| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 引言 | 第10-17页 |
| 1.1 水稻WRKY转录因子的研究进展 | 第10-13页 |
| 1.1.1 WRKY结构特征和分类 | 第10页 |
| 1.1.2 水稻WRKY的生物学功能 | 第10-12页 |
| 1.1.2.1 生物胁迫中的作用 | 第10-12页 |
| 1.1.2.2 非生物胁迫中的作用 | 第12页 |
| 1.1.2.3 植物正常生长中的作用 | 第12页 |
| 1.1.3 WRKY的调控机制 | 第12-13页 |
| 1.2 抗白叶枯病基因Xa21 的研究进展 | 第13-15页 |
| 1.2.1 Xa21 基因的生化特性 | 第14页 |
| 1.2.2 Xa21 介导的抗病途径 | 第14-15页 |
| 1.3 蛋白质与核酸相互作用的分析 | 第15-16页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-25页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-18页 |
| 2.1.1 水稻材料 | 第17页 |
| 2.1.2 水稻白叶枯病菌 | 第17页 |
| 2.1.3 克隆表达的质粒和菌株 | 第17页 |
| 2.1.4 试剂用品 | 第17页 |
| 2.1.5 仪器设备 | 第17-18页 |
| 2.2 水稻材料的种植与取材 | 第18-19页 |
| 2.2.1 水稻材料的种植 | 第18页 |
| 2.2.2 水稻白叶枯病菌的培养 | 第18页 |
| 2.2.3 接菌及取材 | 第18-19页 |
| 2.3 抗体的制备 | 第19页 |
| 2.4 Western blotting | 第19-20页 |
| 2.4.1 水稻蛋白质的提取 | 第19页 |
| 2.4.2 Western blotting检测 | 第19-20页 |
| 2.5 表达载体的构建 | 第20-21页 |
| 2.5.1 引物设计及PCR扩增 | 第20页 |
| 2.5.2 PCR扩增产物的纯化 | 第20页 |
| 2.5.3 PCR产物和载体的双酶切 | 第20页 |
| 2.5.4 构建重组载体 | 第20-21页 |
| 2.5.5 制备感受态细胞 | 第21页 |
| 2.5.6 质粒DNA的提取及酶切鉴定 | 第21页 |
| 2.6 融合蛋白质的体外表达和纯化 | 第21-22页 |
| 2.6.1 融合蛋白质的体外表达 | 第21-22页 |
| 2.6.2 包涵体形式蛋白质的纯化 | 第22页 |
| 2.7 DNA探针的合成 | 第22页 |
| 2.8 微量热泳动技术 | 第22-23页 |
| 2.9 转录数据分析 | 第23页 |
| 2.10 RNAi载体的构建 | 第23-25页 |
| 2.10.1 干扰片段的选择 | 第23页 |
| 2.10.2 引物设计及片段扩增 | 第23-24页 |
| 2.10.3 RNAi中间载体的构建 | 第24页 |
| 2.10.4 RNAi终载体的构建 | 第24-25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-38页 |
| 3.1 水稻WRKY68 基因 | 第25页 |
| 3.2 水稻与白叶枯病菌的互作反应 | 第25-26页 |
| 3.3 WRKY68 在XA21 介导的水稻抗白叶枯病过程中的表达 | 第26-27页 |
| 3.4 WRKY68 融合蛋白质的体外表达 | 第27-28页 |
| 3.5 WRKY68 蛋白质与病程相关基因W-box的结合特性分析 | 第28-29页 |
| 3.6 WRKY68 蛋白质在水稻叶片生长过程中的表达 | 第29-30页 |
| 3.7 WRKY68 基因的转录分析 | 第30-31页 |
| 3.8 WRKY68 基因RNAi载体的构建 | 第31-32页 |
| 3.9 转基因植株的验证 | 第32-38页 |
| 3.9.1 筛选标记基因HPT抗体的制备 | 第33-34页 |
| 3.9.2 转基因水稻叶片中HPT蛋白质含量分析 | 第34-35页 |
| 3.9.3 转基因水稻叶片中HPT蛋白质表达谱 | 第35-36页 |
| 3.9.4 转基因水稻中HPT蛋白质在不同时期叶片和根部表达丰度的比较 | 第36-37页 |
| 3.9.5 转基因稻米中HPT蛋白质的检测 | 第37-38页 |
| 4 讨论 | 第38-41页 |
| 4.1 WRKY与W-box结合的调控作用 | 第38页 |
| 4.2 WRKY转录因子在水稻抗病过程中的作用 | 第38-39页 |
| 4.3 WRKY转录因子在植物生长发育过程中的作用 | 第39页 |
| 4.4 MST分析蛋白质与核酸间的相互作用 | 第39-41页 |
| 5 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-49页 |
| 附录 | 第49-62页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第62-63页 |
| 作者简历 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
