小鹅瘟病毒PCR检测方法的建立和山东济宁地区小鹅瘟流行病学调查
| 符号说明 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 一 引言 | 第13-26页 |
| 1 流行病学 | 第13-14页 |
| 2 病原学 | 第14-16页 |
| 3 临床症状和病理变化 | 第16-18页 |
| ·临床症状 | 第16-17页 |
| ·病理变化剖检变化 | 第17-18页 |
| 4 小鹅瘟病毒的实验室诊断 | 第18-23页 |
| ·病毒分离鉴定 | 第18页 |
| ·鹅胚分离病毒 | 第18页 |
| ·细胞分离病毒 | 第18页 |
| ·血清学检测 | 第18-22页 |
| ·琼脂扩散试验 | 第18-19页 |
| ·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第19-20页 |
| ·中和试验 | 第20-21页 |
| ·胶乳凝集试验（LAP） | 第21页 |
| ·反向间接血凝试验 | 第21页 |
| ·免疫荧光（IF）抗体技术 | 第21-22页 |
| ·现代分子生物学检测技术 | 第22-23页 |
| ·PCR | 第22页 |
| ·荧光定量PCR | 第22-23页 |
| ·核酸探针技术 | 第23页 |
| 5 小鹅瘟的防治 | 第23-25页 |
| ·传统疫苗 | 第23-24页 |
| ·基因工程疫苗 | 第24-25页 |
| 6 存在的问题和本研究的目的意义 | 第25-26页 |
| 二 材料与方法 | 第26-34页 |
| 1.材料与方法 | 第26-34页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·病料的采集 | 第26页 |
| ·所用主要试剂 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-34页 |
| ·临床剖检 | 第27页 |
| ·病毒分离 | 第27-28页 |
| ·引物设计与合成 | 第28页 |
| ·小鹅瘟病毒核酸的提取 | 第28页 |
| ·PCR扩增 | 第28-30页 |
| ·引物的稀释 | 第28-29页 |
| ·PCR体系 | 第29页 |
| ·PCR条件的优化 | 第29-30页 |
| ·PCR检测方法的特异性试验 | 第30页 |
| ·PCR检测方法的灵敏性试验 | 第30页 |
| ·PCR检测方法的重复性试验 | 第30页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第30页 |
| ·测序分析 | 第30-33页 |
| ·基因克隆 | 第30-31页 |
| ·核酸片段的回收 | 第31页 |
| ·产物的连接 | 第31页 |
| ·DH5α大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第31-32页 |
| ·连接产物的转化 | 第32页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第32-33页 |
| ·小鹅瘟流行病学调查 | 第33页 |
| ·济宁部分地区鹅养殖现状与小鹅瘟发病情况调查 | 第33页 |
| ·免疫程序 | 第33-34页 |
| 三 结果 | 第34-43页 |
| ·病毒分离 | 第34-35页 |
| ·PCR扩增结果 | 第35-39页 |
| ·引物不同稀释浓度 | 第35-36页 |
| ·最佳退火温度 | 第36页 |
| ·引物灵敏性试验 | 第36-37页 |
| ·引物特异性试验 | 第37-38页 |
| ·重复性试验 | 第38页 |
| ·病毒分离PCR检测结果 | 第38-39页 |
| ·小鹅瘟病毒病临床症状及剖检变化 | 第39-40页 |
| ·实验室PCR检测鉴定结果与结果统计分析 | 第40-42页 |
| ·血清学检测结果 | 第42-43页 |
| ·小鹅瘟防疫程序 | 第43页 |
| 四 讨论 | 第43-45页 |
| 五 结论 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
