缩略词表 | 第7-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
ABSTRACT | 第11-12页 |
第1章 引言 | 第13-16页 |
第2章 miR-335在MDA-MB-231细胞株和HCC-1937细胞株中的功能研究 | 第16-31页 |
2.1 材料、试剂和仪器 | 第16-19页 |
2.1.1 选用细胞株 | 第16页 |
2.1.2 主要试剂 | 第16-18页 |
2.1.3 主要仪器 | 第18-19页 |
2.2 实验方法 | 第19-23页 |
2.2.1 MDA-MB-231细胞和HCC-1937细胞复苏 | 第19-20页 |
2.2.2 MDA-MB-231细胞和HCC-1937细胞培养及传代 | 第20页 |
2.2.3 细胞计数 | 第20页 |
2.2.4 细胞冻存 | 第20-21页 |
2.2.5 miRNA转染MDA-MB-231细胞和和HCC-1937细胞 | 第21页 |
2.2.6 细胞增殖实验 | 第21-22页 |
2.2.7 细胞平板克隆形成实验 | 第22页 |
2.2.8 细胞迁移能力实验---划痕实验 | 第22-23页 |
2.2.9 细胞侵袭能力实验---Transwell小室实验 | 第23页 |
2.2.10 统计学分析 | 第23页 |
2.3 结果 | 第23-28页 |
2.3.1 MTT结果分析 | 第23-25页 |
2.3.2 克隆形成实验结果分析 | 第25页 |
2.3.3 细胞划痕实验结果分析 | 第25-26页 |
2.3.4 Transwell小室实验结果分析 | 第26-28页 |
2.4 结论 | 第28页 |
2.5 讨论 | 第28-31页 |
第3章 miR-335的靶基因及机制研究 | 第31-52页 |
3.1 材料、试剂和仪器 | 第31-33页 |
3.1.1 细胞株及质粒 | 第31页 |
3.1.2 主要试剂 | 第31-33页 |
3.1.3 主要耗材、仪器与设备 | 第33页 |
3.2 实验方法 | 第33-41页 |
3.2.1 靶基因预测 | 第33页 |
3.2.2 双荧光素酶报告基因实验 | 第33-36页 |
3.2.3 Western Blot | 第36-40页 |
3.2.4 统计学分析 | 第40-41页 |
3.3 结果 | 第41-49页 |
3.3.1 miR-335靶基因预测 | 第41页 |
3.3.2 双荧光素酶报告基因实验检测结果 | 第41-43页 |
3.3.3 蛋白标准定量 | 第43-44页 |
3.3.4 miR-335转染三阴性乳腺癌细胞后ROCK1蛋白的变化情况 | 第44页 |
3.3.5 miR-335对ROCK1下游基因的调控 | 第44-45页 |
3.3.6 miR-335对周期蛋白的调控 | 第45-46页 |
3.3.7 miR-335对EMT相关蛋白的调控 | 第46-47页 |
3.3.8 miR-335在乳腺癌标本和细胞系中的表达 | 第47-48页 |
3.3.9 miR-335在乳腺癌中的表达情况与患者生存情况分析 | 第48页 |
3.3.10 ROCK1的生物学功能探究 | 第48-49页 |
3.4 结论 | 第49-50页 |
3.5 讨论 | 第50-52页 |
第4章 结论与展望 | 第52-54页 |
4.1 结论 | 第52页 |
4.2 展望 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-58页 |
文献综述(一) | 第58-66页 |
参考文献 | 第62-66页 |
文献综述(二) | 第66-72页 |
参考文献 | 第69-72页 |
攻读学位期间发表文章情况 | 第72-73页 |
致谢 | 第73页 |