| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 摘要 | 第11-13页 |
| Abstract | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第15-28页 |
| 1 荔枝概况 | 第15页 |
| 2 采后荔枝果皮褐变的可能机制 | 第15-16页 |
| 2.1 失水与褐变 | 第15页 |
| 2.2 花色苷与褐变 | 第15页 |
| 2.3 酶促褐变 | 第15-16页 |
| 2.4 烯与褐变 | 第16页 |
| 2.5 微生物与褐变 | 第16页 |
| 2.6 其他原因与褐变 | 第16页 |
| 3 结合态POD的生理功能 | 第16-17页 |
| 4 结合态POD的提取及分离纯化 | 第17-24页 |
| 4.1 去垢剂提取结合态POD的机理与应用 | 第17-20页 |
| 4.1.1 去垢剂的特性 | 第17-18页 |
| 4.1.2 去垢剂的增溶机理 | 第18页 |
| 4.1.3 去垢剂的选择 | 第18-19页 |
| 4.1.4 去垢剂在结合态POD提取中的应用 | 第19-20页 |
| 4.2 结合态POD的柱层析分离 | 第20-23页 |
| 4.2.1 离子交换层析 | 第20-21页 |
| 4.2.2 分子筛层析 | 第21页 |
| 4.2.3 疏水作用层析 | 第21-22页 |
| 4.2.4 亲和层析 | 第22页 |
| 4.2.5 柱层析在结合态POD分离纯化中的应用 | 第22-23页 |
| 4.3 去垢剂对膜蛋白分析的影响及去除 | 第23-24页 |
| 4.4 小结 | 第24页 |
| 5 结合态POD的酶学性质 | 第24-26页 |
| 5.1 结合态POD的分子量 | 第24-25页 |
| 5.2 结合态POD的最适pH | 第25页 |
| 5.3 结合态POD的最适温度及热稳定性 | 第25页 |
| 5.4 结合态POD对不同底物的亲和力 | 第25-26页 |
| 5.5 抑制剂对结合态POD活性的影响 | 第26页 |
| 5.6 金属离子对结合态POD活性的影响 | 第26页 |
| 6 本研究的目的及内容 | 第26-28页 |
| 6.1 本研究目的 | 第27页 |
| 6.2 本研究内容 | 第27-28页 |
| 第二章 荔枝采后果皮可溶性和结合态POD活性变化 | 第28-36页 |
| 1 材料与方法 | 第28-30页 |
| 1.1 材料 | 第28页 |
| 1.2 仪器与试剂 | 第28页 |
| 1.3 果皮褐变指数的评定 | 第28页 |
| 1.4 果肉可溶性固形物的测定 | 第28-29页 |
| 1.5 果皮可溶态结合态POD的提取 | 第29页 |
| 1.6 POD活性检测 | 第29页 |
| 1.7 POD同工酶谱 | 第29-30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-34页 |
| 2.1 果皮褐变指数的变化 | 第30-31页 |
| 2.2 果肉可溶性固形物含量的变化 | 第31页 |
| 2.3 果皮可溶态结合态POD活性与同工酶谱变化 | 第31-34页 |
| 3 小结与讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 荔枝结合态POD分离纯化体系的探索 | 第36-50页 |
| 1 材料与方法 | 第36-39页 |
| 1.1 材料 | 第36页 |
| 1.2 仪器与试剂 | 第36页 |
| 1.3 结合态POD粗酶液提取及富集 | 第36-37页 |
| 1.4 Streamline Phenyl柱层析 | 第37页 |
| 1.5 CM-52柱层析 | 第37-38页 |
| 1.6 CM-Sepharose HP柱层析 | 第38页 |
| 1.7 Phenyl Sepharose HP柱层析 | 第38页 |
| 1.8 Superdex 200柱层析 | 第38页 |
| 1.9 结合态POD活性检测 | 第38页 |
| 1.10 结合态POD的Native-PAGE | 第38页 |
| 1.11 结合态POD的SDS-PAGE | 第38-39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-47页 |
| 2.1 结合态POD粗酶液的富集 | 第39-40页 |
| 2.2 Streamline Phenyl柱层析的探索 | 第40-42页 |
| 2.2.1 洗脱方式的探索 | 第40-42页 |
| 2.2.2 去垢剂的选择 | 第42页 |
| 2.3 Streamline Phenyl→CM-52柱层析的探索 | 第42-43页 |
| 2.4 Streamline Phenyl→CM-Sepharose HP→Superdex 200柱层析的探索 | 第43-46页 |
| 2.5 Phenyl Sepharose HP柱层析的探索 | 第46-47页 |
| 3 小结与讨论 | 第47-50页 |
| 3.1 结合态POD的提取 | 第47页 |
| 3.2 Streamline Phenyl柱层析 | 第47-48页 |
| 3.3 CM-52柱层析与CM-Sepharose HP柱层析的比较 | 第48页 |
| 3.4 Phenyl Sepharose HP柱层析 | 第48页 |
| 3.5 结合态POD的分离纯化顺序 | 第48-50页 |
| 第四章 荔枝果皮结合态POD的分离纯化 | 第50-56页 |
| 1 材料与方法 | 第50-51页 |
| 1.1 材料 | 第50页 |
| 1.2 仪器与试剂 | 第50页 |
| 1.3 结合态POD的提取 | 第50页 |
| 1.4 Streamline Phenyl柱层析 | 第50页 |
| 1.5 CM-52柱层析 | 第50-51页 |
| 1.6 Phenyl Sepharose HP柱层析 | 第51页 |
| 1.7 Superdex 200柱层析 | 第51页 |
| 1.8 结合态POD活性检测 | 第51页 |
| 1.9 结合态POD的Native-PAGE | 第51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-55页 |
| 2.1 Streamline Phenyl柱层析 | 第51页 |
| 2.2 CM-52柱层析 | 第51-53页 |
| 2.3 Phenyl Sepharose柱层析 | 第53-54页 |
| 2.4 Superdex 200柱层析 | 第54-55页 |
| 3 小结与讨论 | 第55-56页 |
| 第五章 结合态POD酶学性质 | 第56-65页 |
| 1 材料与方法 | 第56-58页 |
| 1.1 材料 | 第56页 |
| 1.2 仪器与试剂 | 第56页 |
| 1.3 pH对结合态POD活性影响的测定 | 第56页 |
| 1.4 温度对结合态POD活性影响的测定 | 第56页 |
| 1.5 结合态POD对底物特异性的测定 | 第56-57页 |
| 1.6 结合态POD对底物Km值的测定 | 第57-58页 |
| 1.7 抑制剂及金属离子对结合态POD活性影响的测定 | 第58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-62页 |
| 2.1 pH对结合态POD活性的影响 | 第58页 |
| 2.2 温度对结合态POD活性的影响 | 第58-59页 |
| 2.3 结合态POD对底物的特异性 | 第59-60页 |
| 2.4 结合态POD对底物的Km值 | 第60-61页 |
| 2.5 抑制剂及金属离子对结合态POD活性的影响 | 第61-62页 |
| 3 小结与讨论 | 第62-65页 |
| 第六章 总结与展望 | 第65-67页 |
| 1 总结 | 第65页 |
| 2 展望 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
