| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一部分 研究背景综述 | 第11-53页 |
| 第一章 MicroRNA的研究进展 | 第12-23页 |
| ·miRNA的定义 | 第12-16页 |
| ·miRNA的加工成熟过程及作用机制 | 第16-21页 |
| ·miRNA的生物学意义及前景展望 | 第21-23页 |
| 第二章 MicroRNA在癌症中的研究 | 第23-27页 |
| ·miRNA与细胞的生长、分化密切相关 | 第23页 |
| ·miRNA与癌症相关联的发现 | 第23-24页 |
| ·miRNA与癌症相关联的具体机制 | 第24-25页 |
| ·约50%的miRNA位于与肿瘤相关的脆性位点 | 第25页 |
| ·与癌症有关的miRNA | 第25-27页 |
| 第三章 神经母细胞瘤(NB)介绍及microRNA在NB中的研究进展 | 第27-36页 |
| ·神经母细胞瘤肿瘤起源及发生部位 | 第27-28页 |
| ·神经母细胞瘤的临床表现及诊断 | 第28-29页 |
| ·神经母细胞瘤的组织病理学 | 第29页 |
| ·神经母细胞瘤的病因和发病机制 | 第29-31页 |
| ·神经母细胞瘤临床分期 | 第31-32页 |
| ·神经母细胞瘤的预后因素 | 第32-33页 |
| ·microRNA在神经母细胞瘤中的研究进展 | 第33-36页 |
| 第四章 骨肉瘤(Osteosarcoma)介绍及microRNA在骨肉瘤中的研究进展 | 第36-43页 |
| ·骨肉瘤的定义及诊断标准 | 第36页 |
| ·骨肉瘤的肿瘤阶段划分 | 第36-37页 |
| ·骨肉瘤的流行病学 | 第37页 |
| ·骨肉瘤的病因学 | 第37页 |
| ·骨肉瘤的肿瘤细胞起源 | 第37-38页 |
| ·骨肉瘤的临床表现 | 第38页 |
| ·骨肉瘤的诊断方法 | 第38-39页 |
| ·骨肉瘤的治疗方案 | 第39-40页 |
| ·骨肉瘤的预后因素 | 第40页 |
| ·骨肉瘤的分子发病机制 | 第40-41页 |
| ·microRNA在骨肉瘤中的研究 | 第41-43页 |
| 参考文献 | 第43-53页 |
| 第二部分 实验部分 | 第53-110页 |
| 第一章 神经母细胞瘤转移相关的microRNA表达谱研究 | 第54-75页 |
| ·实验材料和仪器 | 第55页 |
| ·实验方法 | 第55-61页 |
| ·miRNA的qRT-PCR定量检测 | 第55-59页 |
| ·miRNA的生物芯片实验 | 第59-60页 |
| ·预测miRNA的靶位点 | 第60-61页 |
| ·数值的统计分析 | 第61页 |
| ·实验结果 | 第61-69页 |
| ·神经母细胞瘤转移肿瘤与原位肿瘤相比差异表达的microRNAs研究 | 第61-65页 |
| ·使用real-time qRT-PCR方法验证差异变化的microRNAs | 第65-67页 |
| ·差异变化的microRNAs靶基因的生物信息学预测 | 第67-69页 |
| ·实验讨论 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-75页 |
| 第二章 骨肉瘤组织中MicroRNA的表达谱的研究 | 第75-88页 |
| ·实验材料和仪器 | 第76页 |
| ·实验方法 | 第76-81页 |
| ·组织标本中RNA的提取 | 第76-77页 |
| ·生物芯片的制作流程与方法 | 第77-79页 |
| ·microRNA的定量PCR | 第79-81页 |
| ·数值的统计分析 | 第81页 |
| ·实验结果 | 第81-86页 |
| ·骨肉瘤肿瘤组织标本收集情况 | 第81页 |
| ·骨肉瘤肿瘤组织microRNA芯片实验 | 第81-82页 |
| ·与骨肉瘤发生相关的microRNA的表达谱 | 第82-84页 |
| ·使用qRT-PCR的方法对芯片中显著变化的microRNA进行验证 | 第84-85页 |
| ·骨肉瘤microRNA表达谱中对化疗敏感/化疗抵抗的microRNA | 第85-86页 |
| ·结果讨论 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-88页 |
| 第三章 hsa-miR-199a-5p抑制骨肉瘤细胞系MG-63的增殖与迁移,促进肿瘤细胞凋亡与分化 | 第88-110页 |
| ·实验材料和仪器 | 第89-90页 |
| ·实验方法 | 第90-95页 |
| ·细胞培养 | 第90-91页 |
| ·细胞转染方法 | 第91-92页 |
| ·miRNA的过表达和干扰 | 第92页 |
| ·组织标本中RNA的提取(同2.2.1) | 第92页 |
| ·细胞增殖的测定方法 | 第92页 |
| ·细胞凋亡的测定方法 | 第92-93页 |
| ·细胞迁移的测定方法 | 第93-94页 |
| ·qRT-PCR实验方法(同2.2.3) | 第94页 |
| ·钙沉积物“钙结节”的染色方法 | 第94页 |
| ·分化Markers的引物列表 | 第94页 |
| ·数据的统计分析 | 第94-95页 |
| ·实验结果 | 第95-106页 |
| ·hsa-miR199-5p在MG-63中的表达水平测定 | 第95-97页 |
| ·在MG-63细胞系中转染hsa-miR-199a-5p mimic和hsa-miR-199a-5p inhibitor的转染效率 | 第97-98页 |
| ·在MG-63细胞中过表达hsa-miR-199a-5p对MG-63细胞的增殖情况的影响 | 第98-99页 |
| ·在MG-63细胞中过表达hsa-miR-199a-5p对MG-63细胞的凋亡情况的影响 | 第99-101页 |
| ·在MG-63细胞中过表达hsa-miR-199a-5p对MG-63细胞的分化情况的影响 | 第101-102页 |
| ·在MG-63细胞中过表达hsa-miR-199a-5p对MG-63细胞的迁移情况的影响 | 第102-105页 |
| ·在MG-63细胞中过表达hsa-miR-199a-5p增加矿物沉积 | 第105-106页 |
| ·实验讨论 | 第106-108页 |
| 参考文献 | 第108-110页 |
| 附录 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第110-112页 |
| 致谢 | 第112-113页 |
