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HPV16E6基因过表达载体构建及对Me180细胞侵袭与迁移的影响

摘要第4-7页
Abstract第7-10页
符号说明第11-14页
第1章 引言第14-16页
第2章 材料与方法第16-34页
    2.1 实验材料第16-18页
        2.1.1 细胞来源第16页
        2.1.2 实验试剂第16-17页
        2.1.3 仪器和设备第17-18页
        2.1.4 主要试剂的配制第18页
    2.2 实验方法第18-34页
        2.2.1 HPV16E6基因过表达腺病毒载体的构建第18-22页
        2.2.2 转染目的细胞第22-23页
        2.2.3 Western blot实验检测HPV16E6蛋白的表达第23-26页
        2.2.4 Transwell细胞迁移实验第26页
        2.2.5 Transwell测侵袭实验步骤第26-27页
        2.2.6 Real-time qPCR实验检测三组细胞中E-cadherin mRNA表达第27-29页
        2.2.7 Western blot检测三组细胞中E-cadherin蛋白的表达第29页
        2.2.8 甲基化特异性聚合酶链反应第29-32页
        2.2.9 统计学方法第32-34页
第3章 结果第34-46页
    3.1 目的基因与载体双酶切结果第34页
    3.2 酶切PCR的鉴定结果第34-35页
    3.3 pHBAd-MCMV-GFP-HPV16E6重组腺病毒质粒测序结果第35-36页
    3.4 腺病毒滴度测定结果第36页
    3.5 腺病毒转染目的细胞Me180结果第36-38页
    3.6 Western-Blot检测HPV16E6蛋白结果第38-39页
    3.7 Transwell迁移实验结果第39-41页
    3.8 Transwell侵袭实验结果第41-42页
    3.9 荧光定量PCR检测三组细胞E-cadherin mRNA的表达水平第42-43页
    3.10 Western-Blot检测E-cadherin蛋白在三组细胞中的表达第43-45页
    3.11 甲基化特异性PCR结果第45-46页
第4章 讨论第46-50页
    4.1 HPV16E6与宫颈癌侵袭与转移相关性第46-47页
    4.2 HPV16E6调控E-cadherin参与EMT分子机制研究第47-48页
    4.3 表观遗传学角度,HPV16E6参与宫颈癌侵袭与转移的机制第48-50页
第5章 结论第50-52页
参考文献第52-56页
综述:人乳头瘤病毒16E6癌蛋白与宫颈癌发生的分子第56-64页
    参考文献第60-64页
攻读学位期间主要研究成果第64-66页
致谢第66页

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