| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 缩略词表 | 第14-16页 |
| 1 引言 | 第16-38页 |
| 1.1 莲的研究现状 | 第16-22页 |
| 1.1.1 莲属的分类及分布 | 第16-17页 |
| 1.1.2 莲属种间关系的研究 | 第17-19页 |
| 1.1.3 莲的栽培历史、品种分类及用途 | 第19-21页 |
| 1.1.4 莲文化 | 第21-22页 |
| 1.2 决定花色的因素 | 第22-24页 |
| 1.2.1 花青素 | 第22-24页 |
| 1.2.2 类胡萝卜素 | 第24页 |
| 1.2.3 生物碱 | 第24页 |
| 1.3 花青素的合成及调控机理 | 第24-34页 |
| 1.3.1 花青素的合成途径 | 第25页 |
| 1.3.2 花青素合成的关键结构基因 | 第25-30页 |
| 1.3.3 调节花青素合成的转录因子 | 第30-34页 |
| 1.4 影响花青苷合成的外部因素 | 第34-35页 |
| 1.5 花青苷的转运 | 第35-36页 |
| 1.6. 莲花色的研究进展 | 第36页 |
| 1.7 本课题的研究内容及意义 | 第36-38页 |
| 2 材料与方法 | 第38-54页 |
| 2.1 实验材料 | 第38页 |
| 2.2 化学试剂及实验器材 | 第38-42页 |
| 2.2.1 试剂购买渠道及配制 | 第38-41页 |
| 2.2.2 主要仪器设备 | 第41-42页 |
| 2.3 花青素的提取及测定 | 第42页 |
| 2.4 DNA提取 | 第42-43页 |
| 2.5 美洲黄莲全基因组重测序 | 第43页 |
| 2.6 RNA提取及反转录 | 第43-45页 |
| 2.7 荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第45页 |
| 2.8 结构基因DFR和ANS cDNA全长在两物种中的获得 | 第45-47页 |
| 2.9 结构基因UFGT、GST和调节基因在莲基因组中的预测 | 第47页 |
| 2.10 序列比对及系统进化树分析 | 第47页 |
| 2.11 参与花青素合成途径的候选调节基因的确定 | 第47-48页 |
| 2.12 MYB5、bHLH1和TTG1在莲和美洲黄莲中的克隆 | 第48页 |
| 2.13 MYB5基因在不同居群中的克隆和分析 | 第48页 |
| 2.14 MYB5、bHLH1和TTG1蛋白之间的相互作用 | 第48-52页 |
| 2.14.1 载体的构建 | 第48-50页 |
| 2.14.2 酵母的制备 | 第50页 |
| 2.14.3 酵母转化 | 第50-51页 |
| 2.14.4 酵母杂交 | 第51-52页 |
| 2.15 NnMYB5过表达载体的构建及转基因植株的获得 | 第52-54页 |
| 2.15.1 过表达载体的构建 | 第52页 |
| 2.15.2 拟南芥植株的准备 | 第52页 |
| 2.15.3 花序侵染法转化拟南芥 | 第52-53页 |
| 2.15.4 转基因植株的筛选及PCR验证 | 第53页 |
| 2.15.5 RNA提取及RT-PCR检测NnMYB5和AtGSTF12基因的表达 | 第53-54页 |
| 3 结果与分析 | 第54-76页 |
| 3.1 莲与美洲黄莲花瓣中的花青素含量的比较 | 第54页 |
| 3.2 下游结构基因在两物种中的序列分析及比较 | 第54-59页 |
| 3.3 结构基因在两物种中的表达情况 | 第59-60页 |
| 3.4 调节基因R2R3-MYBs、bHLHs和WD40s在莲基因组中的鉴定 | 第60页 |
| 3.5 与花青素合成相关的调节基因的鉴定 | 第60-65页 |
| 3.6 调节基因MYB5、bHLHl和TTG1在两物种中的克隆及比较 | 第65-69页 |
| 3.6.1 调节基因MYB5在两物种的克隆及比较 | 第65-68页 |
| 3.6.2 调节基因bHLH1在两物种的克隆及比较 | 第68-69页 |
| 3.6.3 调节基因TTG1在两物种的克隆及比较 | 第69页 |
| 3.7 MYB5基因的居群水平研究 | 第69-70页 |
| 3.8 MYB5、bHLH1和TTG1蛋白之间的相互作用 | 第70-72页 |
| 3.9 转录因子NnMYB5的功能分析 | 第72-76页 |
| 3.9.1 转基因拟南芥植株的筛选及分子检测 | 第72页 |
| 3.9.2 RNA提取及RT-PCR检测NnMYB5基因的表达 | 第72-73页 |
| 3.9.3 显微镜观察转基因植株表型 | 第73-76页 |
| 4 讨论 | 第76-82页 |
| 4.1 莲属两物种花瓣中花青素含量的比较 | 第76-77页 |
| 4.2 莲与美洲黄莲花瓣中花青素合成途径的结构基因的表达分析 | 第77-78页 |
| 4.3 调控花青素合成的转录因子在莲属中的鉴定及分析 | 第78-82页 |
| 5 结论与展望 | 第82-84页 |
| 5.1 结论 | 第82-83页 |
| 5.2 展望 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-106页 |
| 附录A | 第106-108页 |
| 附录B | 第108-110页 |
| 附录C | 第110-114页 |
| 附录D | 第114-118页 |
| 附录E | 第118-120页 |
| 作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第120-122页 |
| 致谢 | 第122-123页 |
