| 摘要 | 第1-14页 |
| ABSTRACT | 第14-22页 |
| 缩写词表 | 第22-23页 |
| 研究背景 | 第23-54页 |
| 第一章 Fusarium oxysporum L19的分离和鉴定 | 第54-63页 |
| ·材料与方法 | 第55-57页 |
| ·结果与讨论 | 第57-61页 |
| ·L19的培养特征及形态特征 | 第57-59页 |
| ·L19的木质纤维素降解酶系 | 第59-60页 |
| ·温度对F.oxysporum L19生长的影响 | 第60页 |
| ·F.oxysporum L19生长曲线 | 第60-61页 |
| ·结论 | 第61-63页 |
| 第二章 F.oxysporum L19的胞外纤维素酶系 | 第63-74页 |
| ·材料与方法 | 第63-65页 |
| ·结果与讨论 | 第65-72页 |
| ·F.oxysporum L19的胞外纤维素酶系 | 第65-66页 |
| ·F.oxysporum L19胞外粗酶对纤维素材料的降解 | 第66页 |
| ·F.oxysporum L19纤维素酶的温度反应特性 | 第66-67页 |
| ·诱导条件对F.oxysporum L19内切葡聚糖酶合成的影响 | 第67-70页 |
| ·F.oxysporum L19内切葡聚糖酶的HPLC和复性电泳分析 | 第70-72页 |
| ·结论 | 第72-74页 |
| 第三章 F.oxysporum L19内切葡聚糖酶嗜热组分EGt和中温组分EGm的分离纯化及性质 | 第74-99页 |
| ·材料与方法 | 第75-79页 |
| ·结果与讨论 | 第79-96页 |
| ·嗜热(thermophilic)和中温(mesophilic)内切葡聚糖酶的纯化 | 第79-84页 |
| ·EGt和EGm的酶学性质测定 | 第84-91页 |
| ·EGt和EGm的二级结构分析 | 第91-93页 |
| ·EGt和EGm的三级结构简析 | 第93-94页 |
| ·EGt和EGm的协同作用 | 第94-96页 |
| ·结论 | 第96-99页 |
| 第四章 EGt的cDNA克隆及序列分析 | 第99-114页 |
| ·材料与方法 | 第99-104页 |
| ·结果与讨论 | 第104-112页 |
| ·RT-PCR引物的设计 | 第104页 |
| ·总RNA的提取 | 第104-105页 |
| ·RT-PCR扩增EGt的cDNA | 第105页 |
| ·克隆产物的验证 | 第105-106页 |
| ·PCR扩增增加N-末端7个氨基酸 | 第106页 |
| ·PCR扩增在cDNA末端引入限制性核酸内切酶酶切位点 | 第106-107页 |
| ·EGt cDNA的测序和分析 | 第107-109页 |
| ·与已知纤维素酶的基因编码序列的比较 | 第109页 |
| ·EGt在E.coli中外源表达的探索 | 第109-111页 |
| ·EGt的嗜热机理分析 | 第111-112页 |
| ·结论 | 第112-114页 |
| 第五章 表征温度对内切纤维素酶催化动力学及热稳定性影响的新方法 | 第114-137页 |
| ·材料与方法 | 第117-120页 |
| ·结果 | 第120-132页 |
| ·温度对EGm和EGt平均速率(V_(mean))和瞬变速率(V_(inst))的影响 | 第120-122页 |
| ·用Gaussian方程拟合酶温度作用曲线 | 第122-125页 |
| ·温度对EGm和EGt的热稳定性的影响 | 第125-127页 |
| ·温度对EGm和EGt构象的影响 | 第127-130页 |
| ·温度对EGm和EGt二级结构的影响 | 第130-132页 |
| ·讨论 | 第132-137页 |
| ·数值微分-积分法(Differential—Integral method)全面分析温度对酶催化动力学的影响 | 第132-133页 |
| ·温度对内切酶催化反应动力学特性的影响存在对称性和对称性中断的特点 | 第133-134页 |
| ·酶的最适温度 | 第134-135页 |
| ·嗜热酶对高温环境的适应性 | 第135-137页 |
| 第六章 pH及[H~+]对内切葡聚糖酶活力影响的比较 | 第137-147页 |
| ·材料与方法 | 第137页 |
| ·结果 | 第137-146页 |
| ·pH和[H~+]对确定最适pH的影响 | 第137-141页 |
| ·pH及[H~+]对EGm稳定性的影响 | 第141-143页 |
| ·pH与[H~+]两种表征方法确定酶酸碱特性 | 第143-146页 |
| ·讨论 | 第146-147页 |
| 参考文献 | 第147-162页 |
| 全文总结 | 第162-163页 |
| 致谢 | 第163-164页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第164-165页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第165页 |
