摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
符号说明 | 第12-13页 |
第一部分 文献综述 | 第13-25页 |
1 我国H9N2亚型禽流感病毒的历史和流行病学 | 第13-15页 |
2 H9N2亚型禽流感病毒在鸡的临床症状 | 第15页 |
3 我国H9N2亚型禽流感病毒抗原漂移 | 第15-16页 |
4 我国H9N2亚型禽流感病毒种间传播 | 第16-18页 |
5 我国H9N2亚型禽流感病毒的遗传和生物进化 | 第18-19页 |
6 H9N2亚型禽流感病毒在动物模型的毒力,传递和分子机制 | 第19-20页 |
7 H9N2基因供体的新型流感病毒 | 第20-21页 |
参考文献 | 第21-25页 |
第二部分 论文试验 | 第25-73页 |
第一章 H9N2亚型禽流感病毒的分离鉴定 | 第25-37页 |
1 材料 | 第25-27页 |
·病料来源以及病毒 | 第25页 |
·SPF鸡胚、试验动物 | 第25页 |
·试剂 | 第25-26页 |
·试剂配制 | 第26页 |
·主要仪器设备 | 第26-27页 |
2 方法 | 第27-29页 |
·流行病学调查 | 第27页 |
·病毒的分离与鉴定 | 第27页 |
·病料处理 | 第27页 |
·鸡胚接种 | 第27页 |
·血凝、血凝抑制试验 | 第27页 |
·纯化并扩增病毒 | 第27页 |
·H9N2亚型禽流感病毒油乳剂疫苗制备 | 第27-28页 |
·H9N2亚型血清制备 | 第28页 |
·HI交叉试验 | 第28页 |
·病毒鸡胚半数感染量(EID_(50))和鸡胚半数致死量(ELD_(50))测定 | 第28-29页 |
·半数细胞培养感染剂量(TCID_(50))测定 | 第29页 |
·MDCK细胞的制备 | 第29页 |
·病毒的稀释 | 第29页 |
·接种病毒 | 第29页 |
3 结果 | 第29-35页 |
·病毒分离与鉴定 | 第29-30页 |
·HI交叉试验 | 第30-34页 |
·分离株EID_(50)、ELD_(50)和TCID_(50)的测定 | 第34-35页 |
4 讨论 | 第35-36页 |
参考文献 | 第36-37页 |
第二章 分离株HA基因及部分分离株全基因测序分析 | 第37-56页 |
1 材料 | 第37-38页 |
·病毒 | 第37页 |
·SPF鸡胚 | 第37页 |
·试剂 | 第37页 |
·试剂配制 | 第37-38页 |
·主要仪器设备 | 第38页 |
2 方法 | 第38-41页 |
·纯化并扩增病毒 | 第38页 |
·扩增病毒HA基因片段并测序 | 第38-39页 |
·反转录引物设计 | 第38页 |
·HA基因RT-PCR引物设计 | 第38-39页 |
·病毒RNA提抽 | 第39页 |
·HA基因的扩增 | 第39页 |
·1%琼脂糖凝胶电泳 | 第39页 |
·扩增病毒全基因片段并测序 | 第39-41页 |
·反转录引物设计 | 第39页 |
·全基因RT-PCR引物设计 | 第39-40页 |
·病毒RNA提抽 | 第40页 |
·全基因的扩增 | 第40-41页 |
·1%琼脂糖凝胶电泳 | 第41页 |
·序列分析 | 第41页 |
3 结果 | 第41-55页 |
·分离株HA基因扩增和测序 | 第41-46页 |
·RT-PCR扩增 | 第41-42页 |
·分离株HA基因遗传进化分析 | 第42-43页 |
·分离株HA基因核苷酸同源性分析 | 第43页 |
·分离株HA氨基酸变异分析 | 第43-46页 |
·8株分离株区域7个基因序列比较 | 第46-55页 |
·RT-PCR扩增 | 第46-47页 |
·PB2基因分析 | 第47页 |
·PB1基因分析 | 第47-48页 |
·PA基因分析 | 第48-49页 |
·NP基因分析 | 第49-50页 |
·NA基因 | 第50-53页 |
·M基因分析 | 第53页 |
·NS基因分析 | 第53-55页 |
4 讨论 | 第55页 |
参考文献 | 第55-56页 |
第三章 分离株致病性及其传播特性研究 | 第56-73页 |
1 材料 | 第56-57页 |
·病毒 | 第56页 |
·SPF鸡胚、试验动物 | 第56页 |
·试剂 | 第56-57页 |
·试剂配制 | 第57页 |
·主要仪器设备 | 第57页 |
2 方法 | 第57-59页 |
·病毒的纯化与扩增 | 第57页 |
·病毒对鸡致病性试验 | 第57-59页 |
·动物试验分组 | 第57-58页 |
·病毒处理、接种与检测 | 第58-59页 |
·石蜡切片的制作 | 第59页 |
3 结果 | 第59-70页 |
·分离株的复制与传播 | 第59-61页 |
·分离株感染鸡后气管和泄殖腔棉拭子病毒分离 | 第59-60页 |
·分离株感染鸡后气管和肺组织内病毒EID_(50)和ELD_(50) | 第60-61页 |
·病理变化 | 第61-70页 |
4 讨论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-73页 |
全文小结 | 第73-74页 |
致谢 | 第74-75页 |