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病毒诱导的石竹PDS基因沉默体系建立及优化

摘要第3-4页
Abstract第4页
1 引言第9-16页
    1.1 VIGS机制第9页
    1.2 影响VIGS成功的因素第9-12页
        1.2.1 病毒载体的影响第9-10页
        1.2.2 目的基因片段的影响第10-11页
        1.2.3 侵染方法的影响第11-12页
        1.2.4 侵染后植株培养条件的影响第12页
    1.3 VIGS应用于植物基因功能研究的进展第12-13页
    1.4 石竹科石竹属植物功能基因组学的研究进展第13-14页
        1.4.1 香石竹功能基因组学的研究进展第13-14页
        1.4.2 中国石竹在育种及基因功能组学中的研究进展第14页
    1.5 本研究的目的和意义第14-16页
2 材料与方法第16-21页
    2.1 植物材料第16页
    2.2 克隆PDS基因第16-19页
        2.2.1 提取石竹总RNA第16页
        2.2.2 合成cDNA第一链第16-17页
        2.2.3 克隆PDS基因保守区第17-18页
            2.2.3.1 PCR扩增目的片段第17页
            2.2.3.2 目的片段的纯化第17页
            2.2.3.3 与测序载体连接第17-18页
            2.2.3.4 转化第18页
            2.2.3.5 测序及比对第18页
        2.2.4 PDS基因3'端扩增第18-19页
    2.3 构建表达载体第19页
    2.4 重组质粒转化第19页
    2.5 侵染第19-20页
    2.6 Real-time PCR检测第20-21页
3 结果与分析第21-28页
    3.1 总RNA电泳检测第21页
    3.2 PDS基因保守区的克隆第21-22页
    3.3 PDS基因的3'端克隆第22-24页
    3.4 表达载体的构建及农杆菌导入第24-25页
    3.5 PDS基因沉默植株的表型分析及VIGS体系的优化第25-26页
    3.6 石竹叶片PDS基因沉默的Real-Time PCR检测第26-28页
4 讨论第28-29页
5 结论第29-30页
致谢第30-31页
参考文献第31-38页
作者简介第38页

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