| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 英文缩写对照表 | 第6-9页 |
| 1 前言 | 第9-16页 |
| 1.1 牛病毒性腹泻病毒与猪瘟病毒的分类及分子结构以及理化特征 | 第9-11页 |
| 1.2 BVDV与CSFV的流行概况 | 第11-12页 |
| 1.3 BVDV与CSFV的检测技术 | 第12-13页 |
| 1.4 猪感染BVDV的调查 | 第13-14页 |
| 1.5 CSFV，BVDV的鉴别诊断方法 | 第14-15页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第15-16页 |
| 2 材料和方法 | 第16-29页 |
| 2.1 材料 | 第16-18页 |
| 2.1.1 常用软件及生物信息学网站 | 第16页 |
| 2.1.2 菌株、毒株、载体、细胞株 | 第16页 |
| 2.1.3 常用酶类及试剂盒 | 第16页 |
| 2.1.4 其他主要试剂 | 第16页 |
| 2.1.5 主要实验耗材 | 第16页 |
| 2.1.6 实验室主要仪器设备 | 第16-17页 |
| 2.1.7 常用试剂的配置 | 第17-18页 |
| 2.2 方法 | 第18-29页 |
| 2.2.1 基因序列的下载与比对 | 第18页 |
| 2.2.2 CSFV，BVDV的培养 | 第18-19页 |
| 2.2.2.1 PK-15，MDBK 细胞的复苏 | 第18页 |
| 2.2.2.2 PK-15，MDBK 细胞的传代 | 第18-19页 |
| 2.2.2.3 BVDV，CSFV的扩增 | 第19页 |
| 2.2.3 病毒核酸的提取及浓度的检测 | 第19-20页 |
| 2.2.4 CSFV，BVDV的RT-PCR条件的优化 | 第20-21页 |
| 2.2.5 CSFV，BVDV的特异性RT-PCR实验 | 第21-22页 |
| 2.2.6 CSFV，BVDV的敏感性RT-PCR检测 | 第22-24页 |
| 2.2.7 CSFV，BVDV的双重RT-PCR检测 | 第24-25页 |
| 2.2.8 双重RT-PCR产物的纯化 | 第25-26页 |
| 2.2.9 RT-PCR产物与p MD 19-T载体的连接 | 第26页 |
| 2.2.10 DH5α 感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
| 2.2.11 连接产物转化DH5α 感受态细胞 | 第27页 |
| 2.2.12 重组质粒的菌液PCR鉴定和阳性质粒的抽提 | 第27-29页 |
| 2.2.13 CSFV，BVDV菌液PCR结果的测序 | 第29页 |
| 3 实验结果与分析 | 第29-34页 |
| 3.1 CSFV，BVDV的RT-PCR条件的优化 | 第29-30页 |
| 3.2 CSFV，BVDV的特异性RT-PCR实验 | 第30-31页 |
| 3.3 CSFV，BVDV的敏感性RT-PCR检测 | 第31-32页 |
| 3.4 CSFV，BVDV的双重RT-PCR检测 | 第32页 |
| 3.5 CSFV，BVDV的菌液RCR检测 | 第32-33页 |
| 3.6 临床样品检测 | 第33-34页 |
| 4 讨论与结论 | 第34-36页 |
| 4.1 序列的比对 | 第34-35页 |
| 4.2 特异性检测 | 第35页 |
| 4.3 结论 | 第35-36页 |
| 全文总结 | 第36-37页 |
| 致谢 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-42页 |
