| 中文摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第13-28页 |
| 1.1 三种植物病毒的简介 | 第14-24页 |
| 1.1.1 番茄褪绿病毒 | 第14-18页 |
| 1.1.1.1 番茄褪绿病毒的分类、基因组及粒子特征 | 第14-15页 |
| 1.1.1.2 番茄褪绿病毒的传播媒介及方式 | 第15页 |
| 1.1.1.3 番茄褪绿病毒病发生情况及田间寄主范围 | 第15-16页 |
| 1.1.1.4 番茄褪绿病毒的危害特点 | 第16页 |
| 1.1.1.5 番茄褪绿病毒的检测技术 | 第16-17页 |
| 1.1.1.6 番茄褪绿病毒病的防治措施 | 第17-18页 |
| 1.1.2 李属坏死环斑病毒 | 第18-23页 |
| 1.1.2.1 李属坏死环斑病毒的基因组和粒子特性 | 第18-19页 |
| 1.1.2.2 李属坏死环斑病毒的传播及发生规律 | 第19-20页 |
| 1.1.2.3 李属坏死环斑病毒的危害特点 | 第20页 |
| 1.1.2.4 李属坏死环斑病毒发生情况及田间寄主范围 | 第20页 |
| 1.1.2.5 李属坏死环斑病毒的检测技术 | 第20-22页 |
| 1.1.2.6 李属坏死环斑病毒的防治措施 | 第22-23页 |
| 1.1.3 李树皮坏死茎纹孔伴随病毒 | 第23-24页 |
| 1.1.3.1 李树皮坏死茎纹孔伴随病毒的基因组特征 | 第23页 |
| 1.1.3.2 李树皮坏死茎纹孔伴随病毒的研究进展 | 第23页 |
| 1.1.3.3 李树皮坏死茎纹孔伴随病毒的寄主范围 | 第23-24页 |
| 1.1.3.4 李树皮坏死茎纹孔伴随病毒的传播及危害特点 | 第24页 |
| 1.1.3.5 李树皮坏死茎纹孔伴随病毒的防治措施 | 第24页 |
| 1.2 负染色技术的研究概括 | 第24-25页 |
| 1.2.1 负染色技术的原理 | 第24页 |
| 1.2.2 负染色液的选择 | 第24-25页 |
| 1.2.3 染色方法 | 第25页 |
| 1.2.3.1 悬滴法 | 第25页 |
| 1.2.3.2 喷雾法 | 第25页 |
| 1.2.3.3 漂浮法 | 第25页 |
| 1.2.4 负染色的应用 | 第25页 |
| 1.3 多重PCR | 第25-26页 |
| 1.3.1 多重PCR的原理 | 第25-26页 |
| 1.3.2 多重PCR技术在植物生物学研究中的应用 | 第26页 |
| 1.3.3 多重PCR技术的最新进展 | 第26页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第26-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-43页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第28-30页 |
| 2.1.1 供试材料的采集 | 第28页 |
| 2.1.2 菌株、载体及实验试剂 | 第28-29页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第29页 |
| 2.1.4 实验所需试剂及配制 | 第29-30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-43页 |
| 2.2.1 番茄褪绿病毒RT-PCR检测方法的优化 | 第30-33页 |
| 2.2.1.1 样品RNA提取 | 第30-31页 |
| 2.2.1.2 引物的设计与合成 | 第31页 |
| 2.2.1.3 反转录cDNA的合成 | 第31-32页 |
| 2.2.1.4 ToCV RT-PCR检测方法的优化 | 第32-33页 |
| 2.2.1.5 双重PCR体系设计 | 第33页 |
| 2.2.2 番茄褪绿病毒河南分离物的检测及鉴定 | 第33-39页 |
| 2.2.2.1 样品RNA提取 | 第33页 |
| 2.2.2.2 引物的设计与合成 | 第33-34页 |
| 2.2.2.3 反转录cDNA的合成 | 第34页 |
| 2.2.2.4 双重PCR扩增 | 第34页 |
| 2.2.2.5 PCR产物的克隆及测序 | 第34-38页 |
| 2.2.2.6 序列分析 | 第38页 |
| 2.2.2.7 ToCV病毒粒子的提取 | 第38-39页 |
| 2.2.2.8 ToCV病毒粒子的电镜观察 | 第39页 |
| 2.2.3 李属坏死环斑病毒检测与鉴定 | 第39-41页 |
| 2.2.3.1 样品RNA提取 | 第39页 |
| 2.2.3.2 引物设计与合成 | 第39页 |
| 2.2.3.3 反转录cDNA的合成 | 第39-40页 |
| 2.2.3.4 RT-PCR扩增 | 第40页 |
| 2.2.3.5 PCR产物的克隆及测序 | 第40-41页 |
| 2.2.3.6 序列分析 | 第41页 |
| 2.2.4 李树皮坏死茎纹孔伴随病毒病毒检测与鉴定 | 第41-43页 |
| 2.2.4.1 样品RNA提取 | 第41页 |
| 2.2.4.2 引物设计与合成 | 第41页 |
| 2.2.4.3 反转录cDNA的合成 | 第41-42页 |
| 2.2.4.5 PCR产物克隆及测序 | 第42页 |
| 2.2.4.6 序列分析 | 第42-43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-53页 |
| 3.1 番茄褪绿病毒RT-PCR检测方法的优化 | 第43-46页 |
| 3.1.1 番茄褪绿病毒RT-PCR引物及扩增条件的比较 | 第43-44页 |
| 3.1.2 引物特异性比较 | 第44-45页 |
| 3.1.3 双重PCR扩增体系鉴定 | 第45-46页 |
| 3.2 河南番茄褪绿病毒鉴定与分析 | 第46-49页 |
| 3.2.1 河南ToCV RT-PCR检测 | 第46页 |
| 3.2.2 ToCV序列分析 | 第46-48页 |
| 3.2.3 ToCV病毒粒子提纯 | 第48-49页 |
| 3.3 李树坏死环斑病毒的检测与鉴定 | 第49-50页 |
| 3.3.1 PNRSV外壳蛋白的扩增 | 第49页 |
| 3.3.2 PNRSV序列分析 | 第49-50页 |
| 3.4 李树皮坏死茎纹孔伴随病毒的检测与鉴定 | 第50-53页 |
| 3.4.1 PBNSPaV热激蛋白部分序列的扩增 | 第50-51页 |
| 3.4.2 PBNSPaV序列分析 | 第51-53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| 4.1 番茄褪绿病毒PCR检测方法的优化 | 第53页 |
| 4.2 番茄褪绿病毒河南分离物的检测与鉴定 | 第53-54页 |
| 4.3 侵染肥城桃的PNRSV和PBNSPaV的检测与鉴定 | 第54-55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 | 第64页 |
