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白菜花发育相关基因BcNS的克隆、表达与功能分析

致谢第1-11页
缩写词第11-14页
摘要第14-16页
Abstract第16-18页
前言第18-20页
1 文献综述第20-28页
   ·十字花科植物蜜腺研究进展第20-24页
     ·蜜腺简介第20-21页
       ·蜜腺的分类第21页
       ·蜜腺的功能和重要性第21页
     ·蜜腺的组成和结构第21-22页
     ·蜜汁的形成和分泌第22-23页
     ·蜜腺分子生物学研究第23-24页
   ·MtN3/saliva家族基因相关研究进展第24-28页
     ·MtN3/Saliva家族的发现和基本信息第24-25页
     ·与植物生长发育有关的MtN3/Saliva家族成员第25-27页
     ·其它MtN3/Saliva家族基因第27页
     ·MtN3/Saliva家族基因功能第27-28页
2 白菜花发育相关基因BcNS的克隆和序列分析第28-42页
   ·材料与方法第28-33页
     ·材料与试剂第28-29页
     ·基因组DNA提取第29-30页
     ·总RNA提取第30-31页
       ·RNA的分离第30页
       ·RNA甲醛变性琼脂糖凝胶电泳第30-31页
     ·cDNA的合成第31-32页
       ·cDNA一链的合成第31页
       ·cDNA的LD-PCR扩增第31-32页
     ·cDNA和DNA全长序列的扩增第32-33页
     ·基因序列分析第33页
   ·结果与分析第33-39页
     ·BcNS cDNA全长的获得第33-34页
     ·BcNS DNA全长的获得第34-35页
     ·BcNS核苷酸序列分析第35-36页
     ·BcNS氨基酸序列分析第36-39页
   ·讨论第39-42页
     ·BcNS是一个MtN3/saliva家族新基因第39页
     ·BcNS编码蛋白可能具有重要功能第39-40页
     ·BcNS功能的研究有助于了解MtN3/saliva家族成员的功能第40-42页
3 BcNS在白菜花器官中的表达分析第42-56页
   ·材料与方法第42-50页
     ·材料与试剂第42-46页
     ·半定量RT-PCR分析第46页
     ·实时定量RT-PCR分析第46页
     ·原位杂交分析第46-50页
       ·材料的固定、包埋和制片第46-48页
         ·固定材料第47页
         ·材料的包埋第47页
         ·材料的制片第47-48页
       ·RNA探针的地高辛标记第48-49页
       ·组织原位杂交第49-50页
   ·结果与分析第50-54页
     ·BcNS从第Ⅴ级花蕾开始表达第50页
     ·BcNS在蜜腺中高表达第50-53页
     ·原位杂交在蜜腺中检测到BcNS表达信号第53-54页
   ·讨论第54-56页
     ·BcNS在白菜花发育后期表达第54页
     ·BcNS在白菜蜜腺和雄蕊中特异表达第54-56页
4 BcNS在白菜花发育中的功能研究第56-68页
   ·材料与方法第56-61页
     ·材料与试剂第56-57页
     ·反义表达载体的构建第57-59页
       ·反义BcNS片段的分离第57-58页
       ·反义BcNS表达载体的构建第58页
       ·pBI35S-BcNS质粒直接转化农杆菌第58-59页
     ·反义BcNS表达载体对菜心的遗传转化第59-60页
       ·菜心无菌苗的培养第59页
       ·菜心的遗传转化第59-60页
     ·转基因植株的分子检测第60-61页
       ·转基因植株基因组DNA的提取第60-61页
       ·转基因植株的PCR检测第61页
     ·转基因植株的形态学观察第61页
   ·结果与分析第61-66页
     ·反义表达载体的构建及农杆菌的转化第61-64页
       ·反义片段的获得第61-62页
       ·CaMV35S组成型启动子表达载体的成功构建第62页
       ·pBI35S-BcNS质粒成功转入农杆菌第62-64页
     ·获得反义表达载体转化菜心植株第64-65页
     ·PCR检测初步证明反义表达载体成功转入菜心植株第65-66页
     ·转基因植株的形态和细胞学观察第66页
   ·讨论第66-68页
结论第68-70页
参考文献第70-76页
硕士期间发表的文章第76页

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