摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
缩略词表 | 第9-10页 |
1 前言 | 第10-19页 |
1.1 SUMO化是一种重要的蛋白质翻译后修饰方式 | 第10-11页 |
1.2 SUMO特异蛋白酶的功能 | 第11-13页 |
1.3 拟南芥中SUMO特异蛋白酶的研究进展 | 第13-17页 |
1.3.1 SUMO特异蛋白酶ESD4参与开花调节、株型叶片角果等多重发育过程 | 第14页 |
1.3.2 ELS1是一个与ESD4同源关系较近但特性迥异的SUMO特异蛋白酶 | 第14-15页 |
1.3.3 SUMO特异蛋白酶OTS1和OTS2协同参与植株抗盐胁迫 | 第15-17页 |
1.4 本项目的研究意义 | 第17-19页 |
2 材料与方法 | 第19-31页 |
2.1 实验材料 | 第19-21页 |
2.1.1 植物材料 | 第19-20页 |
2.1.2 菌株及载体 | 第20-21页 |
2.1.3 酶、抗体及其他试剂 | 第21页 |
2.2 实验方法 | 第21-31页 |
2.2.1 植物材料的种植、培养和管理 | 第21-22页 |
2.2.2 突变体的获得及鉴定 | 第22页 |
2.2.3 基因克隆和载体构建 | 第22-25页 |
2.2.4 拟南芥转化及转基因植株的鉴定 | 第25-26页 |
2.2.5 拟南芥植株的生理生态学分析观察 | 第26-28页 |
2.2.6 烟草BiFC实验 | 第28页 |
2.2.7 拟南芥原生质体转化和观察 | 第28-30页 |
2.2.8 蛋白的原核表达及检测 | 第30-31页 |
3 结果与分析 | 第31-70页 |
3.1 EL5和EL6蛋白的生物学信息分析 | 第31-32页 |
3.2 EL5及EL6基因结构及突变体信息 | 第32-36页 |
3.3 EL5互作蛋白的验证及相关工作 | 第36-41页 |
3.4 EL5、EL6其他互作蛋白的筛选 | 第41-55页 |
3.4.1 能与EL6互作也能与SUMO互作的蛋白编码基因 | 第42-53页 |
3.4.2 能与SUMO互作但是不与EL6互作的基因 | 第53-55页 |
3.5 突变体中一些Maker基因或蛋白的表达特性分析 | 第55-63页 |
3.5.1 胚囊细胞特异的Marker在野生型和e15-1 e16-2突变体中的表达情况 | 第56-58页 |
3.5.2 花粉粒特异的Marker在野生型和e15-1 e16-2突变体中的表达情况 | 第58-61页 |
3.5.3 生长素指示marker DR5::GFP在野生型和突变体胚胎中的表达情况 | 第61-62页 |
3.5.4 有丝分裂相关蛋白CYCB 1在野生型和突变体配子体发生中的表达分析 | 第62-63页 |
3.6 其他工作 | 第63-70页 |
3.6.1 截短表达的EL5及原核蛋白表达情况、亚细胞定位及与SUMO1的互作 | 第63-66页 |
3.6.2 相关载体的构建 | 第66-67页 |
3.6.3 ULP1b(At4g00690)基因的的初步研究 | 第67-70页 |
4 讨论 | 第70-77页 |
4.1 SUMO特异蛋白酶EL5、EL6一起参与植株的育性形成过程 | 第70-71页 |
4.2 EL5和EL6参与雌雄配子体发育过程中生殖核的有丝分裂及细胞命运决定 | 第71-74页 |
4.3 EL5和EL6互作的底物蛋白涵盖多种生理生化过程 | 第74-77页 |
5 结论 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-86页 |
致谢 | 第86-87页 |
个人简历 | 第87页 |