| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-25页 |
| ·肿瘤概述 | 第11-16页 |
| ·癌症的发生发展 | 第11-12页 |
| ·肿瘤研究现状 | 第12-14页 |
| ·肿瘤治疗概述 | 第14-16页 |
| ·抗有丝分裂类化疗药物和有丝分裂阻滞 | 第16-18页 |
| ·抗有丝分裂类化疗药物概述及其作用原理 | 第16页 |
| ·有丝分裂检查点和有丝分裂阻滞 | 第16-17页 |
| ·抗有丝分裂类化疗药物的应用现状及面临的问题 | 第17-18页 |
| ·有丝分裂阻滞后细胞的命运及相关研究 | 第18-21页 |
| ·概述 | 第18页 |
| ·分裂期死亡(mitotic cell death) | 第18-19页 |
| ·Slippage | 第19页 |
| ·不正常分裂 | 第19-20页 |
| ·解释细胞在阻滞期走向不同命运的假说 | 第20-21页 |
| ·尚待解决的问题 | 第21页 |
| ·Ribosome profiling技术 | 第21-23页 |
| ·高通量测序技术概述 | 第21-22页 |
| ·Ribosome profiling技术的原理及其发展 | 第22-23页 |
| ·Notch2研究概况 | 第23-25页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第25-43页 |
| ·细胞培养和细胞周期同步化 | 第25-26页 |
| ·试剂和仪器 | 第25页 |
| ·Hela细胞的培养 | 第25-26页 |
| ·Hela细胞周期同步化 | 第26页 |
| ·不同时期Hela细胞的获取 | 第26-28页 |
| ·G1、S和G2期细胞的获取 | 第27页 |
| ·非阻滞分裂期细胞的获取 | 第27-28页 |
| ·有丝分裂阻滞期细胞的获取 | 第28页 |
| ·Ribosome profiling | 第28-34页 |
| ·试剂及配方 | 第29-30页 |
| ·细胞裂解与核酸酶消化 | 第30-31页 |
| ·超速离心 | 第31页 |
| ·总RNA的提取 | 第31-32页 |
| ·纯化核糖体保护片段 | 第32-33页 |
| ·核糖体文库的构建 | 第33页 |
| ·高通量测序 | 第33页 |
| ·测序结果处理与数据分析 | 第33-34页 |
| ·实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第34-36页 |
| ·试剂、仪器及引物 | 第34-35页 |
| ·逆转录反应 | 第35页 |
| ·qRT-PCR | 第35-36页 |
| ·蛋白质免疫印迹(western-blot) | 第36-40页 |
| ·试剂及配方 | 第36-38页 |
| ·实验步骤 | 第38-39页 |
| ·相对定量 | 第39-40页 |
| ·RNA干扰与慢病毒感染 | 第40-41页 |
| ·试剂和质粒 | 第40页 |
| ·质粒转染与慢病毒包装 | 第40-41页 |
| ·慢病毒感染 | 第41页 |
| ·RNA干扰效率鉴定 | 第41页 |
| ·活细胞实时摄影 | 第41-43页 |
| ·试剂和仪器 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-42页 |
| ·结果分析方法 | 第42-43页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第43-55页 |
| ·收获不同时期的细胞 | 第43页 |
| ·核糖体保护片段的纯化 | 第43-45页 |
| ·超速离心效率的鉴定 | 第43-44页 |
| ·切胶纯化结果 | 第44-45页 |
| ·核糖体文库的构建 | 第45-46页 |
| ·高通量测序与数据分析 | 第46-50页 |
| ·原始数据处理 | 第46-47页 |
| ·高翻译水平基因的筛选及功能聚类 | 第47-48页 |
| ·差异翻译分析 | 第48-50页 |
| ·数据分析结果的选择验证 | 第50-51页 |
| ·信使RNA水平的验证 | 第50-51页 |
| ·蛋白质水平的验证 | 第51页 |
| ·RNA干扰效率的验证 | 第51-52页 |
| ·Notch2下调对阻滞期细胞命运的影响 | 第52-55页 |
| 第四章 总结与讨论 | 第55-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 附录 | 第65-69页 |
| 致谢 | 第69页 |