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H9N2亚型禽流感病毒的序列分析及其生物学特性研究

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
符号说明第12-13页
第一部分 文献综述第13-25页
 1 我国H9N2亚型禽流感病毒的历史和流行病学第13-15页
 2 H9N2亚型禽流感病毒在鸡的临床症状第15页
 3 我国H9N2亚型禽流感病毒抗原漂移第15-16页
 4 我国H9N2亚型禽流感病毒种间传播第16-18页
 5 我国H9N2亚型禽流感病毒的遗传和生物进化第18-19页
 6 H9N2亚型禽流感病毒在动物模型的毒力,传递和分子机制第19-20页
 7 H9N2基因供体的新型流感病毒第20-21页
 参考文献第21-25页
第二部分 论文试验第25-73页
 第一章 H9N2亚型禽流感病毒的分离鉴定第25-37页
  1 材料第25-27页
   ·病料来源以及病毒第25页
   ·SPF鸡胚、试验动物第25页
   ·试剂第25-26页
   ·试剂配制第26页
   ·主要仪器设备第26-27页
  2 方法第27-29页
   ·流行病学调查第27页
   ·病毒的分离与鉴定第27页
     ·病料处理第27页
     ·鸡胚接种第27页
     ·血凝、血凝抑制试验第27页
   ·纯化并扩增病毒第27页
   ·H9N2亚型禽流感病毒油乳剂疫苗制备第27-28页
   ·H9N2亚型血清制备第28页
   ·HI交叉试验第28页
   ·病毒鸡胚半数感染量(EID_(50))和鸡胚半数致死量(ELD_(50))测定第28-29页
   ·半数细胞培养感染剂量(TCID_(50))测定第29页
     ·MDCK细胞的制备第29页
     ·病毒的稀释第29页
     ·接种病毒第29页
  3 结果第29-35页
   ·病毒分离与鉴定第29-30页
   ·HI交叉试验第30-34页
   ·分离株EID_(50)、ELD_(50)和TCID_(50)的测定第34-35页
  4 讨论第35-36页
  参考文献第36-37页
 第二章 分离株HA基因及部分分离株全基因测序分析第37-56页
  1 材料第37-38页
   ·病毒第37页
   ·SPF鸡胚第37页
   ·试剂第37页
   ·试剂配制第37-38页
   ·主要仪器设备第38页
  2 方法第38-41页
   ·纯化并扩增病毒第38页
   ·扩增病毒HA基因片段并测序第38-39页
     ·反转录引物设计第38页
     ·HA基因RT-PCR引物设计第38-39页
     ·病毒RNA提抽第39页
     ·HA基因的扩增第39页
     ·1%琼脂糖凝胶电泳第39页
   ·扩增病毒全基因片段并测序第39-41页
     ·反转录引物设计第39页
     ·全基因RT-PCR引物设计第39-40页
     ·病毒RNA提抽第40页
     ·全基因的扩增第40-41页
     ·1%琼脂糖凝胶电泳第41页
   ·序列分析第41页
  3 结果第41-55页
   ·分离株HA基因扩增和测序第41-46页
     ·RT-PCR扩增第41-42页
     ·分离株HA基因遗传进化分析第42-43页
     ·分离株HA基因核苷酸同源性分析第43页
     ·分离株HA氨基酸变异分析第43-46页
   ·8株分离株区域7个基因序列比较第46-55页
     ·RT-PCR扩增第46-47页
     ·PB2基因分析第47页
     ·PB1基因分析第47-48页
     ·PA基因分析第48-49页
     ·NP基因分析第49-50页
     ·NA基因第50-53页
     ·M基因分析第53页
     ·NS基因分析第53-55页
  4 讨论第55页
  参考文献第55-56页
 第三章 分离株致病性及其传播特性研究第56-73页
  1 材料第56-57页
   ·病毒第56页
   ·SPF鸡胚、试验动物第56页
   ·试剂第56-57页
   ·试剂配制第57页
   ·主要仪器设备第57页
  2 方法第57-59页
   ·病毒的纯化与扩增第57页
   ·病毒对鸡致病性试验第57-59页
     ·动物试验分组第57-58页
     ·病毒处理、接种与检测第58-59页
     ·石蜡切片的制作第59页
  3 结果第59-70页
   ·分离株的复制与传播第59-61页
     ·分离株感染鸡后气管和泄殖腔棉拭子病毒分离第59-60页
     ·分离株感染鸡后气管和肺组织内病毒EID_(50)和ELD_(50)第60-61页
   ·病理变化第61-70页
  4 讨论第70-71页
  参考文献第71-73页
全文小结第73-74页
致谢第74-75页

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