摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
前言 | 第12-14页 |
第一章 传染性法氏囊病研究概况 | 第14-23页 |
1.1 传染性法氏囊病简介 | 第14-15页 |
1.2 病原学 | 第15-17页 |
1.2.1 IBDV的形态结构 | 第15页 |
1.2.2 IBDV基因组结构 | 第15-16页 |
1.2.3 IBDV病毒蛋白及其生物学功能 | 第16-17页 |
1.3 传染性法氏囊病的流行病学 | 第17-18页 |
1.3.1 IBD的流行病学 | 第17-18页 |
1.3.2 IBD的分子流行病学 | 第18页 |
1.4 IBDV的血清学 | 第18-19页 |
1.5 IBD的诊断 | 第19-21页 |
1.5.1 临床诊断 | 第19-20页 |
1.5.2 血清学诊断 | 第20页 |
1.5.3 分子生物学诊断 | 第20-21页 |
1.6 IBD的防控 | 第21-22页 |
1.6.1 传统疫苗 | 第21页 |
1.6.2 新型疫苗 | 第21-22页 |
1.7 本课题的主要研究内容及其目的意义 | 第22-23页 |
第二章 广西地区2014-2015年IBDV的分离鉴定及血清型分析 | 第23-33页 |
2.1 材料与方法 | 第23-27页 |
2.1.1 材料 | 第23-24页 |
2.1.1.1 病料来源 | 第23-24页 |
2.1.1.2 试剂与材料 | 第24页 |
2.1.2 方法 | 第24-27页 |
2.1.2.1 病料的处理 | 第24-26页 |
2.1.2.3 IBDV分离株在CEF细胞上的特性生长 | 第26页 |
2.1.2.4 IBDV分离株TCID_(50)的测定 | 第26页 |
2.1.2.5 IBDV分离株血清微量交叉中和试验 | 第26-27页 |
2.2 结果 | 第27-31页 |
2.2.1 病料中IBDV核酸的RT-PCR鉴定结果 | 第27-28页 |
2.2.2 病毒的分离结果及扩增目的片段 | 第28页 |
2.2.3 IBDV分离毒株在CEF细胞上的特性生长结果 | 第28-29页 |
2.2.4 IBDV分离株TCID_(50)的测定结果 | 第29页 |
2.2.5 IBDV分离毒株血清亚型鉴定结果 | 第29-31页 |
2.3 讨论与小结 | 第31-33页 |
第三章 广西地区IBDV流行代表毒株GX151120全基因组序列分析 | 第33-54页 |
3.1 试验材料 | 第33-34页 |
3.1.1 病料来源 | 第33页 |
3.1.2 试剂 | 第33-34页 |
3.2 试验方法 | 第34-40页 |
3.2.1 病毒的分离与鉴定 | 第34页 |
3.2.2 病毒的蚀斑纯化 | 第34-35页 |
3.2.3 全基因序列测定的引物设计 | 第35页 |
3.2.4 全基因序列的分段扩增 | 第35-36页 |
3.2.5 琼脂糖凝胶电泳检测扩增结果 | 第36页 |
3.2.6 胶回收PCR产物 | 第36-37页 |
3.2.7 PCR产物的克隆 | 第37-39页 |
3.2.7.1 PCR产物与载体连接 | 第37页 |
3.2.7.2 转化 | 第37-38页 |
3.2.7.3 重组克隆的筛选鉴定 | 第38页 |
3.2.7.4 重组质粒的提取 | 第38-39页 |
3.2.8 全基因序列的分析 | 第39-40页 |
3.3 试验结果 | 第40-53页 |
3.3.1 IBDV高变区vVP2的RT-PCR鉴定结果 | 第40-41页 |
3.3.2 病毒的蚀斑纯化结果 | 第41-42页 |
3.3.3 全基因序列测定分段RT-PCR扩增结果 | 第42-43页 |
3.3.4 分离株A节段和B节段序列拼接结果 | 第43-44页 |
3.3.5 全基因序列的分析 | 第44-53页 |
3.3.5.1 A节段核苷酸序列与参考毒株相似性比较分析结果 | 第44页 |
3.3.5.2 B节段核苷酸序列与参考毒株相似性比较分析结果 | 第44-45页 |
3.3.5.3 A节段系统进化树分析 | 第45-46页 |
3.3.5.4 B节段系统进化树分析 | 第46-47页 |
3.3.5.5 基于病毒蛋白的系统进化树分析 | 第47-49页 |
3.3.5.6 A节段的核苷酸突变分析 | 第49-50页 |
3.3.5.7 B节段的核苷酸突变分析 | 第50-53页 |
3.4 讨论与小结 | 第53-54页 |
第四章 生产上雏鸡IBD免疫程序的试验研究 | 第54-66页 |
4.1 材料 | 第54-55页 |
4.1.1 试验动物 | 第54页 |
4.1.2 试验疫苗 | 第54-55页 |
4.1.3 攻毒毒株 | 第55页 |
4.1.4 主要试剂 | 第55页 |
4.2 方法 | 第55-58页 |
4.2.1 试验设计 | 第55-56页 |
4.2.1.1 IBDV毒株的增殖 | 第55-56页 |
4.2.1.2 毒株的鉴定 | 第56页 |
4.2.1.3 半数致死量测定 | 第56页 |
4.2.2 动物实验 | 第56-57页 |
4.2.2.1 动物免疫 | 第56页 |
4.2.2.2 攻毒试验 | 第56-57页 |
4.2.2.3 攻毒后鸡群发病情况的观察 | 第57页 |
4.2.3 样品的采集及处理 | 第57页 |
4.2.4 血清中IBDV抗体的检测 | 第57-58页 |
4.2.5 各免疫组抵抗病毒感染能力评价结果 | 第58页 |
4.2.6 免疫器官中病毒载量的检测 | 第58页 |
4.2.7 数据的处理及分析 | 第58页 |
4.3 结果 | 第58-64页 |
4.3.1 攻毒后各免疫组临床发病情况 | 第58-59页 |
4.3.2 免疫后不同周龄各免疫组抗体应答反应测定结果 | 第59-61页 |
4.3.3 攻毒后各免疫组攻毒保护率统计结果 | 第61-62页 |
4.3.4 攻毒后各免疫组抵抗病毒感染能力评价结果 | 第62-63页 |
4.3.5 攻毒后各免疫组免疫器官病毒载量的情况结果 | 第63页 |
4.3.6 攻毒后法氏囊病变指数结果 | 第63-64页 |
4.4 讨论与小结 | 第64-66页 |
第五章 结论 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第73页 |