| 摘要 | 第1-7页 |
| 1 前言 | 第7-17页 |
| ·VIGS体系的研究进展 | 第7-11页 |
| ·VIGS体系的应用 | 第7-9页 |
| ·VIGS的作用机制 | 第9-10页 |
| ·VIGS载体 | 第10页 |
| ·病毒载体的侵染 | 第10-11页 |
| ·花色苷及其代谢途径的研究进展 | 第11-13页 |
| ·花色苷的结构与性质 | 第11-12页 |
| ·花色苷的代谢途径 | 第12-13页 |
| ·转录因子在类黄酮代谢途径中的研究进展 | 第13-16页 |
| ·植物中转录因子与花色苷的合成 | 第14-15页 |
| ·植物中花色苷合成的转录激活子和抑制子 | 第15-16页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第16-17页 |
| 2 观赏海棠幼叶VIGS体系的建立 | 第17-34页 |
| ·试验材料 | 第17页 |
| ·植物材料 | 第17页 |
| ·菌株及质粒 | 第17页 |
| ·工具酶及主要生化试剂 | 第17页 |
| ·主要仪器设备 | 第17页 |
| ·试验方法 | 第17-23页 |
| ·观赏海棠幼叶总RNA的提取与cDNA的合成 | 第18页 |
| ·观赏海棠McMYB10和McMYB16基因片段的扩增 | 第18-19页 |
| ·质粒的提取 | 第19页 |
| ·双酶切 | 第19-20页 |
| ·凝胶中回收DNA片段 | 第20页 |
| ·连接 | 第20页 |
| ·转化至大肠杆菌DH5α | 第20-21页 |
| ·农杆菌感受态的制备与转化 | 第21页 |
| ·农杆菌的侵染 | 第21-22页 |
| ·观赏海棠McMYB10基因沉默分析 | 第22-23页 |
| ·数据处理 | 第23页 |
| ·结果与分析 | 第23-31页 |
| ·观赏海棠叶片RNA的提取 | 第23-24页 |
| ·观赏海棠McMYB10、McMYB16基因片段的克隆 | 第24页 |
| ·TRV2-McMYB10和TRV2-McMYB16表达载体的构建 | 第24-26页 |
| ·VIGS体系侵染方法的建立 | 第26页 |
| ·观赏海棠幼叶VIGS体系的优化 | 第26-28页 |
| ·观赏海棠品种王族'Royalty’与火焰'Flame'VIGS体系的建立 | 第28-29页 |
| ·HPLC分析 | 第29页 |
| ·转录因子RT-PCR分析与病毒的分子检测 | 第29-31页 |
| ·讨论 | 第31-34页 |
| 3. 观赏海棠幼果VIGS体系的建立 | 第34-39页 |
| ·试验材料 | 第34页 |
| ·植物材料 | 第34页 |
| ·菌株及质粒 | 第34页 |
| ·常用试剂的配制 | 第34页 |
| ·主要仪器设备 | 第34页 |
| ·试验方法 | 第34-35页 |
| ·观赏海棠幼果的真空渗透 | 第34-35页 |
| ·对幼果的果皮与果肉的HPLC分析 | 第35页 |
| ·观赏海棠幼果总RNA提取及cDNA的合成 | 第35页 |
| ·数据处理 | 第35页 |
| ·结果与分析 | 第35-37页 |
| ·烟草脆裂病毒TRV侵染观赏海棠幼果 | 第35-36页 |
| ·沉默观赏海棠幼果花色苷及其他类黄酮物质含量分析 | 第36页 |
| ·观赏海棠幼果中沉默效率的分析 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| 4 观赏海棠McMYB10、McMYB16基因的功能分析 | 第39-48页 |
| ·试验材料 | 第39页 |
| ·植物材料 | 第39页 |
| ·工具酶及主要生化试剂 | 第39页 |
| ·主要仪器设备 | 第39页 |
| ·试验方法 | 第39-40页 |
| ·RNA的提取与cDNA的反转 | 第39页 |
| ·蛋白质三级结构的预测 | 第39页 |
| ·进化树分析 | 第39页 |
| ·转基因烟草 | 第39-40页 |
| ·HPLC | 第40页 |
| ·结果与分析 | 第40-46页 |
| ·观赏海棠不同组织中McMYB10、McMYB16的表达 | 第40-41页 |
| ·McMYB10氨基酸序列分析与其蛋白质三级结构预测 | 第41-42页 |
| ·‘王族’中沉默McMYB10对其他花色苷相关基因基因的影响 | 第42页 |
| ·McMYB10在异源烟草中的功能分析 | 第42-44页 |
| ·McMYB16氨基酸序列分析与其蛋白质三级结构预测 | 第44页 |
| ·‘火焰’中沉默McMYB16对其他花色苷代谢相关基因的影响 | 第44-45页 |
| ·McMYB16在异源草莓的中功能分析 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| ABSTRACT | 第55-56页 |
| 附录 | 第56-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
