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基于DNA四面体的级联式药物递送系统逆转乳腺癌细胞耐药研究

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
英文缩略词表第17-18页
第一章 前言第18-22页
第二章 基于DNA四面体的级联式药物递送系统的制备及表征第22-44页
    1 仪器与试剂第22-23页
        1.1 仪器第22-23页
        1.2 试剂第23页
    2 实验内容第23-31页
        2.1 阿霉素(DOX)含量测定方法的建立第23-24页
            2.1.1 DOX最大吸收波长的确定第23页
            2.1.2 专属性第23页
            2.1.3 DOX标准曲线的建立第23-24页
            2.1.4 准确度考察第24页
            2.1.5 精密度考察第24页
            2.1.6 包封率测定方法的确立第24页
        2.2 实验所需主要溶液的配制第24-25页
            2.2.1 MgCl2(100 mM)溶液的配制第24-25页
            2.2.2 单链DNA(ssDNA)溶液配制第25页
        2.3 DNA四面体(DNA Tetrahedron/Td)的构建第25-27页
            2.3.1 DNA四面体的构建第25-26页
            2.3.2 DNA四面体的表征第26-27页
                2.3.2.1 凝胶电泳第26页
                2.3.2.2 凝胶成像第26页
                2.3.2.3 原子力显微镜(AFM)表征第26-27页
        2.4 缓冲液中MgCl_2溶液合理浓度的考察第27页
        2.5 插入阿霉素的DNA四面体(DOX@Td)的制备及条件优化第27-28页
            2.5.1 阿霉素(DOX)的插入第27页
            2.5.2 阿霉素(DOX)插入量测定第27-28页
            2.5.3 阿霉素(DOX)插入浓度的考察第28页
            2.5.4 最佳孵育时间的考察第28页
            2.5.5 DOX@Td稳定性考察第28页
        2.6 DOX@Td@Lipo的制备第28-29页
            2.6.1 空白脂质体的制备第28页
            2.6.2 脂质体阿霉素(DOX@Lipo)的制备第28-29页
            2.6.3 DNA四面体脂质体(Td@Lipo)的制备第29页
            2.6.4 DOX@Td@Lipo的制备第29页
        2.7 空白脂质体制备处方筛选第29页
            2.7.1 磷脂及胆固醇间的比例第29页
            2.7.2 超声时间第29页
            2.7.3 孵育温度第29页
        2.8 DOX@Td@Lipo制备处方筛选第29-30页
            2.8.1 孵育温度第30页
            2.8.2 孵育时间第30页
            2.8.3 DOX@Td的投料量第30页
        2.9 DOX@Td@Lipo稳定性及体外特征考察第30-31页
            2.9.1 DOX@Td@Lipo的稳定性考察第30页
            2.9.2 粒径分布第30页
            2.9.3 透射电镜(TEM)第30-31页
            2.9.4 DOX@Td@Lipo体外释药行为考察第31页
            2.9.5 统计学分析第31页
    3 结果与讨论第31-43页
        3.1 阿霉素(DOX)含量测定方法第31-33页
            3.1.1 DOX最大吸收波长的确定第31-32页
            3.1.2 DOX的标准曲线第32页
            3.1.3 准确度第32页
            3.1.4 精密度第32-33页
        3.2 DNA四面体的表征第33-34页
            3.2.1 凝胶成像第33页
            3.2.2 AFM第33-34页
        3.3 缓冲溶液中MgCl2的合理浓度第34-35页
        3.4 DOX@Td制备和条件优化第35-37页
            3.4.1 投入阿霉素(DOX)浓度的确定第35-36页
            3.4.2 最佳孵育时间第36页
            3.4.3 DOX@Td稳定性考察第36-37页
        3.5 空白脂质体制备处方筛选第37-39页
            3.5.1 磷脂及胆固醇间的比例第37页
            3.5.2 超声时间第37-38页
            3.5.3 孵育温度第38页
            3.5.4 空白脂质体制备的最优处方第38-39页
        3.6 DOX@Td@Lipo制备处方筛选第39-40页
            3.6.1 孵育温度第39页
            3.6.2 孵育时间第39页
            3.6.3 DOX@Td的投料量第39-40页
