| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-27页 |
| 1.1 柑橘粉虱发生及防治 | 第11-17页 |
| 1.1.1 柑橘粉虱发生规律及危害 | 第11-12页 |
| 1.1.2 柑橘粉虱的防治 | 第12-17页 |
| 1.2 昆虫病原真菌分子研究及改造综述 | 第17-20页 |
| 1.3 昆虫免疫机制研究进展 | 第20-23页 |
| 1.3.1 昆虫体壁 | 第20-21页 |
| 1.3.2 细胞免疫 | 第21页 |
| 1.3.3 体液免疫 | 第21-23页 |
| 1.4 RNA干扰(RNAINTERFERE,RNAI)技术及其应用研究进展 | 第23-27页 |
| 1.4.1 RNAi的发现 | 第23页 |
| 1.4.2 RNAi作用机理 | 第23-24页 |
| 1.4.3 RNAi载体介绍 | 第24-27页 |
| 第二章 引言 | 第27-29页 |
| 第三章 丝状真菌RNAi载体的改造与构建 | 第29-43页 |
| 3.1 材料与方法 | 第29-37页 |
| 3.1.1 载体框架 | 第29-30页 |
| 3.1.2 常用试剂及仪器 | 第30页 |
| 3.1.3 常用分子生物学软件 | 第30页 |
| 3.1.4 载体改造方法 | 第30-37页 |
| 3.2 结果与分析 | 第37-41页 |
| 3.2.1 PtrpC+Intron质粒的构建 | 第37-38页 |
| 3.2.2 PtrpC+Intron+TtrpC质粒的构建 | 第38-39页 |
| 3.2.3 hph+PtrpC+Intron+TtrpC质粒的构建 | 第39-40页 |
| 3.2.4 丝状真菌RNAi载体的改造的最终形式 | 第40-41页 |
| 3.3 讨论 | 第41-43页 |
| 第四章 柑橘粉虱免疫相关基因克隆及其RNAi载体的构建 | 第43-55页 |
| 4.1 材料与方法 | 第43-49页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第43-44页 |
| 4.1.2 粉虱免疫相关基因的克隆 | 第44-48页 |
| 4.1.3 基于粉虱免疫相关基因RNAi载体的构建 | 第48-49页 |
| 4.2 结果与分析 | 第49-53页 |
| 4.2.1 柑橘粉虱总RNA的提取 | 第49页 |
| 4.2.2 PPO/PPO-AF/PPO+PPO-AF/LZM正反结构的克隆 | 第49-50页 |
| 4.2.3 PPO/PPO-AF/PPO+PPO-AF/LZM正向结构的连接 | 第50页 |
| 4.2.4 PPO/PPO-AF/PPO+PPO-AF/LZM反向结构的连接 | 第50-53页 |
| 4.3 讨论 | 第53-55页 |
| 第五章 农杆菌介导RNAi载体转化渐狭蜡蚧菌 | 第55-67页 |
| 5.1 材料与方法 | 第55-61页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第55-58页 |
| 5.1.2 实验方法 | 第58-61页 |
| 5.2 结果与分析 | 第61-65页 |
| 5.2.1 农杆菌介导转化渐狭蜡蚧菌 | 第61-63页 |
| 5.2.2 渐狭蜡蚧菌阳性假设子的鉴定 | 第63-65页 |
| 5.3 讨论 | 第65-67页 |
| 第六章 转基因渐狭蜡蚧菌后期评价 | 第67-81页 |
| 6.1 材料与方法 | 第67-71页 |
| 6.1.1 实验材料 | 第67-68页 |
| 6.1.2 实验方法 | 第68-71页 |
| 6.2 结果与分析 | 第71-78页 |
| 6.2.1 转基因蜡蚧菌的单位产孢量比较 | 第71-72页 |
| 6.2.2 转基因蜡蚧菌的生长速率比较 | 第72-73页 |
| 6.2.3 转基因蜡蚧菌dsRNA的检测 | 第73页 |
| 6.2.4 转基因蜡蚧菌遗传稳定性检测 | 第73-74页 |
| 6.2.5 转基因蜡蚧菌对柑橘粉虱靶标基因的qRT-PCR分析 | 第74-78页 |
| 6.3 讨论 | 第78-81页 |
| 第七章 结论 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-95页 |
| 附录 | 第95-103页 |
| 致谢 | 第103-105页 |
| 读研期间取得成果及参加课题 | 第105页 |
