| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-20页 |
| ·农作物秸秆的现状 | 第9-10页 |
| ·我国农作物秸秆资源现状 | 第9页 |
| ·秸秆的主要结构及营养价值 | 第9页 |
| ·我国秸秆利用现状及存在的问题 | 第9-10页 |
| ·食用菌栽培是一种高效的经济的利用农作物秸秆的方式 | 第10-11页 |
| ·栽培食用菌的意义 | 第10-11页 |
| ·食用菌对秸秆的特殊利用方式 | 第11页 |
| ·平菇概述 | 第11-13页 |
| ·平菇的分类及栽培 | 第11-12页 |
| ·平菇的价值 | 第12-13页 |
| ·平菇在秸秆降解中的巨大作用 | 第13页 |
| ·木质素降解酶系统的研究进展 | 第13页 |
| ·平菇降解酶系统 | 第13页 |
| ·真菌漆酶遗传研究进展 | 第13-17页 |
| ·漆酶概述 | 第13-15页 |
| ·漆酶的原核表达系统 | 第15-16页 |
| ·巴斯德毕赤酵母真核表达系统 | 第16-17页 |
| ·食用菌遗传转化研究进展 | 第17-20页 |
| ·筛选标记 | 第17-18页 |
| ·食用菌启动子 | 第18-20页 |
| 第二章 引言 | 第20-21页 |
| 第三章 平菇漆酶基因的真核表达 | 第21-34页 |
| ·实验材料 | 第21-22页 |
| ·菌株和载体 | 第21页 |
| ·试剂和药品 | 第21页 |
| ·培养基配方 | 第21页 |
| ·仪器设备 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-28页 |
| ·漆酶基因的信号肽分析预测 | 第22页 |
| ·Ppic9k-CDNA重组载体构建示意图 | 第22-23页 |
| ·重组表达质粒的转化示意图 | 第23页 |
| ·重组质粒pPIC9k-cDNA的构建方法 | 第23-28页 |
| ·电转化法转化毕赤酵母 | 第28页 |
| ·结果与分析 | 第28-33页 |
| ·漆酶基因的信号肽分析预测 | 第28-29页 |
| ·带有酶切位点的目的基因的获得 | 第29-30页 |
| ·重组质粒PMD19-CDNA酶切及PCR验证结果 | 第30页 |
| ·质粒pPIC9k提取及双酶切酶切 | 第30-31页 |
| ·表达质粒pPIC9k-cDNA的双酶切 | 第31-32页 |
| ·表达载体的单酶切线性化 | 第32页 |
| ·电转化法转化毕赤酵母 | 第32-33页 |
| ·本章小结 | 第33-34页 |
| 第四章 平菇转漆酶工程菌株的构建 | 第34-61页 |
| ·实验材料 | 第34-35页 |
| ·菌种和载体 | 第34页 |
| ·试剂和药品 | 第34页 |
| ·主要溶液配制 | 第34页 |
| ·培养基配方 | 第34-35页 |
| ·实验方法 | 第35-47页 |
| ·表达载体的构建 | 第35-37页 |
| ·重组载体遗传转化的技术路线 | 第37-38页 |
| ·质粒pAN7-1改造及表达载体pAN7-1’-CDNA构建步骤 | 第38-41页 |
| ·平菇的遗传转化 | 第41-47页 |
| ·结果和分析 | 第47-59页 |
| ·pAN7-1中不带有潮霉素部分碱基序列的小片段的获得 | 第47页 |
| ·改造后的载体PAN7-1’的获得 | 第47-48页 |
| ·带有酶切位点的目的基因的获得 | 第48-49页 |
| ·表达质粒pAN7-1’-CDNA的检测 | 第49-50页 |
| ·原生质体的制备 | 第50-51页 |
| ·原生质体的再生 | 第51页 |
| ·平菇原生质体转化 | 第51-52页 |
| ·CTAB法提取转化子的总DNA,并做PCR鉴定 | 第52-54页 |
| ·菌丝生长速度测定结果 | 第54-56页 |
| ·转化子的酶活测定结果 | 第56-59页 |
| ·栽培实验 | 第59页 |
| ·本章小结 | 第59-61页 |
| 第五章 结论和讨论 | 第61-63页 |
| ·结论 | 第61页 |
| ·平菇漆酶基因的真核表达 | 第61页 |
| ·转漆酶基因工程菌株的构建 | 第61页 |
| ·讨论 | 第61-63页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达系统 | 第61页 |
| ·转基因菌株中外源基因的整合特性以及存在的一些问题 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| ABSTRACT | 第69页 |
