| 中文摘要 | 第10-11页 |
| 英文摘要 | 第11页 |
| 第一章 综述 | 第12-18页 |
| 1.1 线虫简介 | 第12-13页 |
| 1.1.1 植物寄生线虫 | 第12页 |
| 1.1.2 定殖性线虫生活史 | 第12-13页 |
| 1.2 植物抗性响应 | 第13-15页 |
| 1.2.1 侵染前的防御反应 | 第13-15页 |
| 1.2.2 非宿主免疫反应 | 第15页 |
| 1.2.3 宿主特异性免疫反应 | 第15页 |
| 1.3 植物抗性基因 | 第15-18页 |
| 1.3.1 Hs1~(pro-1)基因与抗线虫候选基因GmHs1~(pro-1) | 第16-18页 |
| 第二章 GmHs1~(pro-1)基因克隆与生物信息学分析 | 第18-39页 |
| 2.1 材料与方法 | 第18-24页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第18-19页 |
| 2.1.2 试验方法 | 第19-24页 |
| 2.2 结果与分析 | 第24-38页 |
| 2.2.1 大豆RNA的质量检测 | 第24-25页 |
| 2.2.2 GmHs1~(Pro-1)的克隆 | 第25页 |
| 2.2.3 GmHs1~(Pro-1)序列多样性分析 | 第25-29页 |
| 2.2.4 GmHs1~(pro-1)蛋白基本性质分析 | 第29-31页 |
| 2.2.5 GmHs1~(Pro-1)蛋白质结构分析 | 第31-32页 |
| 2.2.6 GmHs1~(pro-1)的注释与功能预测 | 第32页 |
| 2.2.7 GmHs1~(pro-1)蛋白亚细胞定位预测 | 第32-36页 |
| 2.2.8 GmHs1~(pro-1)蛋白互作分析与富集 | 第36-38页 |
| 2.3 小节与讨论 | 第38-39页 |
| 第三章 GmHs1~(pro-1)基因在线虫侵染后的表达分析 | 第39-46页 |
| 3.1 材料与方法 | 第39-41页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第39-40页 |
| 3.1.2 试验方法 | 第40-41页 |
| 3.2 结果与分析 | 第41-44页 |
| 3.2.1 qPCR结果的检测 | 第41-42页 |
| 3.2.2 qPCR测定GmHs1~(pro-1)基因相对表达量 | 第42-44页 |
| 3.3 小节与讨论 | 第44-46页 |
| 第四章 GmHs1~(pro-1)蛋白的亚细胞定位 | 第46-54页 |
| 4.1 材料与方法 | 第46-50页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第46页 |
| 4.1.2 试验方法 | 第46-50页 |
| 4.2 结果与分析 | 第50-53页 |
| 4.2.1 含有酶切位点GmHs1~(pro-1)序列的电泳 | 第50页 |
| 4.2.2 双元表达载体pCAMBIA1303::T2的构建 | 第50-52页 |
| 4.2.3 GmHs1~(pro-1)在烟草表皮及水稻原生质体的亚细胞定位 | 第52-53页 |
| 4.3 小节与讨论 | 第53-54页 |
| 第五章 GmHs1~(pro-1)基因的过表达载体构建 | 第54-58页 |
| 5.1 材料与方法 | 第54-56页 |
| 5.1.1 试验材料 | 第54-55页 |
| 5.1.2 试验方法 | 第55-56页 |
| 5.2 结果与分析 | 第56-57页 |
| 5.2.1 电泳验证获得的插入序列 | 第56页 |
| 5.2.2 pNI202::T2载体的菌液PCR验证 | 第56-57页 |
| 5.3 小节与讨论 | 第57-58页 |
| 第六章 GmHs1~(pro-1)基因编辑靶点检测与敲除载体构建 | 第58-68页 |
| 6.1 材料与方法 | 第59-63页 |
| 6.1.1 试验材料 | 第59-60页 |
| 6.1.2 试验方法 | 第60-63页 |
| 6.2 结果与分析 | 第63-66页 |
| 6.2.1 PCR获得体外转录模版 | 第63页 |
| 6.2.2 体外转录获得gRNA | 第63-64页 |
| 6.2.3 spCas9/gRNA体外酶切反应 | 第64-65页 |
| 6.2.4 连接pVK005载体 | 第65-66页 |
| 6.3 小节与讨论 | 第66-68页 |
| 第七章 结论 | 第68-70页 |
| 7.1 GmHs1~(pro-1)基因在物种内保守性高 | 第68页 |
| 7.2 GmHs1~(pro-1)基因参与大豆胞囊线虫抗性作用 | 第68页 |
| 7.3 GmHs1~(pro-1)蛋白只定位在细胞质内 | 第68页 |
| 7.4 GmHs1~(pro-1)蛋白可能是参与色氨酸降解的双加氧酶 | 第68-69页 |
| 7.5 构建了GmHs1~(pro-1)基因的过表达及敲除质粒 | 第69页 |
| 7.6 展望 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 攻读学位论文期间发表的文章 | 第77页 |
