| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-15页 |
| 第一部分 RRM2在肝癌中的表达分析 | 第15-27页 |
| 一、实验材料与仪器 | 第15-18页 |
| 1、细胞株 | 第15页 |
| 2、主要仪器 | 第15-16页 |
| 3、主要试剂和材料 | 第16页 |
| 4、试剂的配方 | 第16-17页 |
| 5、抗体 | 第17页 |
| 6、引物序列 | 第17-18页 |
| 7、数据库 | 第18页 |
| 二、实验步骤 | 第18-22页 |
| (一) 肝癌细胞中RRM2的mRNA水平表达情况 | 第18-20页 |
| (二) 肝癌细胞中RRM2的蛋白水平表达情况 | 第20-22页 |
| (三) GEO数据库分析RRM2在肝癌组织中的表达 | 第22页 |
| (四) 统计方法 | 第22页 |
| 三、实验结果 | 第22-26页 |
| 1、7种肝癌细胞中RRM2在mRNA水平表达情况 | 第22-23页 |
| 2、7种肝癌细胞中RRM2在蛋白水平表达情况 | 第23-24页 |
| 3、小鼠肝癌组织中RRM2高表达 | 第24页 |
| 4、人肝癌组织中RRM2表达高于正常肝组织 | 第24-26页 |
| 四、结果讨论 | 第26-27页 |
| 第二部分 ADR-RRM2-LPD体外抗肝癌细胞活性研究 | 第27-43页 |
| 一、实验材料与仪器 | 第27-30页 |
| 1、细胞株 | 第27页 |
| 2、主要仪器 | 第27-28页 |
| 3、主要试剂和材料 | 第28页 |
| 4、试剂的配方 | 第28-29页 |
| 5、抗体 | 第29-30页 |
| 6、引物(同第一部分) | 第30页 |
| 7、siRNA序列 | 第30页 |
| 二、实验步骤 | 第30-36页 |
| (一) ADR上调肝癌细胞RRM2表达 | 第30-31页 |
| (二) 下调RRM2对肝癌细胞的影响 | 第31-33页 |
| (三) ADR-RRM2-LPD对肝癌细胞活性的影响 | 第33-36页 |
| 三、实验结果 | 第36-41页 |
| 1、ADR上调肝癌细胞表达RRM2 | 第36-37页 |
| 2、RRM2 siRNA抑制肝癌细胞增殖并阻滞细胞周期的S期 | 第37-39页 |
| 3、ADR-RRM2-LPD抑制肝癌细胞活性 | 第39-41页 |
| 四、结果讨论 | 第41-43页 |
| 第三部分 ADR-RRM2-TLPD体外抗肝癌细胞活性研究 | 第43-53页 |
| 一、实验材料与仪器 | 第43-45页 |
| 1、细胞株 | 第43页 |
| 2、主要仪器 | 第43页 |
| 3、主要试剂和材料 | 第43-44页 |
| 4、试剂的配方 | 第44-45页 |
| 5、抗体 | 第45页 |
| 二、实验步骤 | 第45-47页 |
| (一) 各肝癌细胞表面EGFR表达情况 | 第45页 |
| (二) 功能脂质体合成 | 第45页 |
| (三) 共聚焦显微镜观察细胞对功能脂质体的内吞 | 第45-46页 |
| (四) ADR-RRM2-TLPD对肝癌细胞活性的影响 | 第46-47页 |
| 三、实验结果 | 第47-51页 |
| 四、结果讨论 | 第51-53页 |
| 全文小结 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 综述 基因治疗的进展 | 第60-69页 |
| 参考文献 | 第64-69页 |
| 在读期间发表论文和参加科研工作情况说明 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
