摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-8页 |
中英文缩略词表 | 第8-9页 |
第一章 绪论 | 第9-18页 |
1. 胚胎的来源 | 第9-10页 |
2. 囊胚培养条件的优化 | 第10页 |
3. 分离 ICM 的方法 | 第10-11页 |
·免疫外科法 | 第10页 |
·机械法 | 第10-11页 |
·全胚胎培养法 | 第11页 |
·激光法 | 第11页 |
4. hES 培养体系 | 第11-13页 |
·含饲养层的培养体系 | 第11-12页 |
·无饲养层的培养体系 | 第12页 |
·hES 相关信号通路的研究以及优化的培养体系的开发 | 第12-13页 |
5.对细胞系的评估分类和伦理争议 | 第13-15页 |
6.人胚胎干细胞向神经诱导的进展 | 第15-16页 |
7.研究内容及意义 | 第16-18页 |
·研究内容 | 第16页 |
·研究意义 | 第16-18页 |
第二章 材料与方法 | 第18-31页 |
1. 实验材料 | 第18-22页 |
·人类胚胎及实验动物来源 | 第18页 |
·主要试剂 | 第18-19页 |
·主要仪器与耗材 | 第19-20页 |
·主要溶液的配制 | 第20-22页 |
2. 实验方法 | 第22-31页 |
·小鼠胚胎成纤维细胞的制备 | 第22-24页 |
·小儿包皮成纤维细胞的制备 | 第24页 |
·混合饲养层的制备 | 第24-25页 |
·胚胎的收集、培养及评分 | 第25-26页 |
·hESCs 系的建立 | 第26-28页 |
·HN4 全能性鉴定 | 第28-31页 |
第三章 结果 | 第31-39页 |
1. 全机械法建立人胚胎干细胞系 HN4 | 第31页 |
2. 维持 hES 细胞系 HN4 | 第31-32页 |
3. 人胚胎干细胞在不同种类饲养层上的生长情况 | 第32页 |
4. 人胚胎干细胞系 HN4 的全能性鉴定 | 第32-36页 |
·细胞免疫荧光和 RT-PCR | 第32-34页 |
·HN4 核型分析 | 第34页 |
·HN4 的分化潜能 | 第34-36页 |
5. 定向诱导 HN4 向神经分化 | 第36-39页 |
第四章 讨论 | 第39-44页 |
1.不同的分离内细胞团方法对建系的影响 | 第39-41页 |
2.优化的饲养层对 hESC 生长状态的影响 | 第41-42页 |
3. 不同传代方法对 hESCs 生长的影响 | 第42页 |
4.hES 细胞系 HN4 向神经诱导分化的意义 | 第42-44页 |
参考文献(References) | 第44-54页 |
硕士期间发表文章情况 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-57页 |