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GATA-6过表达和干扰载体的构建及其对鹅颗粒细胞类固醇合成及相关基因的调控研究

摘要第1-7页
Abstract第7-10页
常用词语英文缩写第10-14页
前言第14页
1 文献综述第14-26页
   ·GATA转录因子家族基因简介第14-16页
   ·GATA-4和GATA-6在各个组织中的作用第16-17页
     ·GATA-4和GATA-6的组织表达第16页
     ·GATA-4和GATA-6主要的生理作用第16-17页
     ·激素负反馈调节GATA-4以及GATA-6第17页
   ·影响GATA转录因子(GATA-4/GATA-6)的信号调控机制第17-19页
     ·TGFβ信号通路影响GATA转录因子活性第17-18页
     ·CAMP/MAP信号通路影响GATA转录因子活性第18页
     ·MAPK信号通路影响类固醇合成第18-19页
   ·GATA转录因子调控类固醇合成以及间接调控卵泡发育第19-25页
     ·GATA-4/GATA-6下游靶基因第19-23页
     ·类固醇合成信号通路研究第23-24页
     ·GATA家族调控卵泡发育研究第24-25页
   ·研究目的及意义第25-26页
2 材料与方法第26-42页
   ·试验材料第26-29页
     ·试验样品第26页
     ·药品和试剂第26-29页
   ·试验方法第29-42页
     ·引物设计及合成第29-30页
     ·总RNA提取及质量检测第30-32页
     ·RNA的逆转录反应第32页
     ·GATA-6 PCR引物的设计与合成第32-33页
     ·GATA-6序列片段的克隆以及序列测序第33页
     ·目的基因PCR产物胶回收第33-34页
     ·胶回收产物与PMD19-T载体的连接第34页
     ·连接物的转化第34-35页
     ·GATA-6过表达载体的构建以GATA-6干扰载体的构建第35页
     ·GATA-6表达载体和干扰载体的扩繁、质粒抽提及鉴定第35-37页
     ·天府肉鹅颗粒细胞原代培养第37页
     ·GATA-6干扰载体和过表达载体转染鹅颗粒细胞以及GATA-4和GATA-6过表达载体共转染鹅颗粒细胞第37-39页
     ·CCK-8细胞活性检测第39页
     ·细胞外液激素测定第39页
     ·荧光定量PCR第39-41页
     ·数据分析第41-42页
3 结果与分析第42-56页
   ·鹅GATA-6编码区序列克隆第42-43页
     ·卵巢RNA提取结果胶图第42页
     ·GATA-6编码区PCR扩增第42-43页
     ·编码区序列拼接第43页
   ·GATA-6真核表达载体构建第43-44页
     ·GATA-6 CDS区全长序列扩扩增胶图第43页
     ·PEGFP-GATA-6真核表达载体的扩繁与鉴定第43-44页
   ·GATA-6干扰载体转染鹅颗粒细胞第44-48页
     ·GATA-6干扰载体转染鉴定第44-45页
     ·GATA-6干扰载体转染鹅颗粒细胞对类固醇合成的影响第45-46页
     ·GATA-6干扰载体转染鹅颗粒细胞对类固醇合成相关靶基因的影响第46-48页
   ·GATA-6过表达载体转染鹅颗粒细胞第48-52页
     ·GATA-6过表达载体转染鉴定第48-50页
     ·GATA-6过表达载体转染鹅颗粒细胞对类固醇合成的影响第50页
     ·GATA-6过表达载体转染鹅颗粒细胞对类固醇合成相关基因的影响第50-52页
   ·GATA-6过表达载体和GATA-4真核表达载体共转染鹅颗粒细胞第52-56页
     ·GATA-6过表达载体以及GATA-4过表达载体共转染颗粒细胞鉴定第52-53页
     ·GATA-6和GATA-4过表达载体共转染鹅颗粒细胞对类固醇合成影响第53-54页
     ·GATA-6过表达载体以及GATA-4过表达载体共转染鹅颗粒细胞对类固醇合成相关靶基因的影响第54-56页
4、讨论第56-61页
   ·GATA-6对颗粒细胞增殖、活性的影响第56-57页
   ·干扰GATA-6基因对下游靶基因以及类固醇合成的影响第57-58页
   ·过表达GATA-6基因对其下游靶基因的调控影响第58-59页
   ·GATA-4和GATA-6相互作用调控类固醇合成相关靶基因转录第59-61页
5、结论第61-62页
参考文献第62-69页
致谢第69-70页
攻读硕士研究生期间参与的科研项目和发表的论文第70页

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