| 致谢 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩写 | 第11-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-25页 |
| 1.1 桑叶的概述 | 第15页 |
| 1.2 Diels-Alderase的概述 | 第15-18页 |
| 1.2.1 Diels-Alder反应 | 第15-16页 |
| 1.2.2 Diels-Alder型加合物 | 第16-17页 |
| 1.2.3 Diels-Alderase及其研究现状 | 第17-18页 |
| 1.3 蛋白的提取和纯化技术 | 第18-23页 |
| 1.3.1 蛋白的提取 | 第18-20页 |
| 1.3.2 蛋白的纯化 | 第20-23页 |
| 1.3.2.1 沉淀法 | 第20-21页 |
| 1.3.2.2 色谱层析 | 第21-23页 |
| 1.4 立项背景及意义 | 第23-25页 |
| 第二章 桑叶粗酶性质研究及提取工艺优化 | 第25-42页 |
| 2.1 引言 | 第25页 |
| 2.2 实验材料、试剂及设备 | 第25-29页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第25-26页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第26页 |
| 2.2.3 不同pH缓冲液的配制 | 第26-27页 |
| 2.2.4 仪器设备 | 第27-29页 |
| 2.2.4.1 普通仪器 | 第27-28页 |
| 2.2.4.2 特制仪器 | 第28-29页 |
| 2.3 桑叶粗酶中Diels-Alderase的性质研究 | 第29-32页 |
| 2.3.1 桑叶可溶性蛋白的提取 | 第29页 |
| 2.3.2 桑叶粗酶提取液中可溶性蛋白含量测定 | 第29页 |
| 2.3.3 桑叶粗酶中Diels-Alderase活性检测 | 第29-31页 |
| 2.3.4 温度对桑叶粗酶中Diels-Alderase活性的影响 | 第31页 |
| 2.3.5 pH对桑叶粗酶中Diels-Alderase活性的影响 | 第31-32页 |
| 2.4 桑叶粗酶提取工艺优化 | 第32-33页 |
| 2.4.1 提取工艺的单因素试验 | 第32-33页 |
| 2.4.1.1 液料比对桑叶可溶性蛋白提取效率的影响 | 第32页 |
| 2.4.1.2 浸提时间对桑叶可溶性蛋白提取效率的影响 | 第32页 |
| 2.4.1.3 浸提温度对桑叶可溶性蛋白提取效率的影响 | 第32页 |
| 2.4.1.4 浸提pH对桑叶可溶性蛋白提取效率的影响 | 第32-33页 |
| 2.4.2 提取工艺正交优化实验 | 第33页 |
| 2.5 结果与讨论 | 第33-41页 |
| 2.5.1 桑叶粗酶中Diels-Alderase的性质研究 | 第33-34页 |
| 2.5.1.1 温度对桑叶粗酶中Diels-Alderase活性的影响 | 第33-34页 |
| 2.5.1.2 pH对桑叶粗酶中Diels-Alderase活性的影响 | 第34页 |
| 2.5.2 桑叶粗酶提取工艺优化 | 第34-41页 |
| 2.5.2.1 液料比对桑叶可溶性蛋白提取效率的影响 | 第34-35页 |
| 2.5.2.2 浸提时间对桑叶可溶性蛋白提取效率的影响 | 第35-36页 |
| 2.5.2.3 浸提温度对桑叶可溶性蛋白提取效率的影响 | 第36-37页 |
| 2.5.2.4 浸提pH对桑叶可溶性蛋白提取效率的影响 | 第37页 |
| 2.5.2.5 提取工艺正交优化结果 | 第37-41页 |
| 2.6 本章小结 | 第41-42页 |
| 第三章 桑叶中Diels-Alderase的分离与初步纯化 | 第42-63页 |
| 3.1 引言 | 第42页 |
| 3.2 实验材料、试剂与设备 | 第42-46页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第42-43页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第43页 |
| 3.2.3 不同pH缓冲液的配制 | 第43-45页 |
| 3.2.4 仪器设备 | 第45-46页 |
| 3.3 蛋白纯化条件摸索 | 第46-58页 |
| 3.3.1 硫酸铵分级沉淀 | 第46-47页 |
| 3.3.2 PEG沉淀 | 第47-48页 |
| 3.3.3 离子交换柱层析 | 第48-50页 |
| 3.3.3.1 阳离子交换层析pH值的选择 | 第48页 |
| 3.3.3.2 阴离子交换层析pH值的选择 | 第48-49页 |
| 3.3.3.3 洗脱缓冲液盐浓度及洗脱模式的选择 | 第49-50页 |
| 3.3.4 疏水柱层析 | 第50-51页 |
| 3.3.4.1 (NH_4)_2SO_4浓度的选择 | 第50页 |
| 3.3.4.2 洗脱缓冲液盐浓度及洗脱模式的选择 | 第50-51页 |
| 3.3.5 结果与讨论 | 第51-58页 |
| 3.3.5.1 硫酸铵沉淀 | 第51-52页 |
| 3.3.5.2 PEG沉淀 | 第52页 |
| 3.3.5.3 离子交换柱层析 | 第52-55页 |
| 3.3.5.4 疏水柱层析 | 第55-58页 |
| 3.4 蛋白纯化策略 | 第58-61页 |
| 3.4.1 蛋白纯化流程 | 第58-60页 |
| 3.4.2 结果与讨论 | 第60-61页 |
| 3.5 本章小结 | 第61-63页 |
| 第四章 总结与展望 | 第63-65页 |
| 4.1 总结 | 第63页 |
| 4.2 展望 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-72页 |
| 作者简介 | 第72页 |
