时荧光定量PCR | 第56页 |
3.1.6 酶活测定 | 第56页 |
3.1.7 淀粉组成,结构和理化特性的测定 | 第56-58页 |
3.2 结果与分析 | 第58-71页 |
3.2.1 9311eha的突变基因鉴定及其Wx基因表达对高温胁迫响应的敏感性 | 第58-63页 |
3.2.2 9311eha和9311在不同温度处理下淀粉粒结构,GT和支链淀粉链长分布特征的比较 | 第63-68页 |
3.2.3 9311eha和9311在不同温度处理下淀粉合成酶活性和主要同工型基因表达的比较 | 第68-71页 |
3.3 讨论 | 第71-77页 |
3.3.1 高温对GBSS1表达的影响及其与淀粉合成其他相关酶主要同工型的关系 | 第71-75页 |
3.3.2 高温下AAC变化与淀粉糊化特性,淀粉颗粒形态和淀粉精细结构的关系 | 第75-77页 |
第四章 高温胁迫对水稻胚乳贮藏蛋白合成相关基因转录表达的调控效应 | 第77-95页 |
引言 | 第77-80页 |
4.1 材料与方法 | 第80-83页 |
4.1.1 实验材料和温度处理 | 第80页 |
4.1.2 总蛋白含量测定 | 第80页 |
4.1.3 蛋白组分提取和电泳 | 第80-81页 |
4.1.4 糊粉层和淀粉层的分离 | 第81页 |
4.1.5 RNA提取、纯化和反转录 | 第81页 |
4.1.6 半定量PCR | 第81-83页 |
4.2 结果与分析 | 第83-91页 |
4.2.1 高温处理对稻米贮藏蛋白含量和亚基组分的影响 | 第83-86页 |
4.2.2 高温处理对灌浆籽粒中贮藏蛋白合成代谢相关基因表达的影响 | 第86-89页 |
4.2.3 高温处理对胚乳中籽粒氮供应和碳氮分配相关基因表达的影响 | 第89-91页 |
4.3 讨论 | 第91-95页 |
第五章 蛋白二硫异构酶对水稻高温花粉育性与结实特性的调控 | 第95-112页 |
引言 | 第95-96页 |
5.1 材料与方法 | 第96-100页 |
5.1.1 试验材料及试剂 | 第96页 |
5.1.2 PDI基因RNAi和超表达目标区段的选择、扩增及其亚克隆 | 第96-97页 |
5.1.3 RNAi和超表达终载体的构建 | 第97-98页 |
5.1.3.1 RNAi终载体的构建 | 第97-98页 |
5.1.3.2 超表达终载体的构建 | 第98页 |
5.1.4 表达载体的农杆菌转化、转基因植株的获得及分子鉴定 | 第98-99页 |
5.1.5 转基因T2代植株的高温结实特性和花器官形态分析 | 第99-100页 |
5.1.6 PDI基因表达的荧光定量PCR检测 | 第100页 |
5.1.7 理化指标测定 | 第100页 |
5.2 结果与分析 | 第100-110页 |
5.2.1 RNAi表达载体pTCK303-RiOsPDI和超表达载体pTCK303-OsPDI的构建及其农杆菌EHA105的转化 | 第100-103页 |
5.2.2 农杆菌EHA105介导的遗传转化、T0代转基因植株获得及其T1代的分离鉴定 | 第103-104页 |
5.2.3 转基因T2代植株的农艺表现和高温结实特性 | 第104-107页 |
5.2.4 PDI沉默和超表达植株花粉的PDI表达及其温度胁迫响应 | 第107-108页 |
5.2.5 花前高温胁迫对转基因T2代植株花器表型和花粉育性影响 | 第108-110页 |
5.3 讨论 | 第110-112页 |
全文总结及研究展望 | 第112-114页 |
参考文献 | 第114-127页 |