| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-24页 |
| ·研究问题的由来 | 第11页 |
| ·棉蚜的研究进展 | 第11-13页 |
| ·棉蚜分布与危害 | 第11-12页 |
| ·棉蚜年生活史 | 第12页 |
| ·棉蚜个体发育 | 第12页 |
| ·棉蚜防治 | 第12-13页 |
| ·昆虫的嗅觉系统 | 第13-15页 |
| ·昆虫气味结合蛋白的研究进展 | 第15-23页 |
| ·气味结合蛋白特征 | 第15页 |
| ·气味结合蛋白分类 | 第15-16页 |
| ·气味结合蛋白3-D结构 | 第16-20页 |
| ·气味结合蛋白的生理功能 | 第20页 |
| ·气味结合蛋白的表达分析 | 第20-23页 |
| ·研究内容、目的和意义 | 第23-24页 |
| 第二章 棉蚜气味结合蛋白基因克隆与序列分析 | 第24-45页 |
| ·材料与方法 | 第24-29页 |
| ·试验材料和试剂 | 第24页 |
| ·总RNA的提取 | 第24-25页 |
| ·RNA纯度及浓度检测 | 第25页 |
| ·cDNA合成 | 第25-26页 |
| ·PCR引物设计 | 第26-27页 |
| ·PCR扩增反应 | 第27页 |
| ·PCR产物纯化 | 第27页 |
| ·克隆 | 第27-28页 |
| ·转化 | 第28页 |
| ·阳性重组子鉴定和测序 | 第28页 |
| ·序列分析 | 第28-29页 |
| ·结果与分析 | 第29-44页 |
| ·RNA的提取 | 第29页 |
| ·棉蚜气味结合蛋白序列分析 | 第29-34页 |
| ·棉蚜气味结合蛋白氨基酸信号肽分析 | 第34页 |
| ·棉蚜气味结合蛋白氨基酸疏水性分析 | 第34-37页 |
| ·棉蚜气味结合蛋白保守结构分析 | 第37-38页 |
| ·棉蚜气味结合蛋白高级结构预测 | 第38-42页 |
| ·AgosOBPs系统进化分析 | 第42-44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| 第三章 棉蚜相对定量PCR内参基因筛选 | 第45-59页 |
| ·材料与方法 | 第46-51页 |
| ·试验材料 | 第46页 |
| ·总RNA的提取 | 第46页 |
| ·RNA纯度及浓度检测 | 第46-47页 |
| ·cDNA合成 | 第47页 |
| ·引物设计 | 第47-48页 |
| ·荧光定量PCR反应 | 第48页 |
| ·统计分析 | 第48-51页 |
| ·结果与分析 | 第51-57页 |
| ·内参基因克隆 | 第51页 |
| ·引物可靠性验证 | 第51页 |
| ·棉蚜qPCR分析候选内参基因的表达水平 | 第51-52页 |
| ·棉蚜实时定量PCR分析中候选内参基因的稳定性分析 | 第52-57页 |
| ·讨论 | 第57-59页 |
| 第四章 棉蚜气味结合蛋白表达谱分析 | 第59-76页 |
| ·材料与方法 | 第59-62页 |
| ·试验材料和试剂 | 第59页 |
| ·总RNA的提取 | 第59-60页 |
| ·RNA纯度及浓度检测 | 第60页 |
| ·cDNA合成 | 第60页 |
| ·荧光定量PCR引物设计 | 第60页 |
| ·qPCR反应 | 第60页 |
| ·荧光定量数据处理 | 第60-62页 |
| ·结果与分析 | 第62-73页 |
| ·气味结合蛋白不同发育阶段棉蚜中的表达谱分析 | 第62-64页 |
| ·气味结合蛋白在棉蚜组织中的表达谱分析 | 第64-66页 |
| ·气味结合蛋白在不同型态棉蚜体内的表达分析 | 第66-70页 |
| ·气味结合蛋白在年生活史不同时期棉蚜体内的表达分析 | 第70-73页 |
| ·讨论 | 第73-76页 |
| 第五章 原核表达棉蚜气味结合蛋白 | 第76-83页 |
| ·材料与方法 | 第76-80页 |
| ·主要试剂 | 第76页 |
| ·AgosOBP基因克隆 | 第76-77页 |
| ·PGEX-4T-1质粒提取 | 第77-78页 |
| ·目标产物与表达载体体外连接 | 第78页 |
| ·转化 | 第78-79页 |
| ·阳性重组子鉴定和测序 | 第79页 |
| ·AgosOBPs重组蛋白诱导表达时间优化 | 第79页 |
| ·AgosOBPs表达形式分析 | 第79-80页 |
| ·SDS-PAGE检测 | 第80页 |
| ·结果与分析 | 第80-82页 |
| ·构建重组质粒PGEX-4T-1/AgosOBPs | 第80-81页 |
| ·AgosOBPs融合蛋白诱导表达时间优化 | 第81-82页 |
| ·AgosOBPs融合蛋白的表达形式分析 | 第82页 |
| ·讨论 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-96页 |
| 致谢 | 第96页 |
