致谢 | 第1-11页 |
缩写词 | 第11-14页 |
摘要 | 第14-16页 |
Abstract | 第16-18页 |
前言 | 第18-20页 |
1 文献综述 | 第20-28页 |
·十字花科植物蜜腺研究进展 | 第20-24页 |
·蜜腺简介 | 第20-21页 |
·蜜腺的分类 | 第21页 |
·蜜腺的功能和重要性 | 第21页 |
·蜜腺的组成和结构 | 第21-22页 |
·蜜汁的形成和分泌 | 第22-23页 |
·蜜腺分子生物学研究 | 第23-24页 |
·MtN3/saliva家族基因相关研究进展 | 第24-28页 |
·MtN3/Saliva家族的发现和基本信息 | 第24-25页 |
·与植物生长发育有关的MtN3/Saliva家族成员 | 第25-27页 |
·其它MtN3/Saliva家族基因 | 第27页 |
·MtN3/Saliva家族基因功能 | 第27-28页 |
2 白菜花发育相关基因BcNS的克隆和序列分析 | 第28-42页 |
·材料与方法 | 第28-33页 |
·材料与试剂 | 第28-29页 |
·基因组DNA提取 | 第29-30页 |
·总RNA提取 | 第30-31页 |
·RNA的分离 | 第30页 |
·RNA甲醛变性琼脂糖凝胶电泳 | 第30-31页 |
·cDNA的合成 | 第31-32页 |
·cDNA一链的合成 | 第31页 |
·cDNA的LD-PCR扩增 | 第31-32页 |
·cDNA和DNA全长序列的扩增 | 第32-33页 |
·基因序列分析 | 第33页 |
·结果与分析 | 第33-39页 |
·BcNS cDNA全长的获得 | 第33-34页 |
·BcNS DNA全长的获得 | 第34-35页 |
·BcNS核苷酸序列分析 | 第35-36页 |
·BcNS氨基酸序列分析 | 第36-39页 |
·讨论 | 第39-42页 |
·BcNS是一个MtN3/saliva家族新基因 | 第39页 |
·BcNS编码蛋白可能具有重要功能 | 第39-40页 |
·BcNS功能的研究有助于了解MtN3/saliva家族成员的功能 | 第40-42页 |
3 BcNS在白菜花器官中的表达分析 | 第42-56页 |
·材料与方法 | 第42-50页 |
·材料与试剂 | 第42-46页 |
·半定量RT-PCR分析 | 第46页 |
·实时定量RT-PCR分析 | 第46页 |
·原位杂交分析 | 第46-50页 |
·材料的固定、包埋和制片 | 第46-48页 |
·固定材料 | 第47页 |
·材料的包埋 | 第47页 |
·材料的制片 | 第47-48页 |
·RNA探针的地高辛标记 | 第48-49页 |
·组织原位杂交 | 第49-50页 |
·结果与分析 | 第50-54页 |
·BcNS从第Ⅴ级花蕾开始表达 | 第50页 |
·BcNS在蜜腺中高表达 | 第50-53页 |
·原位杂交在蜜腺中检测到BcNS表达信号 | 第53-54页 |
·讨论 | 第54-56页 |
·BcNS在白菜花发育后期表达 | 第54页 |
·BcNS在白菜蜜腺和雄蕊中特异表达 | 第54-56页 |
4 BcNS在白菜花发育中的功能研究 | 第56-68页 |
·材料与方法 | 第56-61页 |
·材料与试剂 | 第56-57页 |
·反义表达载体的构建 | 第57-59页 |
·反义BcNS片段的分离 | 第57-58页 |
·反义BcNS表达载体的构建 | 第58页 |
·pBI35S-BcNS质粒直接转化农杆菌 | 第58-59页 |
·反义BcNS表达载体对菜心的遗传转化 | 第59-60页 |
·菜心无菌苗的培养 | 第59页 |
·菜心的遗传转化 | 第59-60页 |
·转基因植株的分子检测 | 第60-61页 |
·转基因植株基因组DNA的提取 | 第60-61页 |
·转基因植株的PCR检测 | 第61页 |
·转基因植株的形态学观察 | 第61页 |
·结果与分析 | 第61-66页 |
·反义表达载体的构建及农杆菌的转化 | 第61-64页 |
·反义片段的获得 | 第61-62页 |
·CaMV35S组成型启动子表达载体的成功构建 | 第62页 |
·pBI35S-BcNS质粒成功转入农杆菌 | 第62-64页 |
·获得反义表达载体转化菜心植株 | 第64-65页 |
·PCR检测初步证明反义表达载体成功转入菜心植株 | 第65-66页 |
·转基因植株的形态和细胞学观察 | 第66页 |
·讨论 | 第66-68页 |
结论 | 第68-70页 |
参考文献 | 第70-76页 |
硕士期间发表的文章 | 第76页 |