        3.7 DOX@Td@Lipo基本性质考察第40-43页
            3.7.1 DOX@Td@Lipo的稳定性第40页
            3.7.2 粒径分布第40-41页
            3.7.3 透射电镜(TEM)第41页
            3.7.4 DOX@Td@Lipo的体外释药行为第41-43页
    4 本章小结第43-44页
第三章 DOX@Td@Lipo的体外抗肿瘤活性考察第44-60页
    1 仪器与试剂第44-46页
        1.1 仪器第44页
        1.2 试剂第44-45页
        1.3 实验所需各溶液的配制第45-46页
            1.3.1 细胞培养用完全培养基的配制第45页
            1.3.2 PBS缓冲盐溶液的配制第45页
            1.3.34%多聚甲醛固定液的配制第45页
            1.3.4 细胞冻存液的配制第45页
            1.3.5 DAPI染液的配制第45-46页
            1.3.6 50%TCA溶液的配制第46页
            1.3.7 10mM Tris碱溶液的配制第46页
            1.3.8 1%冰乙酸溶液配制第46页
            1.3.9 0.4%SRB溶液配制第46页
    2 实验内容第46-51页
        2.1 MCF-7 和MCF-7/ADR细胞的培养第46-48页
            2.1.1 培养前准备第46页
            2.1.2 细胞的复苏第46-47页
            2.1.3 细胞的传代第47页
            2.1.4 细胞的冻存第47页
            2.1.5 细胞爬片与封片第47-48页
            2.1.6 细胞的计数第48页
        2.2 细胞抑制率考察第48-49页
            2.2.1 SRB法检测细胞抑制率第48-49页
            2.2.2 DNA四面体对MCF-7 和MCF-7/ADR细胞毒性的考察第49页
            2.2.3 空白脂质体对MCF-7 和MCF-7/ADR细胞毒性的考察第49页
            2.2.4 DOX@Td@Lipo对MCF-7 和MCF-7/ADR细胞毒性的考察第49页
        2.3 共聚焦显微镜考察MCF-7/ADR耐药细胞内分布行为第49-50页
            2.3.1 DOX在MCF-7/ADR细胞中的分布情况第49-50页
            2.3.2 FAM-Td在MCF-7/ADR细胞中的分布情况第50页
            2.3.3 DOX@Td在MCF-7/ADR细胞中的分布情况第50页
        2.4 乳腺癌细胞对DOX@Td@Lipo的摄取行为考察第50-51页
    3 结果与讨论第51-59页
        3.1 DNA四面体对MCF-7 和MCF-7/ADR细胞的毒性第51页
        3.2 空白脂质体对MCF-7 和MCF-7/ADR细胞的毒性第51-52页
        3.3 激光共聚焦考察DNA四面体在MCF-7/ADR耐药细胞中的分布结果第52-54页
        3.4 DOX@Td@Lipo对MCF-7 和MCF-7/ADR细胞的毒性第54-56页
            3.4.1 DOX@Td@Lipo对MCF-7 细胞的毒性第54-55页
            3.4.2 DOX@Td@Lipo对MCF-7/ADR细胞的毒性第55-56页
        3.5 乳腺癌细胞对DOX@Td@Lipo的摄取行为考察第56-59页
    4 本章小结第59-60页
第四章 DOX@Td@Lipo的体内抗肿瘤活性研究第60-70页
    1 仪器与试剂第60-61页
        1.1 仪器第60页
        1.2 试剂第60页
        1.3 实验动物第60-61页
    2 实验方法第61-63页
        2.1 荷瘤裸鼠模型的建立第61页
        2.2 DOX@Td@Lipo在裸鼠体内的组织分布研究第61-62页
            2.2.1 DOX@Td@Lipo-IR783的制备第61-62页
            2.2.2 IR783@Lipo在裸鼠体内的组织分布第62页
        2.3 DOX@Td@Lipo体内抗肿瘤活性研究第62-63页
            2.3.1 实验分组及数据测定第62-63页
            2.3.2 HE染色病理切片考察第63页
            2.3.3 TUNEL凋亡考察第63页
    3 结果与讨论第63-69页
        3.1 DOX@Td@Lipo在裸鼠体内的组织分布第63-65页
        3.2 体内抗肿瘤活性第65-69页
            3.2.1 荷瘤裸鼠瘤体积和体重变化第65-66页
            3.2.2 HE染色病理切片第66-68页
            3.2.3 TUNEL凋亡第68-69页
    4 本章小结第69-70页
第五章 全文总结第70-72页
参考文献第72-75页
个人简介第75-76页
致谢第76页

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