摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第13-28页 |
1.1 研究背景及意义 | 第13-14页 |
1.2 国内外研究进展及成果 | 第14-25页 |
1.2.1 蜡酯的经济价值与生物合成途径 | 第14-16页 |
1.2.2 WS的异源表达 | 第16-20页 |
1.2.3 WS的功能研究 | 第20-22页 |
1.2.4 WS的研究现状 | 第22页 |
1.2.5 RNA干扰的应用 | 第22-24页 |
1.2.6 RNA干扰的研究现状 | 第24-25页 |
1.3 研究目标与主要研究内容 | 第25-28页 |
1.3.1 关键的科学问题与研究目标 | 第25-26页 |
1.3.2 主要研究内容 | 第26页 |
1.3.3 项目来源与经费支持 | 第26-27页 |
1.3.4 研究技术路线图 | 第27-28页 |
第二章 白蜡虫ws基因dsRNA的合成 | 第28-45页 |
2.1 试验材料 | 第28-29页 |
2.1.1 供试昆虫 | 第28页 |
2.1.2 试验试剂 | 第28-29页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第29页 |
2.2 试验方法 | 第29-38页 |
2.2.1 WS编码区的克隆 | 第29-34页 |
2.2.2 WS编码区T7转录模板的制备 | 第34页 |
2.2.3 GFP对照T7转录模板的制备 | 第34-36页 |
2.2.4 dsRNA的体外合成 | 第36页 |
2.2.5 处理白蜡虫雌成虫 | 第36-37页 |
2.2.6 dsRNA处理后ws基因的mRNA表达量检测 | 第37页 |
2.2.7 数据分析 | 第37-38页 |
2.3 试验结果 | 第38-43页 |
2.3.1 WS编码区的克隆结果 | 第38页 |
2.3.2 含T7序列的WS转录模板的获得 | 第38-39页 |
2.3.3 含T7序列的GFP转录模板的获得 | 第39-40页 |
2.3.4 dsRNA转录结果检测 | 第40-41页 |
2.3.5 实时荧光定量PCR结果分析 | 第41-43页 |
2.4 讨论 | 第43-44页 |
2.5 小结 | 第44-45页 |
第三章 白蜡虫WS的真核表达 | 第45-65页 |
3.1 试验材料 | 第45-47页 |
3.1.1 供试昆虫 | 第45-46页 |
3.1.2 试验试剂 | 第46页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第46-47页 |
3.2 研究方法 | 第47-57页 |
3.2.1 白蜡虫WS编码区的获得 | 第48-49页 |
3.2.2 WS真核表达载体构建 | 第49-51页 |
3.2.3 重组病毒杆粒的获得及鉴定 | 第51-53页 |
3.2.4 WS在Sf9细胞中的表达 | 第53-55页 |
3.2.5 免疫荧光标记 | 第55页 |
3.2.6 Western blot验证 | 第55-57页 |
3.3 结果与分析 | 第57-63页 |
3.3.1 WS表达载体构建 | 第57-60页 |
3.3.2 WS在Sf9细胞中的表达 | 第60-61页 |
3.3.3 免疫荧光标记 | 第61-62页 |
3.3.4 Western blot验证 | 第62-63页 |
3.4 讨论 | 第63-64页 |
3.5 小结 | 第64-65页 |
第四章 总讨论与总结 | 第65-67页 |
4.1 总讨论 | 第65-66页 |
4.2 全文总结 | 第66页 |
4.3 特色与创新 | 第66-67页 |
附录 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-73页 |
在读期间的学术研究 | 第73-74页 |
致谢 | 第74页 |