| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-21页 |
| 1 细胞凋亡 | 第10-11页 |
| 1.1 PI3K/Akt通路 | 第10页 |
| 1.2 线粒体通路 | 第10-11页 |
| 2 桦木醇及其衍生物抗肿瘤作用的研究 | 第11-18页 |
| 2.1 BT体外抗肿瘤作用 | 第11页 |
| 2.2 BT体内抗肿瘤作用 | 第11-12页 |
| 2.3 增加BT水溶性 | 第12-13页 |
| 2.4 提高BT生物活性 | 第13-18页 |
| 3 NO供体药物的研究 | 第18-19页 |
| 4 研究目的与意义 | 第19-21页 |
| 第二章 NO供体型桦木醇衍生物的合成 | 第21-35页 |
| 1 仪器与试剂 | 第21页 |
| 1.1 仪器 | 第21页 |
| 1.2 主要试剂 | 第21页 |
| 2 3,28-二-[4-(2-硝氧基-乙氧基)-1,4-丁二酰基]-氧基桦木醇的合成 | 第21-23页 |
| 2.1 合成路线 | 第22页 |
| 2.2 3,28-二-(4-羧基-丁酰基)-氧基桦木醇(1)的合成 | 第22页 |
| 2.3 3,28-二-[4-(2-溴基-乙氧基)-1,4-丁二酰基]-氧基桦木醇(2)的合成 | 第22-23页 |
| 2.4 3,28-二-[4-(2-硝氧基-乙氧基)-1,4-丁二酰基]-氧基桦木醇(3)的合成 | 第23页 |
| 3 3,28-二-[4-(4-硝氧基-丁氧基)-1,4-顺丁烯二酰]-氧基桦木醇的设计合成 | 第23-25页 |
| 3.1 合成路线 | 第24页 |
| 3.2 3,28-二-(4-羧基-丁烯酰基)-氧基桦木醇(1)的合成 | 第24页 |
| 3.3 3,28-二-[4-(4-溴-丁氧基)-1,4-顺丁烯二酰]-氧基桦木醇(2)的合成 | 第24-25页 |
| 3.4 3,28-二-[4-(4-硝氧基-丁氧基)-1,4-顺丁烯二酰]-氧基桦木醇(3)的合成 | 第25页 |
| 4 3,28-二-乙酰氧基-30-硝氧基-桦木醇的设计合成 | 第25-26页 |
| 4.1 合成路线 | 第25-26页 |
| 4.2 3,28-二乙酰氧基-桦木醇(1)的合成 | 第26页 |
| 4.3 3,28-二乙酰氧基-30-溴-桦木醇(2)的合成 | 第26页 |
| 4.4 3,28-二乙酰氧基-30-硝氧基-桦木醇(3)的合成 | 第26页 |
| 5 3,28-二-{4-(8-硝氧-2,6-二氧二环[3.3.0]辛烷-4-氧)甲酰-苯甲酰氧基｝的设计合成 | 第26-28页 |
| 5.1 合成路线 | 第27页 |
| 5.2 3,28-二-(4-氯甲酰基-苯甲酰氧基)-桦木醇(1)的合成 | 第27页 |
| 5.3 3,28-二-｛4-(8-硝氧-2,6-二氧二环[3.3.0]辛烷-4-氧)甲酰-苯甲酰氧基}(2)的合成 | 第27-28页 |
| 6 3,28-二-(2-硝氧基-乙酰氧基)-桦木醇的设计合成 | 第28-29页 |
| 6.1 合成路线 | 第28页 |
| 6.2 3,28-二-(2-溴-乙酰氧基)-桦木醇(1)的合成 | 第28-29页 |
| 6.3 3,28-二-(2-硝氧基-乙酰氧基)-桦木醇(2)的合成 | 第29页 |
| 7 3,28-二-(2-硝氧基-丙酰氧基)-桦木醇的设计合成 | 第29-30页 |
| 7.1 合成路线 | 第29页 |
| 7.2 3,28-二-(2-溴-丙酰氧基)-桦木醇(1)的合成 | 第29-30页 |
| 7.3 3,28-二-(2-硝氧基-丙酰氧基)-桦木醇(2)的合成 | 第30页 |
| 8 3,28-二-(2-硝氧基-异丁酰氧基)-桦木醇的设计合成 | 第30-31页 |
| 8.1 3,28-二-(2-硝氧基-异丁酰氧基)-桦木醇的合成路线 | 第30页 |
