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嗜麦芽窄食单胞菌生物被膜相关基因的功能基因组学筛选和调控分子机理

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
目录第8-11页
第一章 绪论第11-20页
   ·嗜麦芽窄食单胞菌研究进展第11-14页
     ·生物学性状第11页
     ·分类地位与分布第11页
     ·临床研究第11-12页
     ·耐药性研究第12页
     ·致病机理研究第12-14页
   ·细菌生物被膜研究进展第14-19页
     ·生物被膜的结构和成分第15页
     ·生物被膜的形成过程第15-16页
     ·生物被膜与病原细菌感染的关系第16-17页
     ·生物被膜与耐药性第17-19页
     ·研究目的及技术路线第19-20页
     ·研究目的第19页
     ·总体技术路线第19-20页
第二章 实验材料与方法第20-34页
   ·实验材料第20-23页
     ·菌种及质粒第20页
     ·生化试剂第20页
     ·仪器第20页
     ·培养基第20-21页
     ·引物及序列第21-23页
   ·实验方法第23-34页
     ·总 DNA 的提取第23页
     ·质粒的制备第23-24页
     ·Sma ATCC 13637 感受态细胞的制备和电击转化第24页
     ·大肠杆菌 DH5α热击超级感受态细胞的制备和热击转化第24-25页
     ·突变体抗性稳定性的鉴定第25页
     ·Sma 转座子插入突变体的 Southern Blot 检测第25-26页
     ·TAIL-PCR 分析第26-29页
     ·生物被膜(biofilm)定量检测第29页
     ·读码框内删除突变体(In-frame deletion)的构建第29页
     ·胞外酶活性检测第29-30页
     ·游动性检测第30页
     ·鞭毛检测第30-31页
     ·抑菌活性检测第31页
     ·蛋白质的表达和纯化第31-32页
     ·细菌总 RNA 的提取、半定量 RT-PCR第32-33页
     ·EMSA第33-34页
第三章 研究结果与讨论第34-58页
   ·嗜麦芽窄食单胞菌转座子突变体库的构建第34-35页
   ·突变体库的质量评价第35-36页
     ·突变体库稳定性的考察第35页
     ·突变体库拷贝数和随机性的考察第35-36页
   ·生物被膜(biofilm)相关基因的筛选第36-46页
     ·生物被膜相关突变体的获得第36-37页
     ·生物被膜相关突变体中拷贝数的确定第37页
     ·生物被膜相关突变体中转座子侧翼序列分析第37-39页
     ·TAIL-PCR 产物的分析第39-46页
   ·嗜麦芽窄食单胞菌鞭毛调控基因 Smlt2299 的功能研究第46-56页
     ·Smlt2299 读框内删除突变体的构建第46-48页
     ·Smlt2299 互补菌株的构建第48页
     ·Smlt2299 突变体的表型鉴定及分析第48-52页
     ·FsnR 对鞭毛基因合成调控的研究第52-56页
   ·小结第56-58页
第四章 结论与展望第58-59页
   ·结论第58页
   ·展望第58-59页
参考文献第59-66页
附表第66-67页
攻读学位期间发表论文与研究成果清单第67-68页
致谢第68页

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