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CLC-2氯离子通道在TGF-β1诱导的HconF细胞纤维化中的作用研究

中文摘要第4-9页
Abstract第9-12页
英文缩写词第18-20页
第1章 绪论第20-22页
第2章 综述第22-36页
    2.1 滤过泡瘢痕化的机制第22-28页
        2.1.1 生长因子TGF-β在瘢痕形成中的作用第22-25页
        2.1.2 成纤维细胞生物学行为特征与瘢痕化第25页
        2.1.3 抑制滤过泡瘢痕形成的抗代谢药物第25-28页
        2.1.4 结束语第28页
    2.2 氯离子通道的研究进展第28-36页
        2.2.1 CLC型氯离子通道的分子结构第29页
        2.2.2 CLC通道的组织分布第29-30页
        2.2.3 CLC通道的生物学功能第30-35页
        2.2.4 结束语第35-36页
第3章 TGF-Β1 诱导HCONF细胞纤维化第36-54页
    3.1 实验材料第36-39页
        3.1.1 细胞株第36-37页
        3.1.2 主要试剂第37-38页
        3.1.3 主要仪器第38-39页
    3.2 实验方法第39-48页
        3.2.1 主要试剂的配制第39页
        3.2.2 细胞培养第39-40页
        3.2.3 用CCK-8 法检测HconF细胞增殖第40页
        3.2.4 流式细胞仪检测HconF细胞周期分布情况第40-41页
        3.2.5 qRT-PCR法检测α-SMA、collagen I和fibronectin在Hcon F细胞中的表达第41-44页
        3.2.6 Western blot法检测α-SMA、collagen I和fibronectin在Hcon F细胞中的蛋白表达第44-46页
        3.2.7 细胞划痕实验检测Hcon F细胞迁移第46-47页
        3.2.8 Transwell迁移实验检测Hcon F细胞迁移第47页
        3.2.9 统计学处理第47-48页
    3.3 实验结果第48-51页
        3.3.1 TGF-β1 对Hcon F细胞增殖的影响第48页
        3.3.2 TGF-β1 对Hcon F细胞周期的影响第48-49页
        3.3.3 TGF-β1 对Hcon F细胞转化的影响第49-50页
        3.3.4 TGF-β1 对Hcon F细胞ECM合成的影响第50-51页
        3.3.5 TGF-β1 对Hcon F细胞迁移的影响第51页
    3.4 小结第51-54页
第4章 NPPB对TGF-β1 诱导的HCONF细胞纤维化的影响第54-66页
    4.1 实验材料第54-55页
        4.1.1 主要试剂第54-55页
        4.1.2 主要仪器第55页
    4.2 实验方法第55-59页
        4.2.1 主要试剂的配制第55-56页
        4.2.2 用CCK-8 法检测NPPB对HconF细胞增殖的影响第56页
        4.2.3 用流式细胞仪检测NPPB对HconF细胞周期分布的影响37第56页
        4.2.4 qRT-PCR法检测NPPB对α-SMA、collagen I和fibronecti在Hcon F细胞中的表达的影响第56页
        4.2.5 Western blot法检测NPPB对HconF细胞α-SMA、            collagen I、fibronectin、PI3K、p-PI3K、AKT、和p-Akt表达的影响第56-58页
        4.2.6 细胞划痕实验检测NPPB对HconF细胞迁移的影响第58页
        4.2.7 Transwell迁移实验检测NPPB对HconF细胞迁移的影响第58页
        4.2.8 统计学处理第58-59页
    4.3 实验结果第59-64页
        4.3.1 NPPB对TGF-β1 诱导的HconF细胞增殖的影响第59-60页
        4.3.2 NPPB对TGF-β1 诱导的HconF细胞周期的影响第60-61页
        4.3.3 NPPB对TGF-β1 诱导的HconF细胞表型转化的影响第61-62页
        4.3.4 NPPB对TGF-β1 诱导的HconF细胞ECM合成的影响第62-63页
        4.3.5 NPPB对TGF-β1 诱导的HconF细胞迁移的影响第63页
        4.3.6 NPPB对TGF-β1 诱导的PI3K/Akt信号通路表达的影响第63-64页
    4.4 小结第64-66页
第5章 抑制CLC-2 的表达对TGF-Β1 诱导的HCONF细胞纤维化的影响第66-82页
    5.1 实验材料第66-67页
        5.1.1 主要试剂第66-67页
        5.1.2 主要仪器第67页
    5.2 实验方法第67-70页
        5.2.1 脂质体Lipofectamine2000介导的CLC-2 si RNA转染第67-68页
        5.2.2 CLC-2 si RNA转染率的检测第68-69页
        5.2.3 用qRT-PCR及Westen blot方法检测转染后的Hcon F细胞CLC-2 在m RNA及蛋白水平表达变化第69页
        5.2.4 用CCK-8 法检测CLC-2 siRNA转染对Hcon F细胞增殖的影响第69页
        5.2.5 qRT-PCR法检测CLC-2 siRNA转染对α-SMA、collagen I和fibronectin在Hcon F细胞中的表达的影响第69页
        5.2.6 Western blot法检测CLC-2 siRNA转染对Hcon F细胞α-SMA、collagen I、fibronectin、PI3K、p-PI3K、AKT、和p-Akt表达的影响第69页
        5.2.7 细胞划痕实验检测CLC-2 siRNA转染对HconF细胞迁移的影响第69-70页
        5.2.8 Transwell迁移实验检测CLC-2 si RNA转染对HconF细胞迁移第70页
        5.2.9 统计学处理第70页
    5.3 实验结果第70-80页
        5.3.1 CLC-2 siRNA转染率的观察第70页
        5.3.2 CLC-2 siRNA转染对HconF细胞CLC-2 mRNA和蛋白表达的影响第70-72页
        5.3.3 TGF-β1 对HconF细胞CLC-2 mRNA和蛋白表达的影响53第72-73页
        5.3.4 抑制ClC-2 表达对TGF-β1 诱导的HconF细胞CLC-2mRNA和蛋白表达的影响第73-74页
        5.3.5 抑制ClC-2 表达对TGF-β1 诱导的HconF细胞增殖的影响55第74-75页
        5.3.6 抑制ClC-2 表达对TGF-β1 诱导的HconF细胞表型转化的影响第75-76页
        5.3.7 抑制ClC-2 表达对TGF-β1 诱导的HconF细胞ECM合成的影响第76-78页
        5.3.8 抑制ClC-2 表达对TGF-β1 诱导的HconF细胞迁移的影响59第78-79页
        5.3.9 抑制ClC-2 表达对TGF-β1 诱导的PI3K/Akt信号通路表达的影响第79-80页
    5.4 小结第80-82页
第6章 讨论第82-90页
第7章 结论第90-92页
参考文献第92-115页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第115-116页
致谢第116页

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