| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-15页 |
| 1 前言 | 第15-37页 |
| ·副溶血弧菌研究进展 | 第15-27页 |
| ·VP的生物学性状 | 第15-16页 |
| ·VP的血清分型 | 第16页 |
| ·VP的基因分型 | 第16-19页 |
| ·VP的致病因子 | 第19-27页 |
| ·结语 | 第27页 |
| ·基因打靶技术 | 第27-35页 |
| ·基因打靶的原理 | 第28页 |
| ·基因打靶的策略 | 第28-29页 |
| ·基因打靶的步骤 | 第29-31页 |
| ·影响基因打靶效率的因素 | 第31-33页 |
| ·基因打靶技术存在的问题 | 第33页 |
| ·基因打靶技术的应用前景 | 第33-34页 |
| ·结语 | 第34-35页 |
| ·本论文研究的目的和意义 | 第35-36页 |
| ·论文的技术路线 | 第36-37页 |
| 2 副溶血弧菌tdh、trh和tlh的克隆、表达及其溶血活性研究 | 第37-57页 |
| ·前言 | 第37页 |
| ·实验材料 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·菌株与质粒 | 第37页 |
| ·实验动物 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-48页 |
| ·tdh、trh和tlh基因的克隆 | 第37-40页 |
| ·原核表达载体的构建及鉴定 | 第40-44页 |
| ·tdh、trh和tlh在大肠杆菌中的表达 | 第44-45页 |
| ·重组tdh、trh和tlh的纯化 | 第45-46页 |
| ·多克隆抗体及VP抗体的制备 | 第46-47页 |
| ·重组蛋白的Western blotting鉴定 | 第47-48页 |
| ·重组蛋白的复性 | 第48页 |
| ·溶血价的测定 | 第48页 |
| ·溶血实验 | 第48页 |
| ·结果 | 第48-55页 |
| ·tdh、trh和tlh基因的克隆 | 第49-51页 |
| ·原核表达载体的构建及鉴定 | 第51页 |
| ·重组蛋白在大肠杆菌中的表达和纯化 | 第51-54页 |
| ·重组蛋白的Western blotting鉴定 | 第54页 |
| ·溶血活性检测 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| 3 副溶血弧菌tdh、trh和tlh基因敲除对其溶血活性的影响 | 第57-91页 |
| ·前言 | 第57页 |
| ·实验材料 | 第57-59页 |
| ·菌株与质粒 | 第57页 |
| ·主要试剂 | 第57-58页 |
| ·主要仪器和设备 | 第58-59页 |
| ·实验方法 | 第59-73页 |
| ·载体pMD18-T-neo的构建 | 第59-62页 |
| ·tdh基因的敲除 | 第62-67页 |
| ·trh基因的敲除 | 第67-70页 |
| ·tlh基因的敲除 | 第70-73页 |
| ·实验结果 | 第73-88页 |
| ·载体pMD18-T-neo的构建 | 第73-74页 |
| ·tdh基因的敲除 | 第74-79页 |
| ·trh基因的敲除 | 第79-83页 |
| ·tlh基因的敲除 | 第83-88页 |
| ·讨论 | 第88-91页 |
| 结论 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-100页 |
| 附录 | 第100-109页 |
| 致谢 | 第109-110页 |
| 作者简介 | 第110页 |