摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
符号说明 | 第11-14页 |
第1章 引言 | 第14-16页 |
第2章 材料与方法 | 第16-34页 |
2.1 实验材料 | 第16-18页 |
2.1.1 细胞来源 | 第16页 |
2.1.2 实验试剂 | 第16-17页 |
2.1.3 仪器和设备 | 第17-18页 |
2.1.4 主要试剂的配制 | 第18页 |
2.2 实验方法 | 第18-34页 |
2.2.1 HPV16E6基因过表达腺病毒载体的构建 | 第18-22页 |
2.2.2 转染目的细胞 | 第22-23页 |
2.2.3 Western blot实验检测HPV16E6蛋白的表达 | 第23-26页 |
2.2.4 Transwell细胞迁移实验 | 第26页 |
2.2.5 Transwell测侵袭实验步骤 | 第26-27页 |
2.2.6 Real-time qPCR实验检测三组细胞中E-cadherin mRNA表达 | 第27-29页 |
2.2.7 Western blot检测三组细胞中E-cadherin蛋白的表达 | 第29页 |
2.2.8 甲基化特异性聚合酶链反应 | 第29-32页 |
2.2.9 统计学方法 | 第32-34页 |
第3章 结果 | 第34-46页 |
3.1 目的基因与载体双酶切结果 | 第34页 |
3.2 酶切PCR的鉴定结果 | 第34-35页 |
3.3 pHBAd-MCMV-GFP-HPV16E6重组腺病毒质粒测序结果 | 第35-36页 |
3.4 腺病毒滴度测定结果 | 第36页 |
3.5 腺病毒转染目的细胞Me180结果 | 第36-38页 |
3.6 Western-Blot检测HPV16E6蛋白结果 | 第38-39页 |
3.7 Transwell迁移实验结果 | 第39-41页 |
3.8 Transwell侵袭实验结果 | 第41-42页 |
3.9 荧光定量PCR检测三组细胞E-cadherin mRNA的表达水平 | 第42-43页 |
3.10 Western-Blot检测E-cadherin蛋白在三组细胞中的表达 | 第43-45页 |
3.11 甲基化特异性PCR结果 | 第45-46页 |
第4章 讨论 | 第46-50页 |
4.1 HPV16E6与宫颈癌侵袭与转移相关性 | 第46-47页 |
4.2 HPV16E6调控E-cadherin参与EMT分子机制研究 | 第47-48页 |
4.3 表观遗传学角度,HPV16E6参与宫颈癌侵袭与转移的机制 | 第48-50页 |
第5章 结论 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-56页 |
综述:人乳头瘤病毒16E6癌蛋白与宫颈癌发生的分子 | 第56-64页 |
参考文献 | 第60-64页 |
攻读学位期间主要研究成果 | 第64-66页 |
致谢 | 第66页 |