| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 文献综述 | 第13-27页 |
| 前言 | 第13-14页 |
| 第一章 脂肪细胞形成的调节因子 | 第14-21页 |
| ·转录调控因子 | 第14-16页 |
| ·PPARγ | 第14-15页 |
| ·C/EBPs | 第15页 |
| ·其他转录因子 | 第15-16页 |
| ·脂肪细胞因子 | 第16-21页 |
| ·Adiponectin | 第16-17页 |
| ·Leptin | 第17-18页 |
| ·Resistin | 第18-19页 |
| ·Interleukin-6 | 第19-21页 |
| 第二章 RBP4的研究进展 | 第21-27页 |
| ·RBP基因简介 | 第21-22页 |
| ·RBP的基因结构 | 第21页 |
| ·RBP的作用机制 | 第21-22页 |
| ·RBP4的生物学功能 | 第22-27页 |
| ·RBP4简介及其新功能的发现 | 第22页 |
| ·RBP4与肥胖和胰岛素抵抗的研究 | 第22-24页 |
| ·RBP4与代谢综合症的研究 | 第24-25页 |
| ·RBP4在人脂肪细胞中的研究 | 第25-27页 |
| 实验研究 | 第27-65页 |
| 前言 | 第27-28页 |
| 第三章 实验材料与实验方法 | 第28-36页 |
| ·试剂配制 | 第28-30页 |
| ·细胞培养用试剂 | 第28页 |
| ·生化实验用试剂 | 第28-29页 |
| ·蛋白检测用试剂 | 第29-30页 |
| ·实验材料 | 第30页 |
| ·细胞来源 | 第30页 |
| ·载体 | 第30页 |
| ·抑制剂 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-35页 |
| ·BJ5183感受态细胞的制备 | 第30-31页 |
| ·pAd-RBP4超表达载体的构建及病毒包装 | 第31-32页 |
| ·pLentiH1-RBP4 shRNA干扰载体的构建及病毒包装 | 第32页 |
| ·病毒滴度测定 | 第32页 |
| ·RNA提取和反转录 | 第32-33页 |
| ·Real-time quantitative PCR | 第33页 |
| ·Western blot | 第33页 |
| ·免疫荧光 | 第33-34页 |
| ·BODIPY和油红O染色 | 第34页 |
| ·免疫共沉淀 | 第34页 |
| ·冰冻切片的制备 | 第34页 |
| ·冰冻切片HE染色 | 第34-35页 |
| ·冰冻切片IF染色 | 第35页 |
| ·其他操作步骤 | 第35页 |
| ·数据分析 | 第35-36页 |
| 第四章 RBP4在猪脂肪细胞中的表达模式分析 | 第36-40页 |
| ·材料与方法 | 第36页 |
| ·实验结果 | 第36-38页 |
| ·RBP4随猪前体脂肪细胞分化表达增加 | 第36-37页 |
| ·RBP4在猪成熟脂肪细胞中高表达 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| ·小结 | 第39-40页 |
| 第五章 超表达RBP4对猪前体脂肪细胞分化的影响 | 第40-46页 |
| ·实验材料与方法 | 第40页 |
| ·实验结果 | 第40-44页 |
| ·RBP4重组腺病毒表达载体的构建及鉴定 | 第40-41页 |
| ·RBP4重组腺病毒的包装、扩繁及滴度测定 | 第41页 |
| ·Ad-RBP4感染猪前体体脂肪细胞的效果 | 第41-42页 |
| ·超表达RBP4抑制猪前体脂肪细胞体外分化 | 第42-43页 |
| ·超表达RBP4影响猪脂肪细胞脂解基因的表达 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 第六章 干扰RBP4对猪前体脂肪细胞分化的影响 | 第46-51页 |
| ·实验材料与方法 | 第46页 |
| ·实验结果 | 第46-50页 |
| ·重组慢病毒干扰载体构建及鉴定 | 第46-47页 |
| ·RBP4重组慢病毒的包装、扩繁及滴度测定 | 第47-48页 |
| ·pLentiH1-RBP4 shRNA感染猪前体脂肪细胞效果 | 第48页 |
| ·干扰RBP4促进猪前体脂肪细胞分化 | 第48-50页 |
| ·讨论 | 第50页 |
| ·小结 | 第50-51页 |
| 第七章 RBP4调节insulin信号通路的作用机制 | 第51-59页 |
| ·实验材料与方法 | 第51页 |
| ·实验结果 | 第51-56页 |
| ·RBP4对猪前体脂肪细胞相关信号通路因子的影响 | 第51-52页 |
| ·insulin诱导RBP4蛋白表达并激活insulin信号通路 | 第52页 |
| ·抑制剂LY294002处理浓度和时间的筛选 | 第52-54页 |
| ·干扰RBP4可以缓解LY294002的作用 | 第54-55页 |
| ·RBP4能够与AKT形成复合物 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 第八章 RBP4对小鼠腹部脂肪组织的影响 | 第59-65页 |
| ·实验材料与方法 | 第59页 |
| ·技术路线 | 第59页 |
| ·实验结果 | 第59-63页 |
| ·Ad-RBP4可增加小鼠腹脂中RBP4的表达 | 第59-61页 |
| ·RBP4影响小鼠腹脂沉积速度 | 第61-62页 |
| ·RBP4影响小鼠腹脂细胞大小 | 第62页 |
| ·RBP4可引起小鼠腹脂的胰岛素抵抗 | 第62-63页 |
| ·讨论 | 第63-64页 |
| ·小结 | 第64-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 创新点 | 第66-67页 |
| 后续研究 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-81页 |
| 附录 | 第81-84页 |
| 缩略词表 | 第84-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 作者简介 | 第87-88页 |
