| 摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第11-17页 |
| 1.1 研究目的与意义 | 第11页 |
| 1.2 文献综述 | 第11-17页 |
| 1.2.1 BEV病原学 | 第11-13页 |
| 1.2.2 BEV流行病学 | 第13页 |
| 1.2.3 BEV诊断 | 第13-15页 |
| 1.2.4 牛肠道病毒应用 | 第15-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-28页 |
| 2.1 牛肠道病毒VP2蛋白免疫原性研究 | 第17-24页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第17页 |
| 2.1.2 主要仪器和设备 | 第17-18页 |
| 2.1.3 实验方法 | 第18-24页 |
| 2.2 牛肠道病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立 | 第24-28页 |
| 2.2.1 病毒株和样品的来源 | 第24页 |
| 2.2.2 主要试剂与仪器 | 第24页 |
| 2.2.3 实验方法 | 第24-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-36页 |
| 3.1 牛肠道病毒VP2蛋白免疫原性研究 | 第28-32页 |
| 3.1.1 PCR扩增和重组原核表达载体p ET32a(+)-VP2的构建及鉴定 | 第28页 |
| 3.1.2 融合蛋白的诱导表达、可溶性分析、非变性条件纯化 | 第28-29页 |
| 3.1.3 纯化蛋白的特异性检测 | 第29-30页 |
| 3.1.4 融合蛋白p ET32a(+)-VP2抗血清的效价测定及特异性检测 | 第30-31页 |
| 3.1.5 病毒的培养及血清中和实验 | 第31-32页 |
| 3.2 牛肠道病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立 | 第32-36页 |
| 3.2.1 确定SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR反应条件、建立标准曲线 | 第32-33页 |
| 3.2.2 特异性试验 | 第33页 |
| 3.2.3 敏感性试验 | 第33-34页 |
| 3.2.4 重复性试验 | 第34-35页 |
| 3.2.5 临床应用 | 第35-36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| 4.1 牛肠道病毒VP2蛋白免疫原性研究 | 第36-37页 |
| 4.2 牛肠道病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立 | 第37-38页 |
| 5 结论 | 第38-39页 |
| 致谢 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-46页 |
| 附录 | 第46-48页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第48页 |
