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高温对水稻花器伤害和籽粒品质影响的相关碳氮代谢机理

致谢第6-7页
摘要第7-9页
Abstract第9-11页
目录第12-15页
图目录第15-16页
表目录第16-17页
缩略词第17-18页
第一章 文献综述第18-31页
    1.1 高温对水稻花器官伤害和糖代谢的影响第19-22页
        1.1.1 高温对水稻花器官发育与结实率影响的生态生理特点第19-21页
        1.1.2 高温对水稻花器发育中糖代谢相关酶和基因的影响第21-22页
    1.2 高温胁迫对稻米淀粉组分与籽粒淀粉合成代谢的影响第22-26页
        1.2.1 淀粉组成、理化特性与稻米品质的关系第22-23页
        1.2.2 高温胁迫对稻米直链淀粉含量和淀粉链长结构的影响第23页
        1.2.3 植物库器官淀粉生物合成代谢途径的关键酶基因第23-25页
        1.2.4 高温对水稻胚乳中淀粉合成关键酶及其主要同工型基因表达影响第25-26页
    1.3 高温对稻米蛋白含量、组分及其贮藏蛋白合成的影响第26-30页
        1.3.1 水稻贮藏蛋白组成及其合成积累过程第26-28页
        1.3.2 水稻贮藏蛋白合成与相关基因表达间关系第28-29页
        1.3.3 高温对稻米贮藏蛋白含量与籽粒氮代谢的影响第29-30页
    1.4 本研究目的与内容第30-31页
第二章 高温对水稻花器伤害和花粉育性影响的糖代谢机制第31-50页
    引言第31-32页
    2.1 材料和方法第32-38页
        2.1.1 试验材料与控温处理第32-34页
        2.1.2 花药半薄切片多糖染色第34-35页
            2.1.2.1 半薄切片制备第34页
            2.1.2.2 半薄切片染色第34-35页
        2.1.3 花药糖含量测定第35-36页
        2.1.4 总RNA的提取、纯化与反转录第36页
            2.1.4.1 总RNA的提取和纯化第36页
            2.1.4.2 总RNA的反转录第36页
        2.1.5 半定量和荧光实时定量分析第36-38页
    2.2 结果与分析第38-46页
        2.2.1 减数分裂期和小孢子期高温对水稻结实率和花粉育性的影响第38-40页
        2.2.2 减数分裂期和小孢子期高温对花药中糖含量的影响第40-42页
        2.2.3 减数分裂期高温对花药中糖代谢和淀粉合成相关基因表达谱的影响第42-44页
        2.2.4 减数分裂期持续高温对花药糖代谢和淀粉合成主要基因表达的影响第44-46页
    2.3 讨论第46-50页
第三章 高温胁迫对水稻胚乳淀粉合成相关酶基因表达的影响第50-77页
    引言第50-52页
    3.1 材料与方法第52-58页
        3.1.1 试验材料与温度处理设计第52-54页
        3.1.2 RNA提取和cDNA反转录第54页
        3.1.3 DNA提取和突变位点测序第54-55页
        3.1.4 Wx基因剪切效率和淀粉颗粒结合蛋白的SDS-PAGE分析第55-56页
        3.1.5 实时荧光定量PCR第56页
        3.1.6 酶活测定第56页
        3.1.7 淀粉组成,结构和理化特性的测定第56-58页
    3.2 结果与分析第58-71页
        3.2.1 9311eha的突变基因鉴定及其Wx基因表达对高温胁迫响应的敏感性第58-63页
        3.2.2 9311eha和9311在不同温度处理下淀粉粒结构,GT和支链淀粉链长分布特征的比较第63-68页
        3.2.3 9311eha和9311在不同温度处理下淀粉合成酶活性和主要同工型基因表达的比较第68-71页
    3.3 讨论第71-77页
        3.3.1 高温对GBSS1表达的影响及其与淀粉合成其他相关酶主要同工型的关系第71-75页
        3.3.2 高温下AAC变化与淀粉糊化特性,淀粉颗粒形态和淀粉精细结构的关系第75-77页
第四章 高温胁迫对水稻胚乳贮藏蛋白合成相关基因转录表达的调控效应第77-95页
    引言第77-80页
    4.1 材料与方法第80-83页
        4.1.1 实验材料和温度处理第80页
        4.1.2 总蛋白含量测定第80页
        4.1.3 蛋白组分提取和电泳第80-81页
        4.1.4 糊粉层和淀粉层的分离第81页
        4.1.5 RNA提取、纯化和反转录第81页
        4.1.6 半定量PCR第81-83页
    4.2 结果与分析第83-91页
        4.2.1 高温处理对稻米贮藏蛋白含量和亚基组分的影响第83-86页
        4.2.2 高温处理对灌浆籽粒中贮藏蛋白合成代谢相关基因表达的影响第86-89页
        4.2.3 高温处理对胚乳中籽粒氮供应和碳氮分配相关基因表达的影响第89-91页
    4.3 讨论第91-95页
第五章 蛋白二硫异构酶对水稻高温花粉育性与结实特性的调控第95-112页
    引言第95-96页
    5.1 材料与方法第96-100页
        5.1.1 试验材料及试剂第96页
        5.1.2 PDI基因RNAi和超表达目标区段的选择、扩增及其亚克隆第96-97页
        5.1.3 RNAi和超表达终载体的构建第97-98页
            5.1.3.1 RNAi终载体的构建第97-98页
            5.1.3.2 超表达终载体的构建第98页
        5.1.4 表达载体的农杆菌转化、转基因植株的获得及分子鉴定第98-99页
        5.1.5 转基因T2代植株的高温结实特性和花器官形态分析第99-100页
        5.1.6 PDI基因表达的荧光定量PCR检测第100页
        5.1.7 理化指标测定第100页
    5.2 结果与分析第100-110页
        5.2.1 RNAi表达载体pTCK303-RiOsPDI和超表达载体pTCK303-OsPDI的构建及其农杆菌EHA105的转化第100-103页
        5.2.2 农杆菌EHA105介导的遗传转化、T0代转基因植株获得及其T1代的分离鉴定第103-104页
        5.2.3 转基因T2代植株的农艺表现和高温结实特性第104-107页
        5.2.4 PDI沉默和超表达植株花粉的PDI表达及其温度胁迫响应第107-108页
        5.2.5 花前高温胁迫对转基因T2代植株花器表型和花粉育性影响第108-110页
    5.3 讨论第110-112页
全文总结及研究展望第112-114页
参考文献第114-127页

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