| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 1 前言 | 第9-20页 |
| ·猪流行性腹泻病毒的研究进展 | 第9-11页 |
| ·PEDV基因结构的研究 | 第9-10页 |
| ·PEDV的结构蛋白及其功能 | 第10页 |
| ·PEDV抗原表位的研究 | 第10页 |
| ·PEDV疫苗的研究 | 第10-11页 |
| ·蛋白异源表达研究现状 | 第11-16页 |
| ·丝状真菌在蛋白异源蛋白中的应用 | 第11-12页 |
| ·影响丝状真菌异源蛋白表达的因素及改良策略 | 第12-14页 |
| ·黑曲霉蛋白表达的研究现状 | 第14-15页 |
| ·镰孢霉蛋白表达的研究现状 | 第15-16页 |
| ·根癌农杆菌介导的丝状真菌遗传转化体系 | 第16-18页 |
| ·根癌农杆菌介导真菌遗传转化的特点 | 第17页 |
| ·根癌农杆菌介导真菌遗传转化的影响因素 | 第17-18页 |
| ·根癌农杆菌介导真菌遗传转化的应用 | 第18页 |
| ·本论文的研究背景及内容 | 第18-20页 |
| ·研究背景 | 第18-19页 |
| ·研究目的与意义 | 第19页 |
| ·研究内容 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-40页 |
| ·试验材料 | 第20-25页 |
| ·菌株和质粒 | 第20页 |
| ·工具酶及相关试剂 | 第20-22页 |
| ·主要仪器和设备 | 第22-23页 |
| ·培养基和主要溶液 | 第23-25页 |
| ·实验方法 | 第25-40页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳 | 第25-26页 |
| ·琼脂糖DNA凝胶电泳 | 第26-27页 |
| ·真菌基因组DNA的提取 | 第27页 |
| ·大肠杆菌的化学转化 | 第27-28页 |
| ·镰孢霉、黑曲霉和米曲霉分泌背景蛋白的对比 | 第28页 |
| ·镰孢霉、黑曲霉和米曲霉发酵液中蛋白酶活性的对比 | 第28页 |
| ·黑曲霉和镰孢霉发酵形态的观察 | 第28页 |
| ·镰孢霉对潮霉素B的敏感性实验 | 第28-29页 |
| ·重组质粒pFGL59-PgpdA-Ttrpc(pLH51)的构建 | 第29-33页 |
| ·重组质粒pFGL59-PglaA-Ttrpc(pLH96)的构建 | 第33页 |
| ·重组质粒pFGL59-Ptrypsin-Ttrpc(pLH97)的构建 | 第33页 |
| ·coe基因表达载体的构建 | 第33-34页 |
| ·coe基因的密码子优化 | 第34-36页 |
| ·Acocoe基因的表达载体的构建 | 第36-37页 |
| ·Fcocoe基因的表达载体的构建 | 第37页 |
| ·根癌农杆菌的电转化 | 第37-38页 |
| ·农杆菌介导黑曲霉和镰孢霉的转化 | 第38-39页 |
| ·黑曲霉和镰孢霉发酵液的SDS-PAGE分析 | 第39-40页 |
| 3 结果与讨论 | 第40-63页 |
| ·出发菌株生物特性的分析 | 第40-42页 |
| ·背景蛋白的对比 | 第40页 |
| ·蛋白酶活性的对比 | 第40-41页 |
| ·黑曲霉和镰孢霉发酵形态的观察 | 第41-42页 |
| ·镰孢霉对潮霉素B的敏感性实验 | 第42页 |
| ·表达载体的构建 | 第42-53页 |
| ·丝状真菌基因组DNA的提取 | 第42-43页 |
| ·重组质粒pLH51的构建 | 第43-44页 |
| ·重组质粒pLH96的构建 | 第44-45页 |
| ·重组质粒pLH97的构建 | 第45-46页 |
| ·表达载体pLH98、pLH99和pLH100的构建 | 第46-50页 |
| ·coe基因密码子优化后表达载体的构建 | 第50-53页 |
| ·Coe蛋白在黑曲霉和镰孢霉中的异源表达 | 第53-56页 |
| ·农杆菌介导黑曲霉和镰孢霉的转化 | 第53-55页 |
| ·黑曲霉和镰孢霉转化子的Coe蛋白表达水平分析 | 第55-56页 |
| ·coe的密码子优化及在黑曲霉和镰孢霉中的表达 | 第56-63页 |
| ·coe的密码子优化 | 第56-59页 |
| ·密码子优化后Coe蛋白在黑曲霉中的表达 | 第59-60页 |
| ·密码子优化后Coe蛋白在镰孢霉中的表达 | 第60-63页 |
| 4 结论 | 第63-64页 |
| 5 展望 | 第64-65页 |
| 6 参考文献 | 第65-72页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第72-73页 |
| 8 致谢 | 第73页 |
