摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 绪论 | 第9-23页 |
1.1 SLA-Ⅰ的研究进展 | 第9-16页 |
1.1.1 SLA-Ⅰ类基因的结构特点 | 第9-10页 |
1.1.2 SLA-Ⅰ类抗原的结构和功能 | 第10-12页 |
1.1.3 SLA-Ⅰ类等位基因的多态性 | 第12页 |
1.1.4 细胞表位的研究进展 | 第12-14页 |
1.1.5 SLA基因与T细胞抗原表位结合的研究 | 第14-16页 |
1.2 PRRSV的研究进展 | 第16-20页 |
1.2.1 PRRSV的细胞免疫 | 第17-18页 |
1.2.2 PRRSV M蛋白的研究进展 | 第18-19页 |
1.2.3 PRRSV M蛋白CTL表位鉴定的研究 | 第19-20页 |
1.3 研究目的意义 | 第20-23页 |
第2章 SLA-1 等位基因特征分析 | 第23-33页 |
2.1 材料 | 第23页 |
2.1.1 实验动物 | 第23页 |
2.1.2 试验试剂 | 第23页 |
2.1.3 仪器设备 | 第23页 |
2.2 方法 | 第23-26页 |
2.2.1 反转录和PCR扩增 | 第23-25页 |
2.2.2 PCR产物直接测序和克隆测序 | 第25-26页 |
2.2.3 序列分析方法 | 第26页 |
2.3 结果 | 第26-31页 |
2.3.1 RT-PCR扩增结果 | 第26页 |
2.3.2 SLA-1 等位基因克隆结果 | 第26-27页 |
2.3.3 SLA-1 等位基因序列分析 | 第27-28页 |
2.3.4 SLA-1 等位基因亲缘进化树分析 | 第28页 |
2.3.5 SLA-1 等位基因遗传多态性分析 | 第28-31页 |
2.4 讨论 | 第31-33页 |
第3章 SLA-Ⅰ复合体的构建 | 第33-48页 |
3.1 材料 | 第33页 |
3.1.1 质粒 | 第33页 |
3.1.2 试验试剂 | 第33页 |
3.1.3 仪器设备 | 第33页 |
3.2 方法 | 第33-40页 |
3.2.1 SLA-Ⅰ复合体的构建示意图及相关引物 | 第33-35页 |
3.2.2 SLA-1 胞外区及 β2m的成熟肽区扩增 | 第35-36页 |
3.2.3 pET-(epitope)-SLA-1*X-Linker-β2m复合体的构建 | 第36-37页 |
3.2.4 融合蛋白表达、SDS-PAGE和Western blot鉴定 | 第37-40页 |
3.3 结果 | 第40-45页 |
3.3.1 SLA-1 胞外区及 β2m成熟肽区扩增结果 | 第40-41页 |
3.3.2 pET-(epitope)-SLA-1*X-Linker-β2m复合体构建结果 | 第41-45页 |
3.4 讨论 | 第45-48页 |
第4章 与SLA-Ⅰ等位基因特异性结合候选CTL表位的筛选 | 第48-53页 |
4.1 材料 | 第48页 |
4.1.1 SLA-Ⅰ复合体蛋白 | 第48页 |
4.1.2 试验试剂 | 第48页 |
4.1.3 仪器设备 | 第48页 |
4.2 方法 | 第48-50页 |
4.2.1 蛋白定量 | 第48-49页 |
4.2.2 SLA Ⅰ类分子单克隆抗体PT85A | 第49页 |
4.2.3 ELISA检测 | 第49-50页 |
4.3 结果 | 第50-51页 |
4.3.1 ELISA检测结果 | 第50页 |
4.3.2 预测候选表位与SLA-1 特异性结合结果 | 第50-51页 |
4.4 讨论 | 第51-53页 |
第5章 结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
攻读学位期间发表论文 | 第67页 |