| 8.2 3,28-二-(2-溴-异丁酰氧基)-桦木醇(1)的合成 | 第30-31页 |
| 8.3 3,28-二-(2-硝氧基-异丁酰氧基)-桦木醇(2)的合成 | 第31页 |
| 9 讨论 | 第31-35页 |
| 9.1 合成条件探索 | 第31-32页 |
| 9.2 结构解析 | 第32-35页 |
| 第三章 桦木醇衍生物的体外NO释放测定 | 第35-39页 |
| 1 Griess方法测定体外NO释放原理 | 第35页 |
| 2 仪器与试剂 | 第35页 |
| 2.1 仪器 | 第35页 |
| 2.2 试剂、规格及产地 | 第35页 |
| 3 溶液的配制 | 第35-36页 |
| 3.1 0.1mol/L的NaOH的配制 | 第35页 |
| 3.2 L-半胱甘酸磷酸缓冲液的配制 | 第35页 |
| 3.3 Griess溶液的配制 | 第35-36页 |
| 3.4 标准储备液的配制 | 第36页 |
| 3.5 标准工作溶液的配制 | 第36页 |
| 3.6 受试品(NO供体型桦木醇衍生物)溶液的配制 | 第36页 |
| 4 标准曲线的绘制 | 第36-37页 |
| 5 桦木醇类衍生物体外NO释放量的测定 | 第37页 |
| 6 讨论 | 第37-39页 |
| 第四章 NO供体型桦木醇衍生物在肝癌细胞Huh7和乳腺癌细胞MCF-7的体外抗肿瘤活性筛选 | 第39-45页 |
| 1 实验原理 | 第39页 |
| 2 仪器、试剂及细胞株 | 第39-40页 |
| 2.1 仪器 | 第39页 |
| 2.2 试剂与细胞株 | 第39-40页 |
| 3 溶液的配制 | 第40页 |
| 4 细胞培养及处理 | 第40-41页 |
| 5 MTT实验 | 第41页 |
| 6 各NO供体型桦木醇衍生物抗肿瘤活性比较 | 第41-43页 |
| 7 讨论 | 第43-45页 |
| 第五章 3,28-二-[(2-硝氧基)-乙酰氧基]-桦醇诱导肝癌细胞Huh7凋亡活性的研究 | 第45-55页 |
| 1 仪器、试剂与细胞株 | 第45-46页 |
| 1.1 仪器 | 第45页 |
| 1.2 试剂与细胞株 | 第45-46页 |
| 2 溶液的配制 | 第46-47页 |
| 3 实验方法 | 第47-48页 |
| 3.1 细胞增殖抑制试验 | 第47页 |
| 3.2 DNA含量分析 | 第47页 |
| 3.3 Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率 | 第47页 |
| 3.4 线粒体膜电位检测 | 第47页 |
| 3.5 免疫印迹分析(Western Blotting) | 第47-48页 |
| 3.6 统计学处理 | 第48页 |
| 4 实验结果 | 第48-53页 |
| 4.1 细胞克隆形成实验 | 第48-49页 |
| 4.2 DNA含量分析 | 第49页 |
| 4.3 Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率 | 第49-50页 |
| 4.4 线粒体膜电位检测 | 第50-51页 |
| 4.5 免疫印迹分析(Western Blotting) | 第51-53页 |
| 5 讨论 | 第53-55页 |
| 第六章 结语 | 第55-56页 |
| 1 研究结果 | 第55页 |
| 2 研究特色与创新 | 第55页 |
| 3 展望 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 附录 | 第62-76页 |
| 在校期间发表论文、项目资助及奖励情况 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 附件1:统计学处理合格证明统计学审核证明 | 第78页 |
