摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
第一章 综述 | 第11-19页 |
第一节 紫杉醇和DPPT(去氧鬼臼毒素)两种药物与微管的关系 | 第11-14页 |
1.1 紫杉醇与微管组装的关系 | 第11-12页 |
1.2 DPPT(去氧鬼臼毒素)与微管组装的关系 | 第12-14页 |
第二节 Stathmin1基因及其功能 | 第14-17页 |
2.1 Stathmin1基因 | 第14页 |
2.2 Stathmin1蛋白 | 第14页 |
2.3 Stathmin1蛋白与细胞周期 | 第14-15页 |
2.4 Stathmin1蛋白与肿瘤 | 第15页 |
2.5 Stathmin1蛋白与肿瘤生物治疗 | 第15-16页 |
2.6 Stathmin1蛋白在肿瘤生物治疗中的研究现状 | 第16-17页 |
第三节 RNA干扰技术的研究进展 | 第17-18页 |
第四节 Stathmin1 shRNA干扰和药物联合处理效果的研究 | 第18-19页 |
第二章 DPPT(去氧鬼臼毒素)药物对C2C12细胞Stathmin1表达水平的影响 | 第19-38页 |
2.1 前言 | 第19页 |
2.2 实验材料 | 第19-21页 |
2.2.1 主要仪器 | 第19-20页 |
2.2.2 主要试剂和耗材 | 第20页 |
2.2.3 主要溶剂配制 | 第20-21页 |
2.3 实验方法 | 第21-26页 |
2.3.1 两种药物处理正常小鼠成肌细胞C2C12后观察细胞形态的变化 | 第21-22页 |
2.3.2 两种药物处理正常小鼠成肌细胞C2C12后测定细胞存活率 | 第22页 |
2.3.3 两种药物处理正常小鼠成肌细胞C2C12后总蛋白提取 | 第22-23页 |
2.3.4 两种药物处理正常小鼠成肌细胞C2C12后总RNA提取 | 第23-24页 |
2.3.5 蛋白质免疫印迹(Western Blot) | 第24-25页 |
2.3.6 逆转录PCR(RT-PCR) | 第25-26页 |
2.3.7 数据处理与统计 | 第26页 |
2.4 实验结果 | 第26-35页 |
2.4.1 DPPT药物处理对正常小鼠成肌细胞C2C12形态的影响 | 第26-27页 |
2.4.2 紫杉醇药物处理对正常小鼠成肌细胞C2C12形态的影响 | 第27-28页 |
2.4.3 两种药物处理对正常小鼠成肌细胞C2C12存活率的影响 | 第28-29页 |
2.4.4 两种药物处理对正常小鼠成肌细胞C2C12 Stathminl的表达水平影响 | 第29-31页 |
2.4.5 低浓度紫杉醇(0.1×)诱导小鼠成肌细胞系C2C12分化 | 第31-33页 |
2.4.6 Stathmin1 shRNA干扰质粒通过转染小鼠成肌细胞系C2C12检测干扰效率 | 第33-35页 |
2.5 讨论 | 第35-38页 |
第三章 人Stathmin1基因干扰对人肺腺癌细胞A549迁移的影响 | 第38-56页 |
3.1 前言 | 第38页 |
3.2 实验材料 | 第38-40页 |
3.2.1 主要仪器 | 第38-39页 |
3.2.2 实验菌株、质粒和细胞 | 第39页 |
3.2.3 主要耗材和试剂 | 第39页 |
3.2.4 主要溶液配制 | 第39-40页 |
3.3 实验方法 | 第40-45页 |
3.3.1 人Stathmin1 shRNA载体的构建 | 第40-43页 |
3.3.2 人Stathmin1 shRNA干扰效率的鉴定 | 第43-44页 |
3.3.3 划痕实验检测人Stathmin1 shRNA对人肺腺癌细胞A549迁移的影响 | 第44页 |
3.3.4 数据处理与统计 | 第44-45页 |
3.4 实验结果 | 第45-53页 |
3.4.1 选取合适的RNA干扰片段并且设计shRNA的引物序列 | 第45页 |
3.4.2 人Stathmin1 shRNA载体的构建及建立 | 第45-47页 |
3.4.3 人Stathmin1 shRNA干扰质粒转染A549检测干扰效率 | 第47-49页 |
3.4.4 人Stathmin1 shRNA对人肺腺癌细胞A549迁移的影响 | 第49-51页 |
3.4.5 人Stathmin1 shRNA干扰质粒通过转染SGC7901检测干扰效率 | 第51-53页 |
3.5 讨论 | 第53-56页 |
第四章 Stathmin1基因干扰与药物联合作用对人肺腺癌细胞A549的影响 | 第56-61页 |
4.1 前言 | 第56页 |
4.2 实验材料 | 第56-57页 |
4.2.1 主要仪器 | 第56页 |
4.2.2 主要试剂和耗材 | 第56-57页 |
4.2.3 主要溶液配制 | 第57页 |
4.3 实验方法 | 第57-58页 |
4.3.1 人肺腺癌细胞A549的培养和转染 | 第57页 |
4.3.2 MTT法检测细胞的存活率 | 第57-58页 |
4.3.3 数据处理与统计 | 第58页 |
4.4 实验结果 | 第58-60页 |
4.4.1 Stathmin1干扰与药物联合作用对A549及SGC7901细胞存活率影响 | 第58-60页 |
4.5 讨论 | 第60-61页 |
全文总结 | 第61-62页 |
本研究主要结论 | 第61页 |
存在问题与后续研究打算 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-67页 |
在读期间发表的学术论文 | 第67-68页 |
致谢 | 第68页 |